保山地区4 593例产前筛查珠蛋白生成障碍性贫血结果分析

刘晋斐，杨 拴，赵 丽，王琼丽

云南省保山市人民医院检验科，云南保山 678000

珠蛋白生成障碍性贫血在我国南方地区高发，携带率为1.92%～24.14%[1-2]。据文献报道，云南省部分少数民族的珠蛋白生成障碍性贫血携带率在21%左右，育龄人群携带率在10.5%左右[3]。目前关于保山地区珠蛋白生成障碍性贫血的研究鲜见。我国珠蛋白生成障碍性贫血采用基因检测方法明确诊断[4]，但因其技术要求高、价格昂贵等原因，难以满足人人检测的要求。本研究通过联合血常规及血红蛋白(Hb)电泳结果进行筛查后，运用珠蛋白生成障碍性贫血基因进行确诊的方法对本地区4 593例产前筛查珠蛋白生成障碍性贫血的结果进行分析总结，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 2018年12月至2019年12月于保山市人民医院产科门诊进行产前检查的孕妇共3 803例，年龄14～56岁，孕周6～39周。随诊丈夫790例，年龄16～58岁。所有孕妇及部分随诊的丈夫共4 593例均进行血常规检测及血红蛋白电泳筛查，结果提示异常者进行珠蛋白生成障碍性贫血基因检测。

1.2方法

1.2.1检测方法 采用EDTA-K2抗凝血，用Beckman LH750及Mindray BC6800P全自动细胞分析仪及配套试剂检测血常规。用法国Sebia Capillarys 2 Flexplercing全自动电泳仪及配套试剂检测Hb电泳，工作人员均按说明书操作，仪器均在校准有效期内且室内质控符合要求。

1.2.2判断标准 依据国际珠蛋白生成障碍性贫血协会(TIF)的建议及相关防控指南[5-6]判断。红细胞指标的正常参考范围：平均红细胞体积(MCV)≥80 fL，平均红细胞血红蛋白含量(MCH)≥27 pg，Hb≥120 g/L(男)或Hb≥110 g/L(女)。Hb指标的正常参考范围：成人HbA≥95%，2.5%≤成人HbA2≤3.5%，胎儿Hb(HbF)≤2%。当血常规显示MCV<80 fL和(或)MCH<27 pg则诊断为小细胞低色素；若HbA2<2.5%和(或)出现Hb Constant-Spring(HbCS)、HbH或HbBart′s，同时未出现其他异常Hb条带，则初步诊断为疑似α-珠蛋白生成障碍性贫血携带者；若HbA2>3.5%和(或)HbF>2%，则初步诊断为疑似β-珠蛋白生成障碍性贫血携带者；若出现HbC、HbD、HbE、HbJ、HbK、HbQ等异常Hb条带则诊断为异常Hb病。

1.2.3珠蛋白生成障碍性贫血基因检测 采用达安基因公司生产的珠蛋白生成障碍性贫血(α/β)基因检测试剂盒进行PCR-流式荧光杂交检测。

1.3统计学处理 采用SPSS 20.0统计软件进行分析，计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1筛查阳性率 受检孕妇及部分随诊丈夫共4 593例，珠蛋白生成障碍性贫血表型筛查阳性1 325例，阳性率为28.84%。筛查出疑似α-珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性993例，阳性率为21.62%；β-珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性208例，阳性率为4.53%。本次筛查人群中检出异常Hb带124例，其中在Z(E)区检出116例，在Z(15)区检出4例，在Z(8)和Z(12)区各检出1例，HbA+Hb变异体2例。见表1。

表1 妊娠妇女及部分随诊丈夫血液学筛查结果(n)

2.2基因诊断 根据筛查结果、临床医生意见及患者意愿共244例表型筛查阳性者进行了珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断，确诊珠蛋白生成障碍性贫血76例(31.15%)。76例中确诊为α-珠蛋白生成障碍性贫血38例，其中α-珠蛋白生成障碍性贫血缺失型38例，基因型为--SEA型、-α3.7型、-α4.2型，α-珠蛋白生成障碍性贫血基因CS142突变(杂合子)8例，纯合子1例；确诊为β-珠蛋白生成障碍性贫血38例，其中检出β-珠蛋白生成障碍性贫血CD17基因突变(杂合子)8例， CD26突变(杂合子)23例， CD41-42基因突变(杂合子)3例， IVS-Ⅱ-654突变(杂合子)4例。

3 讨 论

云南省是珠蛋白生成障碍性贫血高发地区之一，保山处于滇西居中的位置，因经济发展较为落后，大规模开展珠蛋白生成障碍性贫血基因筛查的条件尚未成熟。目前广泛应用于珠蛋白生成障碍性贫血初筛的主要检测技术是Hb电泳和血常规检测，毛细血管电泳具有操作简便、检测时间短、灵敏度较高等优点，联合血常规指标进行筛查具有更好的准确性和特异性[7]。

在本研究4 593例产前筛查中，筛查出珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性1 325例，阳性率为28.84%，其携带率在云南省处于相对较高水平，低于德宏(42.48%)，高于文山(18.69%)、红河(13.78%)、玉溪(12.53%)[8]。本次调查保山地区珠蛋白生成障碍性贫血携带率高的原因与地域性因素有关，保山地区毗邻珠蛋白生成障碍性贫血携带率较高的德宏傣族景颇族自治州、怒江傈僳族自治州、临沧市，因为人员流动及部分地区医疗水平有限的因素，到本市、本院进行就医、产检人数多。

本研究筛查表型阳性者有244例进行珠蛋白生成障碍性贫血基因检测，确诊珠蛋白生成障碍性贫血76例，占检测人数的31.15%。考虑到研究的对象或区域的局限性，基因突变的构成上具有一定的异质性。

本次产前筛查孕妇及部分随诊丈夫中检出异常Hb带124例，主要以HbE为主，可能与保山地区特殊的地理环境有所关联。HbE与不同珠蛋白生成障碍性贫血类型或异常Hb类型合并会出现不同的相互作用，会引起复合型α、β-珠蛋白生成障碍性贫血的血液学表型。由于α合并β-珠蛋白生成障碍性贫血携带者无明显的临床症状或症状较轻，容易导致血常规筛查出现漏诊。

产前诊断是珠蛋白生成障碍性贫血患儿出生前干预的一道防线，目前本院要求每位孕产妇及其丈夫均进行珠蛋白生成障碍性贫血筛查；如果丈夫没有随行检查的，筛查出表型阳性的孕产妇的丈夫也必须进行筛查，以尽量减少漏诊的情况。

综上所述，本研究结果显示，有效利用血常规、Hb电泳进行珠蛋白生成障碍性贫血筛查，再进行基因诊断，能有效预防和控制珠蛋白生成障碍性贫血患儿出生，继而提高人口素质，避免增加家庭负担。同时，本研究为保山地区珠蛋白生成障碍性贫血的防控提供了一定的参考。