严重药物不良反应分子标志物HLA-B*58：01、HLA-B*15：02和HLA-A*31：01在山东汉族人群中的分布

邵静茹，潘英英，邬彩红，朱传福，聂向民，刘艳

(1.山东省血液中心HLA研究室，山东济南 250014；2.临沂市中心医院急诊科，山东临沂 276401)

严重药物不良反应(serve adverse drug reactions，SADRs)具有迟发性、非剂量依赖性和不可预测性的特点，且与个体遗传背景相关[1]。近年来，随着药物基因组学的迅速发展，多项研究表明，人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因与SADRs的发生存在很强的关联性。Yu等[2]对HLA-B*58:01等位基因携带者在服用别嘌醇治疗相关疾病时产生SADRs的文献进行荟萃(Meta)分析，证实筛查HLA-B*5801等位基因有助于患者预防别嘌呤醇诱导的SADRs的发生。Sargent等[3]报道了在开具卡马西平处方前，进行HLA-B*15:02等位基因的筛查具有重要意义。McCormack等[4]报道了HLA-A*31:01等位基因携带者在服用了卡马西平后产生了SADRs。HLA-B*15:02、HLA-B*58:01和HLA-A*31:01与SADRs相关性的研究成果在中国人群也陆续有报道[5-6]。本研究根据已有对中国人群的研究报道[5-6]，并结合HLADR数据库(http://pgx.fudan.edu.cn/hladr/?action=list)中的数据进行分析。此外，为有效指导临床用药，明确临床用药前进行基因筛查的必要性，本研究调查了HLA-B*15:02，HLA-B*58:01和HLA-A*31:01 3种等位基因在山东汉族人群中的分布，并对结果进行统计分析，报道如下。

1 材料和方法

1.1资料检索与数据提取 收集2007年1月至2019年12月山东省骨髓库入库，具有HLA-B位点高分辨数据的汉族样本23 213例，其中男 13 928例，女9 285例，具有HLA-A位点高分辨数据的汉族样本24 121例，其中男14 472例，女9 649例。志愿者入库年龄为18～45岁，符合志愿者捐献健康征询要求，山东籍汉族且无亲缘关系。志愿者均已签署《中国造血干细胞捐献者资料库志愿捐献者同意书》。采集各研究对象的静脉血5 mL于EDTA抗凝管中，置于-20 ℃保存。HLA-A、HLA-B基因分型采用PCR-序列特异的寡核苷酸探针杂交(sequence specific oligo-nucleotide probe，SSOP)法，使用FLEXMAP-3D多功能流式点阵仪进行高分辨等位基因分型，结果由HLA Fusion软件(美国One Lambda公司)根据阳性反应探针自动判读结果。HLA-A、HLA-B等位基因数据以*后4位为准。按照中华骨髓库志愿者信息录入的籍贯对研究对象进行分组，得到济南、菏泽、淄博、德州、潍坊、济宁、泰安、临沂、东营、滨州、枣庄、日照、莱芜、聊城等14个地市。

1.2统计学分析 采用Micosoft Excel 2010软件进行统计学分析，HLA-B*58:01、HLA-B*15:02、HLA-A*31:01等位基因携带率=携带标本数/标本总数×100%；HLA-B*58:01、HLA-B*15:02、HLA-A*31:01等位基因频率=等位基因数/(2×标本总数)×100%，分析方法为一般频数分布。

2 结果

2.1山东各地市人群HLA-B*58:01、HLA-B*15:02、HLA-A*31:01等位携带率及等位基因频率 山东省内纳入研究的汉族人群中，具有HLA-B位点高分辨的数据的样本为23 213例。携带HLA-B*58:01、HLA-B*15:02等位基因的样本数分别为2 009例和703例，其等位基因携带率分别为8.65%、3.03%；等位基因频率分别为4.33%和1.53%。HLA-B*58:01、HLA-B*15:02等位基因携带率最高的2个城市分别为日照(12.7%)和聊城(3.96%)，等位携带率最低的2个城市分别为德州(6.76%)和滨州(2.12%)。见表1。

