对抑郁症患者外周血中miRNA-26a/b的表达水平进行检测的临床意义

赵 轶，米秋蓉，王斌红，任智勇，孔临萍，赵红伟，刘五华，朱亚宏

（1.太原市精神病医院临床心理科，山西 太原 030001；2.山西省儿童医院麻醉科，山西 太原 030001；3.太原市精神病医院精神分裂症女科，山西 太原 030001）

抑郁症是一种以显著、持久的心境低落为主要特征的精神疾病，具有发病率高、复发率高、治愈困难及危害大等特点。世界卫生组织统计，抑郁症在全球范围内的发病率约为4.4%，全世界约有3.22亿人遭受抑郁症的困扰[1]。现阶段，临床上尚未彻底阐明抑郁症的确切病因，一般认为此病的发生可能与生物因素、心理因素、社会环境因素等有关。目前临床上已发现多种因子（如生长因子、细胞因子、内分泌因子）与抑郁症的发生发展存在相关性，但用此类因子诊断抑郁症的敏感性和特异性有限[2]。因此，临床上迫切需要找到一种敏感性和特异性高的生物标志物来诊断抑郁症。miRNA作为广泛分布于人体各组织器官中的一类单链非编码RNA，在转录后可通过反向调控基因的表达来参与生物多种生命活动的调节过程[3]。有研究指出，miRNA的差异性表达与包括抑郁症在内的多种疾病的发生密切相关。本文主要是探讨对抑郁症患者外周血中miRNA-26a/b的表达水平进行检测的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2019年1月至2020年5月期间我院收治的77例抑郁症患者与同期在我院进行体检的80例健康人作为研究对象。将其中77例抑郁症患者设为病例组，将其中80例健康人设为对照组。病例组患者的纳入标准是：病情符合《精神疾病诊断与统计手册》第5版（the diagnostic and statistical manual of mental disorders，DSM-5）中关于抑郁症的诊断标准[4]；入院时汉密顿抑郁量表（Hamilton depression Scale，HAMD）17项的评分≥17分；既往未使用过任何抗抑郁药物或抗精神病药物；其本人（或其家属）签署了自愿参与本研究的知情同意书。其排除标准是：合并有其他精神疾病、神经系统疾病、严重的躯体疾病或有颅脑外伤史；对酒精、其他物质依赖或滥用；有双相情感障碍、精神分裂症等精神疾病家族史；处于妊娠期或哺乳期女性。对照组健康人的纳入标准是：身体健康，无重大疾病；性别、年龄等与病例组患者匹配；自愿参与本研究。其排除标准是：有抑郁发作史；患有精神疾病或严重的躯体疾病；有双相情感障碍、精神分裂症等精神疾病家族史；处于妊娠期或哺乳期女性。在病例组中，有男性40例，女性37例；其年龄为21～48岁，平均年龄为（32.12±5.68）岁；其病程为3～10年，平均病程为（6.51±2.34）年。在对照组中，有男性47例，女性33例；其年龄为21～40岁，平均年龄为（28.26±5.34）岁。两组研究对象的年龄、性别相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究已通过我院医学伦理委员会的批准。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 采集两组研究对象清晨（8:00～9:30之间）空腹状态下的静脉血，对血液标本进行离心处理，分离出血清，提取血清中的外周血细胞作为标本，并将分离提取的标本置于-80℃的冰柜中保存待检。采用国产的Thmorgan G2000 PCR仪及实时荧光定量法（Quantitative Real-time PCR）检测外周血细胞中miRNA-26a/b的表达水平，提取DNA的试剂盒由美国Sigma公司生产，SYBR定时定量试剂由德国Gene公司生产。将β-actin作为内参，以特异性结核分枝杆菌插入序列IS6110作为目的基因，β-actin的正向引物为5′-AGTTGCGTTACCCTTTCTTH-3′，反向引物为5′-TCACCTTCACCGTTCCAGTTT-3′，结核分枝杆菌的正向引物为5′-TTGGAAAGGATGGGGTCA-3′，反向引物为5′-CGCAGCCAACACCAAGTAG-3′。以上所有引物均由日本TaKaRa公司设计合成。

1.2.2 治疗及疗效判定方法 规范性使用选择性5-羟色胺再摄取抑制剂（selective serotonin reuptake inhibitors，SSRI）对病例组患者进行抗抑郁治疗。治疗前后，根据患者的HAMD-17评分用有效、缓解和无效评估其疗效。有效：治疗后患者的HAMD-17评分较治疗前降低＞50%。缓解：治疗后患者的HAMD-17评分较治疗前降低25%～50%。无效：治疗后患者的HAMD-17评分较治疗前降低＜25%。

