早期糖尿病肾病患者血清CysC、sICAM-1、Hcy水平及临床意义

李亚辉，张欢欢，王东东

(1.河南医学高等专科学校 检验系，河南 郑州 451191；2.河南医学高等专科学校附属医院 检验科，河南 郑州 451191)

作为糖尿病(diabetes mellitus，DM)常见的并发症，糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)主要是由于患者长时间处于高血糖状态引起微血管受损，进而损伤肾功能，是糖尿病患者死亡的主要因素。我国DN发病率高达16.8%～23.5%[1]，且随着人口老龄化加剧，其发病率逐年上升。早期DN缺乏典型的症状表现，漏诊率、误诊率高，随着疾病进展会表现为水肿、高血压，多数伴随持续性蛋白尿，为临床治疗增加了一定的难度，因此对患者进行早期诊断及治疗尤为重要[2]。目前，关于DN的发病机制尚未达成一致意见，研究认为其与肾脏微血管病变有关，其中炎症在DN形成及发展中起重要作用，因此可以将各相关炎症标志物作为预测早期DN的指标[3-4]。本研究检测血清同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)，半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C，CysC)，可溶性细胞间黏附分子-l(soluble intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1)指标，探讨其在早期DN中的表达水平及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2019年1月至2020年12月河南医学高等专科学校附属医院收治的40例早期DN患者作为早期DN组，选取同期在河南医学高等专科学校附属医院接受治疗的40例单纯DM患者作为单纯DM组，选取同期30名接受常规体检的健康者作为对照组。早期DN组：男23例，女17例；年龄32～77岁，平均(57.63±4.02)岁。单纯DM组：男22例，女18例；年龄31～78岁，平均(57.53±4.09)岁。对照组：男21例，女19例；年龄33～79岁，平均(57.53±4.21)岁。3组性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)。入组对象已明确本研究目的及流程，自愿参与，并签署知情同意书。本研究经河南医学高等专科学校附属医院医学伦理委员会审核通过。

1.2 选取标准(1)纳入标准：①DN与《中国糖尿病肾病防治专家共识》描述相符，DM诊断参照《2010美国糖尿病协会糖尿病治疗指南》[5-6]；②年龄≥18岁，可正常交流。(2)排除标准：①心脏受损或肝功能异常；②合并精神异常、心理障碍或意识丧失；③合并恶性肿瘤疾病；④听力丧失，语言不流畅，无法配合；⑤合并感染性疾病或血液系统疾病；⑥合并严重DM并发症；⑦合并甲状腺疾病；⑧合并其他类型肾病。

1.3 检测方法于清晨空腹状态下采集患者静脉血2 mL，37 ℃孵育1 h后，在10 cm离心半径、3 000 r·min-1转速下离心15 min，分离提取血清，尽早检测并保存于-20 ℃环境下备用。采用康宇医疗HF-220全自动生化分析仪(泰安市康宇医疗器械有限公司)检测CysC；采用酶联免疫吸附法检测sICAM-1，试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；采用胶金体法检测Hcy水平，试剂盒购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。检测期间对仪器进行校准，按照检测试剂盒说明执行各项操作，并加强质量控制。

1.4 观察指标检测3组CysC、sICAM-1、Hcy水平和阳性表达情况，对3项指标联合诊断早期DN的ROC曲线进行分析。Hcy>15 μmol·L-1表示阳性，CysC>1.03 mg·L-1表示阳性，sICAM-1>202.4 ng·L-1表示阳性。早期DN诊断标准：肾脏体积呈增大趋势，伴随肾小球高滤过为Ⅰ期；病理诊断结果显示肾小球基底膜有增厚现象，系膜增宽，但白蛋白尿及尿白蛋白与肌酐比值正常为Ⅱ期；伴随持续白蛋白尿，小动脉壁有玻璃样变为Ⅲ期[7-9]。

2 结果

2.1 血清CysC、sICAM-1、Hcy水平3组血清CysC、sICAM-1、Hcy水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组和单纯DM组比较，早期DN组血清CysC、sICAM-1、Hcy水平较高(P<0.05)。见表1。

