PRRS减毒活疫苗抗体消长规律及仔猪最佳首免日龄探究

高 胜，李 洋，马志倩，李志伟，徐乐乐，焦 点，冯英桐，杜兴乾，肖书奇 (西北农林科技大学 动物医学院，陕西 杨凌 712100)

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome viius,PRRSV)引起的一种重要动物传染病，能引起全年龄段猪感染，对生猪养殖业造成巨大打击[1-4]。PRRS具有免疫抑制的特点，会对猪的免疫系统造成破坏，从而继发其他疾病而加重对感染猪的危害[5]。PRRSV属动脉炎病毒科，为单股正链RNA病毒，基因组全长约15 kb，可分为欧洲型PRRSV毒株(Ⅰ型)与北美型PRRSV(Ⅱ型)2个亚型。我国流行的主要是北美型PRRSV，但欧洲型PRRSV也偶呈散点状零星出现[6-7]。PRRSV是已知变异速度最快的RNA病毒之一，其基因组替换率可达(4.71～9.80)×10-2碱基/年[8]。PRRSV基因组变异速度快、不同型毒株间同源性较低、流行毒株种类多样。尽管采取了很多措施，但PRRS在我国养猪场中仍时有暴发，且经常出现具有新的基因组特性和致病性的PRRSV毒株[9-13]。

最新发布的《关于调整完善动物疫病防控支持政策的通知》强调将PRRS和猪瘟退出国家强制免疫，即不再由国家统一采购疫苗[14]。尽管如此，疫苗接种仍是我国大部分猪场防控PRRS的主要手段[15]。据报道，现阶段我国约有72%的养猪场通过接种疫苗防控PRRS，而有67%的猪场会免疫2～3次[16]。目前商品化PRRS疫苗主要有9种，其中2种为PRRSV灭活苗，7种为减毒活疫苗。一般而言，减毒活疫苗较灭活疫苗具备更好的免疫原性和保护效果，而运用较广的也主要是HP-PRRS减毒活疫苗及经典PRRS减毒活疫苗[17]。

养殖生产中，多在妊娠母猪分娩前注射1次 PRRS疫苗，以便仔猪在娩出后通过吮吸初乳获得母源抗体。母源抗体能对初生仔猪提供充足的保护作用，但随着仔猪日龄的增加，体内的母源抗体水平会逐渐下降至有效浓度之下[18-19]。因此，在母源抗体消失前对仔猪进行PRRS疫苗免疫，并使其达到有效保护水平是较为合理的免疫方案。本研究对妊娠母猪注射PRRS减毒活疫苗，对其分娩仔猪体内的母源抗体进行了测定分析，以探究母源抗体的消长规律；在此基础上，进一步对不同日龄的仔猪进行PRRS疫苗的首次免疫，并在免疫后多个时间点测定了其PRRSV抗体水平，以期探究仔猪接种PRRS疫苗的最佳首免日龄。

1 材料与方法

1.1 实验动物及疫苗本试验所用动物为山东省某规模化猪场的健康二元母猪及其所产仔猪。PRRS减毒活疫苗为勃林格殷格翰公司生产的PRRS减毒活疫苗(VR2332株)；PRRS抗体检测试剂盒购自爱德士(IDEXX)公司。

1.2 仔猪PRRS母源抗体消长规律随机选择5头健康妊娠母猪，在其分娩前35 d肌肉注射1头份PRRS减毒活疫苗，随机选择分娩仔猪30头，于0，4，7，10，16，21，28，35日龄时采集前腔静脉血分离血清，测定各组仔猪的PRRS抗体水平及阳性率。

1.3 仔猪PRRS减毒活疫苗接种的最佳首免日龄选择175头健康仔猪，随机分为A、B、C、D、E、F和G共7组，每组25头。分别于0(采食初乳前)，4，7，14，21，28，35日龄时对7组仔猪免疫PRRS减毒活疫苗，并于免疫后0，7，14，21，28，35 d时采集各组仔猪血清测定PRRS抗体水平及阳性率，比较不同首免日龄免疫后仔猪体内PRRS抗体水平。

1.4 判定标准血清中PRRS抗体水平的判定以IDEXX公司抗体试剂盒的说明书为准，当S/P≥0.4 时，血清中PRRS抗体为阳性；当S/P<0.4时，血清中PRRS抗体为阴性。

1.5 数据处理采用软件GraphPad Prism 5.0对试验数据进行处理及并绘制图表。

2 结果

2.1 免疫PRRS减毒活疫苗母猪所产仔猪的PRRS母源抗体消长规律测定30头仔猪在分娩后0，4，7，10，16，21，28，35 d时的PRRS抗体水平及阳性率，结果如图1和表1所示，仔猪在吸吮母乳后，体内PRRS抗体水平逐渐升高，出生后4 d均值即可达峰值(S/P=1.19)，且阳性率达100%；在7，10 d PRRS抗体均值仍稳定在峰值附近，且阳性率为96%；此后，猪群PRRS抗体均值及阳性率随时间延长逐渐降低，至出生28 d，PRRS抗体水平均值接近临界值(S/P=0.44)，阳性率仅为35%；出生35 d，仔猪体内PRRS抗体平均值转为阴性。

柱上方数字表示平均值。下同图1 仔猪体内PRRS抗体水平

表1 免疫仔猪PRRS抗体阳性率

2.2 仔猪接种PRRS减毒活疫苗的最佳首免日龄将175头仔猪随机分为7组，每组25头，分别于0，4，7，14，21，28，35 d接种1头份PRRS减毒活疫苗，并于免疫后0，7，14，21，28，35 d采集血液，测定血清中的PRRS抗体及阳性率，结果见图2～8、表2～8。

