血清硫化氢水平与小儿热性惊厥转为癫痫的相关性分析

李秀清，王莉，武冬玲

热性惊厥是儿童常见惊厥之一，多发生于6个月至3岁，一般6岁后缓解，发病时主要表现为肌群强直性、阵挛性抽搐，伴意识障碍，持续时间较短。本病一般发生在上呼吸道感染或其他感染性疾病初期，而惊厥反复、持续的发作又可引起癫痫，因此对于热性惊厥转为癫痫的早期识别可帮助及时预防，对改善预后具有重要意义[1-2]。虽然癫痫发病机制尚不清楚，但近些年血清硫化氢(H2S)在癫痫发病过程的报道相继出现。为进一步探究其水平变化对热性惊厥及转为癫痫的影响意义，本研究对此展开深入探讨，旨在为小儿热性惊厥转为癫痫进行早期识别和预防提供参考。

1 对象与方法

1.1 对象 选取朝阳市中心医院于2019年5月至2020年8月收治的小儿热性惊厥患儿进行前瞻性研究。纳入标准：(1)小儿热性惊厥患儿均符合《小儿神经系统疾病》[3]中小儿热性惊厥诊断标准，经常规神经系统和体格检查确诊为热性惊厥患儿。癫痫患儿还符合国际抗癫痫联盟2017癫痫发作类型分类中小儿癫痫诊断标准[4]。(2)排除其他神经系统感染导致的热性惊厥；(3)首次发作，无既往发作史；(4)病历资料完整者；(5)患儿及家属知情且签署知情同意书。排除标准：(1)合并CNS感染疾病；(2)合并心、肝、肾、脑等严重疾病或功能不全者；(3)合并全身代谢性疾病者；(4)拒绝或不配合研究者。共纳入108例小儿热性惊厥患儿，根据随访1年内小儿热性惊厥患儿是否转为癫痫进行分组。将27例小儿热性惊厥转为癫痫患儿纳入癫痫组，其中男17例，女10例；年龄3个月至5岁，平均(26.34±5.27)个月。其余81例小儿热性惊厥患儿纳入热性惊厥组，其中男38例，女44例；年龄3个月～5岁，平均(25.74±5.32)个月。选取同期体检健康的86名健康儿童纳入健康对照组，其中男49人，女37人；年龄3个月至5岁，平均(27.13±5.83)个月。三组性别(χ2=3.086，P=0.214)、年龄(t=1.315，P=0.271)等差异无统计学意义，具有可比性。本研究已获我院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 血清H2S水平检测 分别检测各组血清H2S水平。空腹采取入组对象静脉血约3 ml，自然凝固10 min，放置于含有醋酸锌(10 g/L)的试管中震荡摇匀，然后加入0.5 ml苯二胺盐酸盐(20 mmol/L)，包含7.2 mol/L 盐酸和0.4 ml三氯化铁溶液(30 mmol/L)包含1.2 mol/L 盐酸，常温孵育20 min，显色后加入三氯醋酸(100 g/L)进行沉淀，然后以去离子水定容为2.5 ml，以3 000 r/min，离心10 min，取上清液，使用SpectraMax M5型号酶标仪，设定吸光度(A值)为670 nm，检测各组血清H2S水平，试剂盒购自美国Sigma有限公司，操作严格按试剂盒说明书进行。

1.2.2 临床资料采集 采集各组性别、年龄、初发惊厥时体温、惊厥发作持续时间、是否合并神经发育异常、是否合并围生期异常、是否合并颅脑影像异常、是否合并首次发热惊厥1周后EEG异常等临床资料并进行分析比较。

2 结 果

2.1 各组血清H2S水平的比较 癫痫组患儿血清H2S水平[(29.24±3.18)μmol/L]显著低于热性惊厥组[(31.12±4.35)μmol/L]和健康对照组[(45.32±6.27)μmol/L](均P<0.05)。

