鼻咽癌病理组织中CXCR4表达与患者临床病理特征、新辅助化疗疗效及预后的关系

余花艳 仓顺东 史中州

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)为临床常见的头颈部恶性肿瘤，多发于中国南方及东南亚各国[1-2]。NPC癌组织对射线较为敏感，目前放射治疗仍为首选治疗方案，新辅助化疗具有减少癌组织体积，缩小放疗的靶区的作用，近年来在NPC治疗中应用广泛。然而病理特征相同，治疗方法相同的NPC患者，临床治疗效果及预后生存状况也存在较大差异[3]。越来越多临床研究表明癌组织中存在多种趋化因子及其受体，与癌症的发生、发展、转移及临床治疗效果联系紧密[4-5]，其中趋化因子受体4(chemokine receptor 4，CXCR4)在多种癌组织中存在过表达，为目前研究热点。但现有研究多关于NPC患者病理组织中CXCR4表达水平的探究[6]，而NPC患者病理组织中CXCR4表达水平与新辅助化疗疗效及患者预后的关系的研究尚未见报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究通过我院医学伦理委员会批准同意后，以我院2017年5月以来收治的97例NPC患者为研究对象，以其活检病理癌组织标本作为观察组(n=97)，癌旁组织标本作为对照组(n=60)。男性62例，女性35例；年龄37～75岁，平均年龄(51.21±10.42)岁；TNM分期属于Ⅰ期和Ⅱ期的39例，Ⅲ期和Ⅳ期的58例；淋巴结转移42例，未转移55例；鳞状细胞癌73例，其他癌24例；化疗效果为部分缓解(partial response，PR)73例(肿瘤病灶缩小30%以上，且维持4周以上)；疾病稳定(stable disease，SD)18例(肿瘤体积缩小不超过30%，或增大不超过20%，且维持4周以上)；疾病进展(progressive disease，PD)6例(肿瘤病灶体积增大超过25%)。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准 ①经活检确诊为NPC[7]；②具有完整临床资料及随访资料；③无精神或意识障碍的患者；患者知情同意并签署知情同意书；④首次确诊为NPC并进行治疗。

1.2.2 排除标准 ①合并严重心、脑、肝、肾等器官疾病患者；②预计生存期≤3个月，无法完成治疗的患者；③化疗禁忌证的患者；④长期使用免疫抑制剂者；⑤凝血功能异常者。

1.3 治疗方法

入院后，对患者及家属进行健康宣讲，忌烟、忌酒等[8]，完善相关检查检验后，均予以新辅助化疗2周期。新辅助化疗方案：每周期第1天使用多西他赛注射液60 mg·m-2，每周期第1天使用顺铂60 mg·m-2，每周期第1～14天使用替吉奥片60 mg·m-2。2组新辅助化疗结束后均予以同步放化疗。同步放疗采用调强放疗[9]，原发灶区处方剂量为72 Gy/32 f；累淋巴结区处方剂量为70.4 Gy/32 f；高危临床靶区的处方剂量为64 Gy/32 f；低危临床靶区的处方剂量为57.6 Gy/32 f；颈部预防照射区的处方剂量为50.4 Gy/28 f。同步化疗为单药顺铂70 mg/m2，治疗持续2～3个周期。

1.4 观察指标

1.4.1 CXCR4表达情况 采用SP3步法免疫组化染色(鼠抗人CXCR4单克隆抗体及免疫试剂盒购自北京中山公司)对癌组织及癌旁组织CXCR4表达情况进行检测。随机抽取10个高倍镜视野进行观察，综合细胞染色数目及强度判断CXCR4表达情况，CXCR4主要在胞膜和细胞质中表达。细胞染色强度计分分为4级：0分(无色)、1分(淡黄色)、2分(棕黄色)以及3分(棕褐色)。阳性细胞数百分率计分分为5级：0分(阳性细胞<5%)、1分(阳性细胞数5%～25%)、2分(阳性细胞数25%～50%)、3分(阳性细胞数50%～75%)，4分(阳性细胞数>75%)。两项评分之积为0分则为阴性，反之则为阳性[10]。

1.4.2 临床特征 通过问卷调查收集2组患者性别、年龄、TNM分期、淋巴结转移、病理分型以及化疗效果的临床特征资料。

1.4.3 生存时间 从患者治疗结束后开始对患者进行为期3年的随访，统计患者3年生存以及3年无进展生存情况。

1.5 统计学方法

使用SPSS17.0统计软件进行分析。本组数据均为计数资料，以例数(百分率)[n(%)]表示，使用χ2检验进行比较，P<0.05，表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2组病理组织中CXCR4表达情况比较

CXCR4在观察组中阳性表达率为46.39%(45/97)，在对照组中阳性表达率为15.00%(9/60)，2组比较差异有统计学意义(χ2=16.189，P<0.001)。

2.2 鼻咽癌患者病理组织中CXCR4表达与临床特征和化疗疗效的关系

鼻咽癌患者病理组织中CXCR4表达阳性与否在性别构成、年龄构成以及病理分型方面差异不显著(P>0.05)，而TNM分期Ⅲ期、Ⅳ期与淋巴结转移和化疗效果SD、PD的CXCR4阳性表达率显著高于阴性表达率，差异有统计学意义，P<0.05，见表1。