图2 0日龄免疫组仔猪体内PRRS抗体水平

图2和表2的结果表明：0日龄免疫组，即在分娩当日未吃母乳前对仔猪接种PRRS减毒活疫苗后，仔猪在免疫后7 d即可产生高水平PRRS抗体(S/P=0.84)，且阳性率达75%；PRRS抗体持续时间长，截止到免疫后35 d时其平均值仍处于较高水平(S/P=1.32)，阳性率达95%，且尚无衰减趋势。

表2 0日龄免疫组仔猪PRRS抗体阳性率

图3和表3的结果表明：4日龄仔猪免疫后，除免疫后7 d，PRRS抗体均值接近临界值外(S/P=0.39)，其余各测定时间点PRRS抗体均值均为阳性，且阳性率均>70%；此外，该组仔猪在免疫后21 d PRRS抗体水平及阳性率仍维持在较高水平，直至35 d。

图3 4日龄免疫组仔猪体内PRRS抗体水平

表3 4日龄免疫组仔猪PRRS抗体阳性率

图4和表4的结果表明：7日龄仔猪免疫后，PRRS抗体水平随时间推移逐渐增长。除免疫后7 d 外，其余各时间点PRRS抗体均呈阳性，且阳性率同样维持在较高水平。该组仔猪在免疫21 d后PRRS抗体水平迅速提升，直至免疫后35 d。

表4 7日龄免疫组仔猪PRRS抗体阳性率

图4 7日龄免疫组仔猪体内PRRS抗体水平

图5和表5的结果表明：14日龄仔猪免疫后，至少14 d内未产生有效PRRS抗体，免疫后21 d，仔猪产生了高水平的PRRS抗体(S/P=1.58)，且阳性率达到了71%；免疫后35 d，PRRS抗体仍处于较高水平(S/P=1.78)，且阳性率为86%。

图5 14日龄免疫组仔猪体内PRRS抗体水平

表5 14日龄免疫组仔猪PRRS抗体阳性率

图6和表6的结果表明：21日龄仔猪免疫后7 d 内并未产生PRRS抗体；血清转化出现在免疫后14 d，但此时阳性率较低，仅为17%；免疫后21 d，PRRS抗体均值进一步升高，且阳性率达到96%；此后，PRRS抗体水平及阳性率均随时间延长逐渐升高，直至免疫后35 d(S/P=1.89)。

图6 21日龄免疫组仔猪体内PRRS抗体水平

表6 21日龄免疫组仔猪PRRS抗体阳性率

图7和表7的结果表明：28日龄仔猪免疫后至少7 d内未产生PRRS抗体；血清转化出现在免疫后14 d，PRRS抗体阳性率达83%；此后PRRS抗体及阳性率随时间延长逐渐升高，持续至免疫后35 d(S/P=2.11，100%)。

图7 28日龄免疫组仔猪体内PRRS抗体水平

表7 28日龄免疫组仔猪PRRS抗体阳性率

图8和表8的结果表明：35日龄仔猪免疫后7 d 内未产生PRRS抗体，血清转化出现在免疫后14 d，但PRRS抗体阳性率仅为40%；此后PRRS抗体及阳性率随时间延长逐渐升高，持续至免疫后35 d(S/P=2.35，100%)。

图8 35日龄免疫组仔猪体内PRRS抗体水平

表8 35日龄免疫组仔猪PRRS抗体阳性率

3 讨论

本研究探讨了免疫PRRS减毒活疫苗的妊娠母猪所产仔猪PRRS抗体在仔猪体内的消长情况。周绪斌等[20]研究发现，PRRS疫苗免疫后14 d开始出现血清转阳。陆桂丽等[21]研究结果表明，PRRS母源抗体随时间推移而呈递减趋势，28～35日龄时抗体水平靠近临界值，并建议首免日龄为28日龄。本研究中，仔猪吮吸母乳后会逐渐产生高水平的PRRS抗体，在4日龄时即可达峰值，截止到21日龄时PRRS抗体仍处于较高水平，且阳性率始终>70%；而28日龄时，虽然PRRS抗体均值仍为阳性，但阳性率仅为35%，表明仔猪PRRS疫苗的首次免疫应放在28日龄之前。

对不同日龄的仔猪进行PRRS减毒活疫苗的首次免疫，以期确定最合适的首免日龄。发现0日龄仔猪(采食初乳前)自免疫后7～35 d内，PRRS抗体均值均处于阳性范围内，且具有较高的阳性率，单纯考虑抗体水平而言，这一时间段是较为合理的免疫时间。4日龄免疫组在测定周期内也基本具备较高水平的PRRS抗体均值，且阳性率除免疫后7 d 外，均大于70%，也是较为合理的首免日龄。7日龄仔猪免疫后，PRRSV抗体水平随时间推移逐渐增长，除免疫后7 d外，其余各时间点PRRSV抗体均呈阳性，且阳性率同样维持在较高水平，也可以作为合理的首免日龄。此后，14,21,28,35日龄首免组，均有一段较长的空窗期，难以提供有效的保护，不作为推荐的免疫时间。

综上，结合母源抗体消长情况，在仔猪分娩当天(采食初乳前)或分娩后4～7 d时进行PRRS减毒活疫苗(VR2332)的首次免疫可能是较为合理的免疫方案。