2.2 小儿热性惊厥患儿血清H2S水平与临床资料的关系 见表1。血清H2S水平变化与惊厥发作持续时间密切相关，惊厥发生前高热持续时间≥1 h患儿血清H2S水平显著低于惊厥发生前高热持续时间<1 h患儿，惊厥发作持续时间>15 min患儿血清H2S水平显著低于惊厥发作持续时间≤15 min患儿(均P<0.05)。

2.3 小儿热性惊厥转为癫痫的单因素分析 见表2。随访1年内108例小儿热性惊厥患儿中有27例小儿热性惊厥转为癫痫，转化率为25.00%(27/108)。癫痫组与热性惊厥组间年龄、初发惊厥时体温、惊厥发生前高热持续时间、惊厥发作持续时间、合并围生期异常、合并颅脑影像异常、首次发热惊厥1周后EEG异常及血清H2S水平的差异均有统计学意义(均P<0.05)。

2.4 小儿热性惊厥转为癫痫的多因素分析 见表3。根据小儿热性惊厥是否转为癫痫作为因变量，将单因素中有意义指标纳入多因素Logistic回归分析，结果显示，血清H2S水平不是小儿热性惊厥转为癫痫的独立影响因素(P<0.05)。

2.5 血清H2S水平与小儿热性惊厥转为癫痫的相关性分析 Pearson相关分析结果显示，血清H2S水平与小儿热性惊厥转为癫痫呈负相关(r=-0.637，P=0.012)。

表1 小儿热性惊厥患儿血清H2S水平与临床资料的关系临床资料例数血清H2S(μmol/L)t/χ2值P值年龄≥1岁7329.67±4.250.8390.403<1岁3530.34±4.56性别男6229.37±3.521.4380.153女4630.28±3.47初发惊厥时体温>38 ℃5928.26±3.151.5260.130≤38 ℃4929.14±3.22惊厥发生前高热持续时间<1 h7530.62±4.343.5230.001≥1 h3327.45±4.23惊厥发作持续时间>15 min4127.45±3.434.0760.000≤15 min6730.26±4.15合并神经发育异常是1231.23±3.251.8330.069否9632.51±4.38合并围生期异常是2332.46±4.350.9840.327否8535.23±4.29合并颅脑影像异常是1927.62±3.161.5130.133否8928.48±3.12首次发热惊厥1周后EEG异常是2626.37±3.151.4770.142否8227.21±3.13

表2 小儿热性惊厥转为癫痫的单因素分析因素例数癫痫组热性惊厥组t/χ2值P值年龄≥1岁7323505.0870.024<1岁35431性别男性6217450.4540.500女性461036初发惊厥时体温>38 ℃5910395.4920.019≤38 ℃49742惊厥发生前高热持续时间<1 h7022484.3850.036≥1 h38533惊厥发作持续时间>15 min41182312.5940.000≤15 min67958合并神经发育异常是122100.5000.480否962571合并围生期异常是2311128.1210.004否851669合并颅脑影像异常是198119.7510.001否891970首次发热惊厥1周后EEG异常是2612148.1730.004否821567血清H2S(μmol/L)26.37±3.2530.43±4.164.6180.000

表3 小儿热性惊厥转为癫痫的多因素Logistic回归分析因素βSEWold χ2P值OR值95%CI惊厥发生前高热持续时间≥1 h1.1470.5244.7910.0293.1491.127～8.794惊厥发作持续时间>15 min2.4851.2134.1970.04012.0011.114～129.345首次发热惊厥1周后EEG异常2.2461.0154.8970.0279.4501.293～69.089血清H2S水平≤29.24 μmol/L-1.0470.5234.0080.0450.3510.126～0.978

3 讨 论

小儿热性惊厥是神经系统常见的一种疾病，在惊厥性疾病中发病率约为5%左右，与智能低下、免疫功能降低、缺铁性贫血有关，反复发作可导致不同程度脑损伤，远期可导致癫痫发作[5]。血清H2S是一种气体信号分子，在CNS具有重要调节作用，正常浓度的H2S可保护神经元，促进脑神经功能[6-7]。因此，可根据患儿血清H2S水平评估脑损伤情况，进而为热性惊厥患儿转为癫痫提供防治手段，改善预后。相关研究[8-9]表明，热性惊厥患儿发生惊厥时，脑损伤细胞凋亡，神经元功能受损，血清H2S水平水平降低，其脑损伤程度和范围与癫痫发作密切相关。所以，了解热性惊厥患儿血清H2S水平，有助于评估患儿脑区神经损伤程度，进而为评估病情，预防癫痫发作提供可靠参考。

