老年宫颈癌患者肿瘤细胞侵犯周围神经与临床病理特征的关系及对治疗预后的影响

李媛媛 黄蓓蓓 夏燕 杨大平

(安徽医科大学附属宿州医院(安徽省宿州市立医院)妇科，安徽 宿州 234000)

宫颈癌在女性常见恶性肿瘤中的发病率仅次于乳腺癌，全球每年超过60万人患宫颈癌，其中80%以上分布于发展中国家〔1〕。宫颈癌发病主要集中在40～50岁、60～70岁两个年龄段，理论上认为，受年龄因素的影响，中青年宫颈癌患者和老年宫颈癌患者在病理特征方面存在一定差异，治疗预后也不同〔2〕。相关研究显示，周围神经侵犯与部分恶性肿瘤的预后存在一定关系〔3〕。神经侵犯也被称为肿瘤嗜神经性侵袭，研究认为是独立于淋巴脉管间隙侵袭的另一种肿瘤细胞转移途径〔4〕。目前关于老年宫颈癌患者周围神经侵袭的相关研究较少。本研究旨在探讨老年宫颈癌患者肿瘤细胞侵犯周围神经与临床病理特征的关系及对治疗预后的影响。

1 对象与方法

1.1研究对象 选取2015年1月至2017年12月安徽医科大学附属宿州医院收治的宫颈癌患者130例。入选标准：①病理检查确诊为宫颈鳞癌、腺癌、腺鳞癌；②国际妇产科联盟(FIGO)分期为ⅠA2～ⅡA期；③行广泛性子宫切除和盆腔淋巴结清扫术治疗。排除标准：①术前有放化疗史者；②合并其他类型恶性肿瘤者；③随访资料不完整者。患者年龄61～74岁，平均(54.80±9.26)岁；ⅠA期10例、ⅠB1期76例、ⅠB2期12例、ⅡA期32例。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2免疫组化检测 取术中采集的宫颈癌组织，4%甲醛固定后常规石蜡包埋，4 μm连续切片，首先进行苏木素-伊红(HE)染色，观察肿瘤细胞侵犯周围神经情况，对宫颈癌组织的玻片进行筛选，得到对应的石蜡包块进行免疫组化检查。采用EnVision二步法检测肿瘤细胞侵犯周围神经的阳性率，操作过程：包块、脱蜡、高温高压修复抗原、加入过氧化氢在温箱中温育60 min，滴加鼠抗人S100单克隆抗体，1∶500稀释，4 ℃过夜，滴加二抗，1∶2 000稀释；二氨基联苯胺(DAB)显色、苏木精复染，光学显微镜视野下进行观察，阳性染色呈黄色或棕黄色，阳性细胞数<5%为周围神经侵犯阴性，≥5%为周围神经侵犯阳性。

1.3治疗方案与观察指标 纳入的患者均接受手术治疗，包括腹腔镜手术或开腹手术，术后根据病理检查结果决定是否行辅助化疗，根据FIGO指南，术后病理高危因素包括：手术切缘阳性、宫颈癌宫旁浸润、淋巴结转移，具有任一个高危因素的患者需接受辅助化疗。记录患者临床分期、肿瘤分化程度、病理类型、肿瘤直径、肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况、手术切缘及脉管侵犯情况。

1.4术后随访 宫颈癌患者术后进行为期3年的随访，第1年每3个月随访1次，之后每6个月随访1次，记录患者生存情况，将随访截止时未出现新病灶或复发的患者定义为无复发，分析患者的3年无复发生存率和3年总生存率。

1.5统计学分析 采用SPSS24.0统计学软件进行χ2检验、Cox分析。

2 结 果

2.1宫颈癌组织中肿瘤细胞侵犯周围神经观察 130例老年宫颈癌患者中肿瘤细胞侵犯阳性80例(61.54%)，阴性50例(38.46%)。HE染色观察发现肿瘤细胞侵犯的区域主要为神经束膜和周围结构，部分在神经束膜下方能够延伸到神经内膜及其内部结构，神经外膜、神经内膜血管周围、神经纤维内均可见宫颈癌细胞浸润，见图1。

