STR基因座突变对亲子鉴定准确性的影响研究

杨 飞 董露斌

（浙江中和司法鉴定中心法医毒物实验室，浙江 宁波 315012）

亲子鉴定是指运用生物学、遗传学及有关学科的理论与技术，根据遗传性状在自带和亲代之间的遗传规律，从而判断被控的父母与子女之间是否存在亲缘关系［1］。当前，亲子鉴定涉及案件包括：非婚生子女的抚养纠纷、财产继承纠纷及医院产房抱错新生儿引起的亲生子认定［2］。既往研究表明［3］：短串联重复序列（STR）是个体识别能力极强的人类基因组，具有相对稳定的遗传性，是当前阶段亲子鉴定、个体识别最为常见的遗传标记。近年来，随着医疗技术的不断发展，STR复合扩增分型系统在亲子鉴定中得到应用，但是越来越多的研究证实，STR基因座组合的选择会对亲子鉴定结果产生影响，但是该结论尚未得到证实［4］。因此，本研究以亲子鉴定标本3384份作为对象，探讨STR基因座突变对亲子鉴定准确性的影响，报道如下。

一、资料与方法

（一）临床资料

选择2018年3月—2020年2月亲子鉴定标本3384份作为对象，涉及案例2153个。标本中，血液标本3380份，口腔咽拭子标本4份。纳入标准：（1）均能顺利完成亲子鉴定标本采集；（2）具有完整的基线资料与随访资料。排除标准：（1）合并精神异常、血液系统疾病或器质性疾病者；（2）严重肝肾功能异常、凝血功能异常者。

（二）方法

（1）仪器与设备。3130型自动遗传分析仪，购于美国AB公司；Identifiler plus试剂盒，购于基因点认知技术北京有限公司；9700型PCR扩增仪，购于美国AB公司；（2）方法。①DNA的提取与扩增。采用Identifiler plus试剂盒完成15个STR基因座复合扩增，包括：D8S1179、D2S1339、D19S433、D21S11、CSF1PO、TH01、D16S539、D3S1358、FGA、TPOX、D18S51、D2S1338，控制整个反应体系为10uL，根据亲子鉴定需要设置相关参数：30℃下操作10min；42℃处理30min；99℃下处理5min；5℃下处理5min，合计完成循环35个，最终10min延长，温度72℃，将最终获得的产物放置在4℃下，保存；②扩增产物检测。将上述获得的扩增产物采用Chelex-100提取模板DNA，将最终获得的扩增产物经3500DX基因分子仪完成毛细血管电泳，并采用全自动分析仪，参考SF/Z JD0105001-2016技术完成亲权关系的确定。

（三）统计分析

采用SPSS18.0软件处理，计数资料行χ2检验，采用n（%）表示，计量资料行t检验，采用（±s）表示，P＜0.05差异有统计学意义。

二、结果

子鉴定标本3384份中，支持亲子关系2122例，三联体875例，二联体1247例，合计观察到减数分裂1958次，16例基因座突变，突变率为0.82%。突变率排在前三位的分别为：D8S1179基因、D21S11基因、D2S1339基因和D19S433基因，分别占：0.204%、0.204%、0.102% 和 0.10%，见表1。

表1 STR基因座在亲子鉴定中突变率分析

三、讨论

STR是目前法医鉴定过程中使用最多、最为广泛的长度多态性遗传标记，具有高度的多态性，更加符合、遵循孟德尔遗传规律，广泛用于亲子鉴定、个体的识别、遗传病连锁等领域中。本研究中，子鉴定标本3384份中，支持亲子关系2122例，三联体875例，二联体1247例，合计观察到减数分裂1958次，16例基因座突变，突变率为0.82%。突变率排在前三位的分别为：D8S1179基 因、D21S11基 因、D2S1339基 因和D19S433基因，分别占：0.204%、0.204%、0.102%和0.10%，说明STR在DNA合成过程中突变率较高，导致基因突变，从而造成结果分析偏差甚至误判。国外学者研究表明：STR基因座突变来源有明显的性别差异，且父亲突变率更高，可能与男性静母细胞在形成精子过程中需要经历多次复制有关，复制次数越多，突变率越高，与本研究结果相符［5］。

综上所述，STR基因座在亲子鉴定中突变率相对较高，且父系突变比例相对较高，会对亲子鉴定结果产生影响。因此，亲子鉴定过程中应结合基因突变情况计算侵权指数，提高亲子鉴定准确性。