对各组研究对象进行血清H2S指标检测，结果显示癫痫组患儿血清H2S水平显著低于热性惊厥组和健康对照组。这可能是因为H2S具有保护神经元的作用，当惊厥发生造成脑部暂时性缺氧缺血导致脑损伤时，神经细胞相继凋亡，进而导致反映脑损伤情况的H2S生成减少，因此热性惊厥患儿血清H2S水平较低，这与惊厥可造成脑损伤的相关报道[10-11]一致。并且，通过对热性惊厥患儿血清H2S水平进行分析发现，当血清H2S水平低于30 μmol/L时，热性惊厥患儿远期癫痫发作的几率更大，提示血清H2S水平可作为热性惊厥患儿转为癫痫的重要指标，可为评估预后提供参考[12-13]。出现这一结果的原因可能与H2S的分子作用相关，通常情况下正常浓度H2S可调节GABA受体保持大脑神经元平衡状态，来调节机体脑区神经系统作用，但因脑损伤导致其水平表达降低，使神经元兴奋性被抑制，调节功能受损而对机体造成损伤，因此H2S水平变化对于脑损伤评估具有重要意义[14-15]。而本研究结果显示，惊厥发生前高热持续时间较长、惊厥持续时间较长患儿血清H2S水平更低，说明热性惊厥患儿转为癫痫与惊厥发作前高热时间以及惊厥持续时间相关，是影响癫痫发生的重要因素。惊厥发生时高热时间和惊厥时间过长会加剧脑区缺氧、缺血状态，从而导致脑损伤程度，进而增加癫痫发生风险。多因素回归分析结果表明，血清H2S水平不是小儿热性惊厥转为癫痫的独立影响因素。癫痫的发生与脑损伤有关，但造成脑损伤的因素较多，血清H2S水平对脑损伤评估具有一定评估意义，但无法作为癫痫发生的独立因素。但是由于研究样本有限，且对于血清H2S水平的相关影响因素尚未进行详细分析，因此结果具有一定局限性，还需进一步提高其识别小儿热性惊厥及转为癫痫的特异性[16-17]。

另外，采用Pearson相关分析结果显示，血清H2S水平表达与小儿热性惊厥及转为癫痫呈负相关(r=-0.637，P=0.012)，说明血清H2S水平越低，小儿热性惊厥及转为癫痫的可能性越大。究其原因，惊厥的持续发作导致呼吸循环系统异常，增加了脑代谢，使得脑细胞受损，造成脑损伤[18-19]。脑损伤初期脑区自由基产生，清除自由基的抗氧化毒性作用早期被消耗，促使血清H2S水平降低，从而削弱保护神经元的作用[20-21]。并且随着脑损伤程度的加重，血清H2S水平降低，神经元的保护功能下降，从而导致癫痫的发生，这与相关研究[22]中癫痫是由大脑功能障碍物导致的一种慢性疾病的报道一致。也有研究[23-24]表示，惊厥发作次数和持续时间对脑损伤同样具有重要意义，是影响惊厥转为癫痫的重要原因。虽然对于小儿热性惊厥转为癫痫的具体机制仍不清楚，但是可根据对于血清H2S水平与小儿热性惊厥及转为癫痫的关系，对热性惊厥患儿进行指导血清H2S调节治疗，改善预后，提高患儿生活质量，为临床小儿热性惊厥治疗和防治提供新的方向。

综上所述，血清H2S水平与小儿热性惊厥及转为癫痫成负相关，其水平越低，患儿癫痫的发生率越高。血清H2S水平可作为热性惊厥及转为癫痫的重要标志物之一，对指导神经调节治疗，评估预后具有重要参考价值。