2.2宫颈癌细胞侵犯周围神经与临床病理特征的关系 宫颈癌细胞周围神经侵犯的阳性率在不同临床分期、分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移、手术切缘、脉管侵犯的老年宫颈癌患者间比较差异有统计学意义(P<0.01)；在不同病理类型、肿瘤浸润深度的老年宫颈癌患者间比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

侵犯周围神经(×100) 侵入神经纤维内(×400)图1 宫颈癌细胞侵犯周围神经观察(HE染色)

表1 宫颈癌细胞侵犯周围神经与临床病理特征的关系〔n(%)〕

2.3宫颈癌细胞侵犯周围神经对3年无复发生存率和总生存率的影响 宫颈癌细胞侵犯周围神经阳性的患者3年无复发生存率和总生存率低于宫颈癌细胞侵犯周围神经阴性患者，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 宫颈癌细胞侵犯周围神经对3年无复发生存率和总生存率的影响〔n(%)〕

2.4老年宫颈癌患者病情复发的单因素分析 周围神经侵犯、临床分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、手术切缘、脉管侵犯是老年宫颈癌患者病情复发的影响因素(P<0.01)。见表3。

表3 老年宫颈癌患者病情复发的Cox单因素分析

2.5老年宫颈癌患者病情复发的多因素分析 为排除各因素之间的相互影响进一步构建Cox多因素模型，结果显示，周围神经侵犯、分化程度、浸润深度、淋巴结转移是老年宫颈癌患者病情复发的独立影响因素(P<0.01)。见表4。

表4 老年宫颈癌患者病情复发的Cox多因素分析

3 讨 论

肿瘤细胞周围神经侵犯主要通过神经内、神经束膜内的淋巴管来实现〔5〕。相关研究显示，在前列腺癌、胰腺癌、膀胱癌等多种恶性肿瘤中均存在肿瘤细胞周围神经侵犯〔6～8〕。在部分恶性肿瘤中周围神经侵犯被认为与患者不良预后密切相关，会缩短生存时间。相关研究显示，约74%有肿瘤细胞周围神经侵犯的胰腺癌患者有淋巴结转移，提示存在周围神经侵犯的胰腺癌患者淋巴结转移风险增加〔9〕。近年来研究认为，周围神经侵犯是肿瘤细胞转移的途径之一〔10〕；观察前列腺癌患者病理切片发现，血管、淋巴结未见肿瘤细胞侵犯，但周围神经受到侵犯，也证实了上述观点。目前关于宫颈癌患者肿瘤细胞周围神经侵犯的研究较少，探究周围神经侵犯与宫颈癌患者预后的影响对临床诊治具有重要意义。

本研究结果提示肿瘤细胞周围神经侵犯与老年宫颈癌患者临床病理特征密切相关，随着临床分期增加、低分化程度、肿瘤大小增加、出现淋巴结转移、手术切缘阳性、出现脉管侵犯，患者周围神经侵犯的阳性率明显增加，可能影响预后水平。进一步分析提示周围神经侵犯与老年宫颈癌患者预后水平明显相关，其原因可能与周围神经侵犯促进肿瘤细胞转移和侵袭有关，但具体分子机制目前仍未完全明确。相关研究显示，肿瘤细胞周围神经侵犯与神经细胞黏附因子的表达水平密切相关，进而提出了肿瘤细胞具有神经趋向性的观点〔11〕。亦有研究发现，在胆管癌中，周围神经侵犯不仅与患者的解剖结构有关，肿瘤细胞对神经组织的识别能力也参与其中，而肿瘤细胞正是通过分泌神经细胞黏附分子来识别神经组织〔12〕。宫颈癌复发是患者生命质量下降和生存时间缩短的主要原因〔13〕。本研究结果提示周围神经侵犯对老年宫颈癌患者病情复发具有潜在的预测价值，在关注传统临床病理指标分化程度、浸润深度、淋巴结转移的同时也要重视周围神经侵犯对患者预后的影响。

综上，肿瘤细胞侵犯周围神经与老年宫颈癌患者临床病理特征和病情复发密切相关，且对患者生存时间具有一定预测价值。在今后的研究中应进一步深入探讨宫颈癌患者肿瘤细胞周围神经侵犯的分子机制，为临床治疗提供途径。