脑脊液乳酸、NF-κB及BAFF对颅内动脉瘤破裂出血术后转归的预测

李博 蒋铭 张志国 张程文

颅内动脉瘤是因颅内动脉局限性异常扩大引发动脉瘤样病变而导致的脑血管疾病，调查研究显示，约85%的蛛网膜下腔出血是因颅内动脉瘤破裂所致［1］。手术是目前临床治疗颅内动脉瘤破裂出血的首选有效方案。研究发现部分颅内动脉瘤破裂出血患者术后存在疾病复发、再出血等预后不良的风险［2］。因此，及时评估颅内动脉瘤破裂出血术后转归情况，对改善患者预后有重要意义。

乳酸是细胞发生无氧代谢时的产物，被作为判断危重症患者无氧代谢和组织灌注的敏感指标［3］。核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）是细胞内重要的转录因子，可在第一时间对有害细胞的刺激做出反应，调控基因转录。B 细胞活化因子（B cell-activating factor of the TNF family，BAFF）属于调控机体免疫应答的B 淋巴细胞的一种共刺激因子。本研究就脑脊液乳酸、NF-κB 及BAFF 检测对颅内动脉瘤破裂出血术后转归中的预测进行研究，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取119 例2017年2月至2020年2月在本院进行手术治疗的颅内动脉瘤破裂出血患者，术后随访3 个月。研究对象纳入指标：①均符合第四届全国脑血管病学术会议修订的颅内动脉瘤诊断标准［4］，均为单发；②均存在瘤体破裂出血表现；③临床资料完整者；④符合手术治疗指征者。排除指标：①存在其他系统病变或恶性肿瘤者；②存在严重心、肺、肝等器官功能不全患者；③凝血功能障碍者；④不能接受随访者。本研究经医院医学伦理委员会批准通过，受试者或其家属均签署知情同意书。

1.2 方法

脑脊液乳酸：采用GEM Premier 3000 仪器检测患者术后0～72 h 时脑脊液乳酸水平，计算术后72 h 乳酸清除率，术后72 h 乳酸清除率=（术后0～24 h 脑脊液乳酸值-术后48～72 h 脑脊液乳酸值）/术后0～24 h 脑脊液乳酸值×100%。以术后72 h 乳酸清除率的10%为界限，清除率≥10%为高清除率，清除率＜10 为低清除率［5］。

BAFF：于患者术后24 h 内常规腰椎穿刺抽取脑脊液3 mL，离心（3 000 r/min，10 min，r=10 cm），取上清液，使用酶联免疫吸附法（Enzyme Linked Immune Sorbent Assay，ELISA）法测定BAFF 水平，由北京美康生物技术研究中心有限责任公司提供检测所用的试剂，根据说明书步骤操作。异常增高：BAFF≥500 pg/mL，正常：BAFF＜500 pg/mL［6］。

NF-κB：采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组化染色法检测，仪器为ELECSYS2010 罗氏电化学发光分析仪。所有颅内动脉瘤标本组织于手术切除后即使用10%甲醛固定，组织切片后脱蜡、水化，具体方法严格按照试剂盒说明执行。每批切片染色均用已知的NF-κB 阳性表达的颅内动脉瘤组织切片当阳性对照，以磷酸盐缓冲液代替一抗作低表达对照。结合阳性细胞百分比和染色强度判定NF-κB 结果［7］：阳性细胞百分比评分：＜26%为1 分，26%～50%为2 分，51%～75%为3分，＞75%为4 分。染色情况判定：0 分为无色，1 分为淡黄色，2 分为棕黄色，3 分为棕褐色。两项评分之和≤2 分为阴性，≥3 分为阳性。

1.3 观察指标

①采用改良Rankin 量表（Modified Rankin Scale，mRS）评估患者预后情况［8］，mRS 评分0～2分者归为预后良好组，mRS 评分3～6 分者归为预后不良组（包括死亡患者）。比较两组脑脊液乳酸、NF-κB 及BAFF 表达情况。②分析影响颅内动脉瘤破裂出血患者术后转归的独立危险因素。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行统计分析。计量资料以（）表示，行t检验；计数资料采用n（%）描述，行χ2检验；影响因素采用多元Logistic 回归分析，以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基本资料比较

两组患者基本资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 两组患者基本资料比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison on basic data between 2 groups［n（%），（±s）］

表1 两组患者基本资料比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison on basic data between 2 groups［n（%），（±s）］

组别预后不良组预后良好组t/χ2值P 值n 33 86--男/女12/21 26/60 0.412 0.521平均年龄（岁）49.73±7.24 48.98±8.21 0.460 0.646高血压病史19（57.58）37（43.02）2.027 0.155糖尿病史12（36.36）19（22.09）2.521 0.112吸烟史11（33.33）26（30.23）0.127 0.744

2.2 两组脑脊液乳酸、NF-κB 及BAFF 表达情况

预后不良组脑脊液乳酸明显低于预后良好组，BAFF 水平及NF-κB 阳性率均高于预后良好组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2、图1。