表1 鼻咽癌患者病理组织中CXCR4表达与临床特征和化疗疗效的关系(例，%)

2.3 鼻咽癌患者病理组织中CXCR4表达与预后的关系

病理组织中CXCR4表达阳性的鼻咽癌患者化疗后3年生存率为57.78%、3年无进展生存率为40.00%；CXCR4表达阴性的鼻咽癌患者3年生存率为96.15%、3年无进展生存率为71.15%，两者差异有统计学意义，见表2。

表2 鼻咽癌患者病理组织中CXCR4表达与预后的关系(例，%)

3 讨论

NPC发病的高峰期为40～60岁的中年群体，以非角化型低分化鳞癌最为常见，其发病为多因素、多阶段的过程，埃-巴二氏病毒感染、遗传和环境因素等被认为是NPC发生的重要因素[11-12]。由于NPC解剖位置特殊，鼻咽黏膜固有层淋巴管网分布极为丰富，极易发生淋巴结转移，研究显示放疗5年生存率不足5%，导致患者预后不良的主要由因素为NPC转移[13]。肿瘤细胞以及肿瘤间质细胞通过表达和分泌趋化因子及其受体，可促进肿瘤细胞有丝分裂，抑制其凋亡，还可引起肿瘤细胞内肌动蛋白的聚合并形成伪足，进而可提高肿瘤细胞的运动能力。但目前关于NPC病理组织中CXCR4表达与患者临床病理特征、新辅助化疗疗效及预后的关系仍需进一步探究。

CXCR4属于高度保守的蛋白偶联的7次跨膜受体，是基质细胞衍生因子1(Stromal cell derived factor-1，SDF-1)的趋化因子受体。SDF-1/CXCR4轴介导的信号传递与细胞移动，不仅参与机体胚胎发生、免疫反应和炎症等生理过程，还参与淋巴细胞归巢、肿瘤组织的血管生成及细胞转移等多种病理过程[14]。文献报道在乳腺癌、甲状腺癌以及非小细胞肺癌等上皮、间叶、造血来源的肿瘤细胞中均有异常表达[15]。本研究结果显示CXCR4在观察组中阳性表达率为46.39%，显著高于在对照组中阳性表达率15.00%，癌组织中CXCR4表达水平显著高于癌旁组织，提示CXCR4在癌组织发生及发展过程中可能发挥重要作用。CXCR4一方面可通过自分泌或旁分泌的形式刺激肿瘤细胞增殖；另一方面与SDF-1受体结合后可引起靶细胞重构、并产生定向迁移，控制其转移。鲁保才等研究显示靶向沉默人鼻咽癌细胞系中CXCR4基因表达，可降低细胞增殖及转移能力，推测与CXCR4对Wnt/β-catenin 信号通路的介导作用有关[16]。

吴唯等研究显示CXCR4在有淋巴结转移及分期高的乳腺癌组织中高表达[17]。本研究结果显示，不同性别构成、年龄构成以及病理分型NPC患者癌组织中CXCR4阳性表达率与阴性表达率差异无统计学意义，而TNM分期为Ⅲ期及Ⅳ期、淋巴结转移、化疗效果为SD以及PD的NPC患者癌组织中的CXCR4阳性表达率显著高于阴性表达率，提示CXCR4表达水平与NPC恶性程度及近期治疗效果密切相关。TNM分期为Ⅲ期及Ⅳ期的患者及发生淋巴结转移的CXCR4表达阳性率偏高，分析其原因可能为，CXCR4可介导肿瘤细胞特异性转移至SDF-1高表达的组织，促进癌细胞转移至淋巴结、肺部等，导致NPC临床分期升高[18]。此外分期靠后、发生淋巴结转移的患者往往肿瘤的恶性程度较高，有文献指出肿瘤细胞中CXCR4表达具有缺氧诱导因子依赖性，肿瘤恶性程度高、缺氧诱导因子水平高也可能导致CXCR4高表达[19]。

NPC的临床治疗以减少肿瘤的转移与局部复发，提高生存率及生存质量为主要治疗目的。本研究中患者均采用新辅助化疗后同步放化疗进行治疗，但患者预后水平存在较大差异。对癌组织中CXCR4表达水平不同的患者预后情况进行分析，发现癌组织中CXCR4表达阳性的NPC患者治疗后3年生存率、3年无进展生存率显著低于CXCR4表达阴性的NPC患者(57.78% vs.96.15%，40.00% vs.71.15%)。CXCR4可促进肿瘤细胞增殖，提高肿瘤细胞活性，不仅降低治疗效果，还增加放化疗治疗后淋巴结转移风险，影响患者预后。此外宋现运等研究认为NPC顺铂耐药细胞系中CXCR4水平上升，降低了CXCR4基因表达后，NPC顺铂耐药细胞系的耐药性降低，CXCR4可能通过调控B淋巴细胞瘤-2基因及let-7a基因表达提高NPC癌细胞耐药能力，从而降低化疗治疗效果[20]。

综上所述，NPC患者癌组织中CXCR4表达水平高于癌旁组织，且与患者临床病理特征、化疗效果及生存时间密切相关，可能可以作为临床治疗及预后判断的新靶点。