探讨乙型肝炎性原发性肝癌患者乙肝病毒DNA载量与免疫功能的相关性分析

侯娟，叶峰山，邱素娟，宋育明

厦门大学附属第一医院检验科，福建厦门 361000

原发性肝癌为临床常见恶性肿瘤之一，对中老年人生命安全构成了严重威胁[1]。该疾病具有较高恶性程度，发病早期便可血行转移、淋巴结转移与肝内转移。该疾病出现的主要原因为各种原因造成的肝硬化，随着病情发展，最终成为原发性肝癌[2-3]。我国具有较高乙型肝炎发病率，因其发病较为隐秘，导致对其重视度不高，最终极易发展成为原发性肝癌[4]。原发性肝癌发病过程中免疫具有重要作用，肿瘤细胞诱导免疫抑制，上调treg，产生肿瘤的免疫逃逸，造成预后不良。近年来已有研究显示，原发性肝癌患者预后中，乙肝病毒DNA载量具有重要影响，例如会延迟术后康复[7]。除此之外，乙肝病毒DNA载量还可能将乙型肝炎患者的细胞功能紊乱程度加重。由此可推测，乙肝病毒DNA载量可能通过对乙型肝炎性原发性肝癌患者免疫功能低下进行诱导，进而对肿瘤细胞转移、生长进行促进，最终出现不良预后[8]。鉴于此，该研究主要针对免疫功能、乙肝病毒DNA载量之间的相关性进行分析，将2015年7月—2018年9月在该院接受治疗的160例乙型肝炎性原发性肝癌患者视为研究对象，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取在该院接受治疗的160例乙型肝炎性原发性肝癌患者视为研究对象，归为甲组，纳入标准：①患者知情同意，并经医学伦理委员会批准；②经病理确诊为原发性肝癌。排除标准：①合并肝胆系统其他重大病变者；②合并免疫功能不全者；③入组前行分子生物、手术以及化疗等特殊治疗者；④入组3个月内采用免疫调节剂进行治疗者；⑤存在严重全身感染或局部感染者；⑥合并严重肺脑心肾等重要脏器功能损伤者；⑦肝癌术后复发者；⑧合并其他恶性肿瘤者。患者年龄35～69岁，平均（53.19±2.08）岁；男108例，女52例；合并高血压、高血脂、糖尿病的患者分别有8例、16例、4例。再选取同时期该院160名健康体检者为研究对象，归为乙组，年龄36～70岁，平均（53.06±2.02）岁；男96名，女64名；合并高血压、高血脂、糖尿病的患者分别有10例、20例、6例。两组资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采用流式细胞仪对两组研究对象T细胞亚群进行测定，测定指标包括CD8+细胞、CD4+细胞、CD4+/CD8+；两组研究对象乙肝病毒DNA载量均采用荧光定量PCR法测定；与此同时，测定两组研究对象相关肿瘤直径与TNM分期。

1.3 观察指标

对比两组研究对象CD8+细胞、CD4+细胞、CD4+/CD8+测定值差异，分析乙肝病毒DNA载量与CD8+细胞、CD4+细胞、CD4+/CD8+之间的相关性；同时对比不同肿瘤TNM分期患者的乙肝病毒DNA载量。

1.4 统计方法

采用SPSS 20.0统计学软件对数据进行分析，计量资料用（±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组免疫功能指标比较

与乙组比较，甲组CD8+细胞含量更高，CD4+细胞含量、CD4+/CD8+更低，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组免疫功能指标比较(±s)

表1 两组免疫功能指标比较(±s)

组别CD4+细胞（%）CD8+细胞（%） CD4+/CD8+甲组（n=160）乙组（n=160）t值P值28.15±6.15 42.96±4.19 25.174＜0.001 31.09±7.11 25.48±9.59 5.944＜0.001 0.91±0.86 1.69±0.44 10.213＜0.001

2.2 乙肝病毒DNA载量与免疫功能相关性分析

患者乙肝病毒DNA载量平均测定值为（5.84±1.42）×103IU/mL，与CD8+细胞呈正相关性，与CD4+细胞、CD4+/CD8+呈负相关性（P＜0.05），见表2。

表2 乙肝病毒DNA载量与免疫功能相关性分析

2.3 甲组不同TNM分期患者乙肝病毒DNA载量分析

甲组160例患者中，TNM分期为Ⅱ期、Ⅲ期的患者分别有76例、84例，Ⅲ期患者乙肝病毒DNA载量明显高于Ⅱ期患者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 甲组不同TNM分期患者乙肝病毒DNA载量分析[(±s)，×103 IU/mL]