表1 3组血清CysC、sICAM-1、Hcy水平比较

2.2 血清CysC、sICAM-1、Hcy阳性率早期DN组血清CysC、sICAM-1、Hcy阳性率均高于对照组和单纯DM组(P<0.05)。见表2。

表2 3组血清CysC、sICAM-1、Hcy阳性率比较[n(%)]

2.3 ROC曲线将尿白蛋白与肌酐比值作为早期DN诊断标准，计算单一指标与联合检测ROC曲线下面积。见表3。

表3 血清CysC、sICAM-1、Hcy单一及联合检测 ROC曲线下面积

3 讨论

DM是遗传、环境以及肥胖等多种因素共同作用的结果，病程长，迁延难愈，严重影响患者的生活质量。随着DM发病率的升高，DN患者逐年增加。DN作为DM最常见的并发症，不仅会加剧肾功能的损害，而且会导致代谢产物难以被清除，引起水肿、蛋白尿等症状，降低患者生活质量。以往研究发现糖尿病前期伴随不同程度肾功能损伤，但部分患者尿蛋白、尿素氮等指标均正常[10]，且患者症状表现不明显，病情隐匿。患者有典型症状表现，多已进入中晚期，治疗困难。因此，早期诊断DN，便于患者及早接受治疗，实现对血糖的良好控制，减轻肾损伤，延缓DN进程。

近年来，研究发现DN是多种因素共同作用的结果，DM血管并发症的形成经过了内皮功能障碍、低度炎症以及糖基化终产物3个途径，作为肾脏炎症改变和肾血管内皮损伤的特异性标志物，Hcy、CysC以及sICAM-1能够动态监测早期DN病理变化[11]。作为含硫氨基酸类成分，Hcy与动脉硬化形成、心脑血管疾病的发生有着密不可分的关系。研究发现Hcy与尿微量白蛋白呈正相关[12]。Hcy在DN中的作用机制如下：(1)通过对活性氧的刺激产生氧化应激；(2)对内皮细胞一氧化氮产生影响，降低其生物利用度；(3)能够在甲基化反应中起作用，加快动脉硬化疾病的形成与发生；(4)在Hcy作用下，肾脏微血管收缩加强，容易引起Hcy滞留、堆积。多种机制相互作用引起肾功能慢性损伤[13]。本研究结果显示，早期DN组Hcy水平及阳性率均较对照组和单纯DM组高，提示Hcy在早期DN中呈高表达。CysC是小分子蛋白质，在血液中较稳定，临床上多用于评估肾功能。受代谢异常及免疫损伤的影响，DN患者多伴随肾小球基底膜增生，减少了滤过面积，血清CysC呈增高趋势[14]。有研究认为，DM患者伴随轻微肾功能损伤会通过CysC指标反映出来，且尿蛋白水平越高，CysC升高越明显，其在DN患者早期肾小球高滤过评估中有较高的价值[15]。本研究早期DN组CysC水平较对照组和单纯DM组高，且阳性率达到70.0%。sICAM-1主要是由内皮细胞合成分泌，能够反映血管内皮损伤及炎症反应程度，在炎症细胞和内皮细胞黏附中具有一定的介导作用，加重内皮细胞损伤以及功能障碍。sICAM-1可以作为DN长期风险标志物。本研究发现，早期DN组sICAM-1水平及阳性率最高，提示该指标可以作为DN早期诊断及评估的敏感性指标。单一指标检测对早期DN诊断价值有限，血清CysC、sICAM-1、Hcy联合诊断早期DN的ROC曲线下面积为0.818，95% CI为0.743～0.882，显示出较好的诊断价值及敏感度。但由于本研究样本量小，可能存在一定偏差，在后续研究中应加大样本量，联合更多指标为早期DN的诊断提供帮助，为临床提供更多可靠的依据。

综上所述，血清CysC、sICAM-1、Hcy水平联合检测对早期DN有较高的诊断价值，其高表达能够反映出肾损伤情况，可用于对早期DN诊断及预后评估，具有较高的临床价值。