表2 两组脑脊液乳酸、NF-κB 及BAFF 表达情况［n（%），（±s）］Table 2 the expression levels of cerebrospinal fluid lactic acid，NF-κB and BAFF in the two groups［n（%），（±s）］

表2 两组脑脊液乳酸、NF-κB 及BAFF 表达情况［n（%），（±s）］Table 2 the expression levels of cerebrospinal fluid lactic acid，NF-κB and BAFF in the two groups［n（%），（±s）］

组别预后不良组预后良好组χ2值P 值n 33 86阴性5（15.15）45（52.33）--脑脊液乳酸（%）7.29±1.82 8.53±2.62 2.495 0.014 BAFF（pg/mL）585.86±164.38 446.55±151.78 4.380＜0.001 NF-κB阳性28（84.85）41（47.67）13.528＜0.001

图1 NF-κB 免疫组化染色（SP，×400）Figure 1 NF-κB immunohistochemical staining（SP，×400）

2.3 影响颅内动脉瘤破裂出血患者术后转归的单因素分析

患者性别、高血压史、糖尿病史、手术方式非影响影响颅内动脉瘤破裂出血术后转归的单因素（P＞0.05），年龄、Hunt-Hess 分级、格拉斯哥昏迷量表（Glasgow Coma Scale，GCS）评分、脑脊液乳酸、NF-κB 及BAFF 表达为影响颅内动脉瘤破裂出血患者术后转归的单因素（P＜0.05）。见表3。

表3 影响颅内动脉瘤破裂出血患者术后转归的单因素分析Table 3 simple analysis on factors influencing the postoperative outcome of patients with rupture hemorrhage of intracranial aneurysm

2.4 影响颅内动脉瘤破裂出血患者术后转归的多因素分析

非条件多因素logistic 回归模型分析显示，年龄、Hunt-Hess 分级、GCS 评分、脑脊液乳酸、NF-κB及BAFF 表达是影响颅内动脉瘤破裂出血患者术后转归的危险因素（P＜0.05）。见表4。

表4 影响颅内动脉瘤破裂出血患者术后转归的多因素分析Table 4 multivariate analysis on factors influencing the postoperative outcome of patients with rupture hemorrhage of intracranial aneurysm

3 讨论

研究统计，颅内动脉瘤破裂出血患者术后治疗后，预后不良的风险仍较高［9］。积极寻找可在颅内动脉瘤破裂出血术后早期发现病情变化并判断预后的指标，对改善患者预后转归的临床意义重大。

颅内动脉瘤破裂出血患者的中枢神经系统损伤伴随着能量代谢改变，而能量代谢危机预示着患者不良预后的转归，乳酸作为神经损伤后能量代谢危象和疾病发生发展的标志物越来越受到关注［10］。目前国外许多学者已把乳酸作为动脉瘤性蛛网膜下腔出血的潜在损伤生物标志物进行研究，但研究结果仍存在争议［11］。Ren 等［12］研究表明脑脊液乳酸与动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者预后相关，但Uno 等［13］研究却认为脑脊液乳酸与动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者预后无关。Razaghi 等学者［14］研究认为，中枢神经系统中的乳酸被排入脑脊液中，因此脑脊液乳酸检测在颅内动脉瘤破裂出血患者中的变化情况值得探讨。本研究结果显示，术后预后不良组脑脊液乳酸明显低于预后良好组，脑脊液乳酸＜10%的患者预后不良的风险越高，这一研究结果与既往文献报道结果一致［15］，表明检测脑脊液乳酸对患者病情及预后评估有指导意义。

NF-κB 是近年来发现的重要转录因子之一，广泛存在于哺乳动物中，可与B 淋巴细胞免疫球蛋白κ 轻链基因的增强子κB 序列特异性结合，活化的NF-κB能够上调细胞间黏附因子的表达，参与肿瘤的发生、发展、侵袭及转移。Obuchowska 等［16］研究发现，NF-κB 在脑动脉瘤形成初期被激活，同时对下游基因的表达起上调作用，通过人为干预减少NF-κB 后，脑动脉瘤的发生率明显降低。本组研究结果提示NF-κB 可作为评估颅内动脉瘤破裂出血术后转归的重要指标之一。BAFF是一种促炎细胞因子，被认为是一种类似C 反应蛋白的物质，可反映机体的炎症水平。目前许多研究表明BAFF与颅内动脉瘤破裂出血及病情进展有关［17］。本组研究结果提示BAFF与颅内动脉瘤破裂出血术后转归存在一定相关性。BAFF水平的增高可加重颅内动脉瘤患者的炎性反应，继而加重颅内动脉管壁持续性损伤。BAFF异常升高的颅内动脉瘤破裂出血患者术后预后不良的风险大，提示BAFF在评估患者预后情况中具有重要的价值。

综上所述，脑脊液乳酸、NF-κB 及BAFF 与颅内动脉瘤破裂出血术后转归密切相关，可作为预测患者预后的潜在分子标志物。