表3 甲组不同TNM分期患者乙肝病毒DNA载量分析[(±s)，×103 IU/mL]

肿瘤TNM分期乙肝病毒DNA载量Ⅱ期（n=76）Ⅲ期（n=84）t值P值5.42±0.28 6.19±0.68 9.190＜0.001

3 讨论

原发性肝癌对患者生命安全构成了严重威胁，通常是在感染乙肝病毒后，引发肝炎，长期慢性肝炎引发肝硬化，最终进展为肝癌[9-10]。近年来的临床研究显示，乙肝病毒DNA载量会明显影响原发性肝癌患者的术后康复效果，同时还和疾病进展、TNM分期存在相关性[11-12]。鉴于此，为了对乙型肝炎性原发性肝癌病情进展过程中乙肝病毒DNA载量影响的作用机制进行探究，该研究Pearson相关性分析显示，乙肝病毒DNA载量，与CD8+细胞呈正相关性，与CD4+细胞、CD4+/CD8+呈负相关性（P＜0.05）；随着肿瘤TNM分期提高，乙肝病毒DNA载量也明显提高（P＜0.05），提示乙型肝炎性原发性肝癌患者乙肝病毒DNA载量与免疫功能、肿瘤TNM分期之间存在一定相关性。乙型肝炎病原体为乙型肝炎病毒，此病毒归为嗜肝DNA病毒科，包括两个属，即禽嗜肝DNA病毒属与正嗜肝DNA病毒属，其中正嗜肝DNA病毒属是导致人体感染乙型肝炎病毒的重要原因[13-14]。现阶段，乙型肝炎已经发展成为一个世界性公共卫生问题，虽然乙肝疫苗能在一定程度上控制病情，但该疾病的发病率依旧居高不下，乙型肝炎是引发原发性肝癌的重要原因。通常情况下，乙型肝炎病毒不会直接损伤肝细胞，主要经肝表面乙型肝炎病毒进行免疫应答，进而使得肝脏长时期处于慢性炎症状态。临床用来判断乙肝病毒活跃性与复制性的金标准为乙肝病毒DNA载量，现阶段，临床主要将其用来对乙肝病毒传染程度与数量进行判断。CD4+T细胞属于辅助性T细胞，主要分泌细胞因子，进而对机体抗肿瘤反应进行调节，CD8+T细胞则属于抑制性T细胞，同样为机体内部细胞毒性效应T细胞。一般而言，机体通过对外周血中CD4+/CD8+比值相对平衡进行调节来维持机体的正常免疫功能。该研究中，甲组CD8+细胞含量为（31.09±7.11）%，高于乙组，CD4+细胞含量、CD4+/CD8+分别为（28.15±6.15）%、（0.91±0.86），低于甲组（P＜0.05），提示乙型肝炎性原发性肝癌患者机体免疫功能低下，细胞免疫处于失衡状态。相关学者的研究也显示，HCC组CD8+细胞含量为（25.45±4.17）%，高于对照组，CD4+细胞含量、CD4+/CD8+分别为（28.05±6.21）%、（0.97±0.35），低于对照组（P＜0.05），这与该研究结果具有高度一致性[14]。究其原因，这可能是因为乙型肝炎性原发性肝癌发生发展过程中，有大量免疫抑制因子产生。一方面，免疫抑制因子可通过干扰效应T淋巴细胞进而发挥作用，降低外周血中CD4+细胞含量，提高CD8+细胞含量，进而损伤T淋巴细胞免疫功能。另一方面，免疫抑制因子可将T淋巴细胞活性广泛性杀伤，再加上受到肿瘤抗原刺激，会激活T淋巴细胞免疫抑制细胞前体，使得免疫抑制因子大量分泌，并形成一种恶性循环，进而对细胞免疫功能进行抑制。乙肝病毒DNA载量，与CD8+细胞呈正相关性，与CD4+细胞、CD4+/CD8+呈负相关性，提示乙肝病毒数量越多，CD8+细胞含量越高，CD4+细胞含量、CD4+/CD8+越低。因此，乙肝病毒DNA载量与免疫功能低下之间存在一定相关性。

综上所述，乙型肝炎性原发性肝癌患者乙肝病毒DNA载量与免疫功能、肿瘤TNM分期之间存在一定相关性。