具有HLA-A位点高分辨数据的样本数为24 121例，携带HLA-A*31:01等位基因的样本数为1 760例，其等位基因携带率为7.3%；等位基因频率为3.65%。HLA-A*31:01等位基因携带率最高的城市为枣庄(9.94%)，等位携带率最低的城市为临沂(6.25%)。见表2。

表2 HLA-A*31:01的等位基因携带率和等位基因频率

3 讨论

近年来，高尿酸血症和精神类疾病的患病率逐年升高，已成为威胁人民健康的重大慢性非感染性疾病。别嘌醇和卡马西平是治疗高尿酸血症、痛风以及精神类疾病的一线药物，对于大部分患者均有较好的疗效，但对一些特定HLA基因型患者却能诱发药物不良反应。HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01引发严重药物不良的研究在国内外均有报道，美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration，FDA)已建议对亚洲人出具卡马西平处方前进行HLA-B*15:02等位基因鉴定[7]；中国台湾[8]、日本[4]、韩国[9]均已开展了在使用卡马西平和别嘌醇前进行HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01的基因筛查。马骄等[10]通过对中国大陆人群HLA-B*58:01等位基因频率的调查，提出应重视对我国华南地区人群患者进行HLA-B*58:01的筛查。

纳入本研究的山东汉族人群中，日照、东营和临沂地区HLA-B*58:01的等位基因携带率分别为12.7%、10.13%和10.33%。刘晓华等[11]报道山东半岛地区(潍坊、日照、青岛、威海和烟台)人群HLA-B*58:01的携带率约为10.2%，接近华南地区的携带率(10.69%)。除德州(6.8%)之外，其余地区携带率均大于8%，接近全省8.65%的携带率。Allele*Frequencies数据库(http://www.allelefrequencies.net/hla.asp)分析显示，HLA-B*58:01在中国台湾和韩国人群中的携带率分别约为20%和13%。由此看出，为了避免严重药物不良反应发生，在山东省内对患者在使用别嘌醇之前，进行HLA-B*58:01基因筛查是有必要的。HLA-B*15:02等位基因携带率最高的3个地区分别为聊城(3.96%)、济南(3.84%)和淄博(3.77%)，高于全省3.03%的携带率，但明显低于全国7%的携带率。Allele*Frequencies网站检索亚洲人群HLA-B*15:02基因携带率的数据发现，新加坡华人(约11%)、中国香港(约20%)、泰国(约16%)、越南(约26%)、马来西亚(约12%)人群的携带率较高。与之相比，山东汉族人群的HLA-B*15:02等位基因携带率相对于其他亚洲人群以及中国南方地区人群较低，但为减少严重药物不良反应的发生，有条件的地区可以尝试性开展用药前基因筛查，为以后精准用药提供更为准确的数据。HLA-A*31:01等位基因携带率最高的3个地区为枣庄(9.94%)、滨州(8.15%)和济南(7.98%)，高于全省7.3%和全国6.4%的携带率。Allele*Frequencies网站检索HLA-A*31:01等位基因携带率的数据发现，日本人群HLA-A*31:01等位基因携带率约为16%，其中北海道地区的携带率高达约24%。已有研究表明，HLA-A*31:01基因筛查具有成本效益，并倾向于在使用卡马西平治疗之前对所有患者进行HLA-A*31:01的基因筛查[12]。因此，本研究认为在山东省内有必要在用药前开展针对HLA-A*31:01的等位基因筛查，以减少严重药物不良反应的发生。

本研究调查了山东14个地市汉族人群HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01等位基因携带率和等位基因频率的分布，揭示了3种等位基因的分布特点，为山东全省及各个地市开展用药前进行基因筛查提供了数据支持，具有一定的临床意义。但因数据库检索权限的限制，本研究并未包括山东省全部地区的数据，如果能够扩大样本数量且覆盖山东省全部地市，将为临床精准用药提供更为科学准确的数据支持。