1.3 观察指标

比较两组研究对象外周血中miRNA-26a/b的表达水平。比较治疗前后病例组患者中疗效不同的患者外周血中miRNA-26a/b的表达水平。

1.4 统计学方法

用SPSS 19.0软件处理本研究中的数据，计数资料用%表示，用χ²检验；计量资料用±s表示，两组之间比较用t检验，多组之间比较用F检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象外周血中miRNA-26a/b的表达水平

与对照组健康人相比，病例组患者外周血中miRNA-26a的表达水平更高，miRNA-26b的表达水平更低，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 两组研究对象外周血中miRNA-26a/b的表达水平（±s ）

表1 两组研究对象外周血中miRNA-26a/b的表达水平（±s ）

组别 miRNA-26a miRNA-26b病例组（n=77） 0.031±0.009 0.189±0.012对照组（n=80） 0.004±0.001 0.751±0.098 t值 5.263 6.782 P值 ＜0.05 ＜0.05

2.2 治疗前后病例组患者中疗效不同的患者外周血中miRNA-26a/b的表达水平

在病例组患者中，有42例患者的治疗效果为有效，有35例患者的治疗效果为缓解。其中，治疗效果为有效和缓解的患者在治疗前其外周血中miRNA-26a、miRNA-26b的表达水平相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗8周后、12周后及6个月后其外周血中miRNA-26a的表达水平均低于治疗前，miRNA-26b的表达水平均高于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗8周后、12周后及6个月后其中治疗效果为有效的患者外周血中miRNA-26a的表达水平均低于治疗效果为缓解的患者，miRNA-26b的表达水平均高于治疗效果为缓解的患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表2、表3。

表2 治疗前后病例组患者中疗效不同的患者外周血中miRNA-26a的表达水平（±s ）

表2 治疗前后病例组患者中疗效不同的患者外周血中miRNA-26a的表达水平（±s ）

治疗效果 治疗前 治疗8周后 治疗12周后 治疗6个月后有效（n=42）0.032±0.005 0.025±0.004 0.018±0.003 0.010±0.006缓解（n=35）0.033±0.004 0.031±0.005 0.026±0.004 0.019±0.005 t值 0.158 6.841 10.364 9.872 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

表3 治疗前后病例组患者中疗效不同的患者外周血中miRNA-26b的表达水平（±s ）

表3 治疗前后病例组患者中疗效不同的患者外周血中miRNA-26b的表达水平（±s ）

治疗效果 治疗前 治疗8周后 治疗12周后 治疗6个月后有效（n=42）0.152±0.022 0.289±0.012 0.345±0.014 0.507±0.079缓解（n=35）0.164±0.038 0.202±0.008 0.279±0.028 0.432±0.056 t值 0.296 5.820 6.893 8.459 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 讨论

近年来，我国抑郁症的发病率逐年升高。此病患者的早期症状不明显，随着其抑郁情绪的加重，可逐渐出现心境低落、抑郁悲观、思维迟缓、兴趣下降等表现，部分病情严重者可出现自残、自杀的想法或行为[5]。有报道称，miRNAs参与了抑郁症的多个发病机制，尤其在突触可塑性、神经形成、信号传导通路关键性元件的基因表达调控等方面发挥着重要作用[6]。张东子等[7]采用芯片筛选和荧光定量PCR后期验证法对抑郁症患者进行检测发现，其体内单核细胞中miRNA-26b的表达明显上调。任倩等[8]研究发现，miRNA-26a对于突触传递长时程增强（long-term potentiation，LTP）的维持具有重要的调控作用。突触传递LTP是突触可塑性的一种重要表现形式，诱导突触传递LTP可使部分miRNA上调和部分miRNA下调，这些改变可能会导致抑郁症的发生。关于miRNA-26b的研究，大多报道称其与人类恶性肿瘤的发生存在密切的相关性。另外，miRNA-26b在神经发生和神经元分化的过程中也发挥着重要作用。有研究指出，miRNA-26b参与了中枢神经系统（central nervous system，CNS）的调控发育。阿尔茨海默病患者和精神分裂症患者体内的miRNA-26b均存在异常调控的现象[9]。张理义等[10]认为，miRNA-26b的异常表达可能在神经紊乱和精神疾病的发生中起到重要作用。

本研究的结果证实，对抑郁症患者外周血中miRNA-26a/b的表达水平进行检测有助于诊断其病情，评估其疗效及预后。