蔬菜中百菌清残留的检测

◎ 李海军，常 琴

（1.贵州博联检测技术股份有限公司，贵州 贵阳 550081；2.贵阳市南明区质量技术监督检测所有限公司，贵州 贵阳 550005）

百菌清（Chlorothalonil）是一种高效、低毒及低残留的广谱有机氯杀菌剂，对多种植物的真菌病害有良好的预防作用[1]，被广泛应用于蔬菜、果树、经济作物病害的防治[2]。但随着生活水平的提高，人们对食品安全问题也越来越重视，百菌清残留量的限量要求也越来越高，根据GB 2763—2019最大农药残留限量，规定了蔬菜中百菌清最大残留量为10 mg·kg-1[3]，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单中，百菌清被列为2B类致癌物[4]，并且2019年4月29日欧盟发布了百菌清正式禁用公告，因此百菌清对食品安全的影响不容忽视。

百菌清属于有机氯类农药，含有电负性较强的氯原子，因此采用电子捕获检测器定量测定较为适合。本实验采用新的前处理方法，通过Florisil固相萃取柱净化[5]，用GC-uECD对黄瓜、生菜、菜心中的百菌清残留量进行分析，为蔬菜中百菌清的残留检测提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

样本为黄瓜、生菜和菜心，均购自超市。

百菌清标准品，浓度为100 μg·mL-1，农业部环境保护科研监测所；Florisil固相萃取柱，安捷伦科技（中国）有限公司；正己烷、乙腈、乙酸乙酯，均为色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司；其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器与设备

JJ-2均质机（常州国华电器有限公司）、agilent 7890A气相色谱仪（安捷伦科技（中国）有限公司）、BSA224S分析天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）、RE 52-99旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）、N-29氮气吹干仪（山东云网数据科技有限公司）及H1850离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 仪器条件

色谱条件：HP-5石英毛细管色谱柱（30 m×0.32 mm×0.25 um），程序升温，以120 ℃为起始温度，然后 15 ℃·min-1到 250 ℃，然后 5 ℃·min-1到 260 ℃，保持5 min；载气为高纯氮气（≥99.999%）；柱流速为1.5 ml·min-1，分流进样，分流比为10∶1；进样口温度为230 ℃，检测器温度为320 ℃；用正己烷清洗进样针。

1.3.2 标准溶液的配制

精密量取百菌清标准品储备溶液（10 μg·mL-1）0.1 mL至10 mL容量瓶，用正己烷稀释并定容至刻度，标准品溶液浓度为0.1 μg·mL-1。百菌清标准品色谱图如图1所示。

图1 百菌清标准品色谱图

1.3.3 样品的制备

分别将黄瓜、生菜及菜心用均质机打成浆，用自封袋盛装，冷藏，备用。

1.3.4 样品的提取

称取5 g（精确到0.01）试样于50 mL塑料离心管中，加入乙腈20 mL、氯化钠2 g，涡旋混匀，置于25 ℃恒温超声仪中超声20 min，离心，取上清液至100 mL鸡心瓶中；残渣再加入20 mL乙腈同上操作，取上清液至同一鸡心瓶中，用旋转蒸发仪40 ℃浓缩近干，加入5 mL正己烷溶解，待净化。

1.3.5 样品的净化

（1）florisil固相萃取柱预淋洗。加入2 g无水硫酸钠至Florisil固相萃取柱中，先用5 mL正己烷+乙酸乙酯（90+10）淋洗，自然流出，待液面至无水硫酸钠层，再加入5 mL正己烷，弃去淋洗液。

（2）净化。取2 mL提取液至Florisil固相萃取柱中，用10 mL正己烷+乙酸乙酯（90+10）洗脱，收集洗脱液至20 mL玻璃氮吹管中，氮气吹干仪40 ℃浓缩至近干，用1 mL正己烷溶解，上机测试。

2 结果与分析

2.1 标准曲线绘制

将百菌清标准溶液（100 μg·mL-1）稀释为 10 μg·mL-1的标准储备液，再将储备液稀释为1 μg·mL-1的使用液。分别用移液器量取一定量的使用液，配制成0.01 μg·mL-1、0.02 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1和0.20 μg·mL-1的系列标准工作液，用气相色谱仪测定，得到标准曲线如图2所示，标准品的保留时间为7.150 min；回归方程为Y=5.650 98x+19.225 55，线性相关系数为0.999 47，被测物质在给定范围内线性良好。

图2 百菌清标准准曲线图

2.2 检出限的测定

将0.01 μg·mL-1的样品基质溶液连续进样7次，进样结果计算标准偏差S，由MDL=t(n-1,0.99)×S，计算出方法检出限为0.000 5 mg·kg-1。

2.3 回收率的测定

在添加浓度为0.02 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-13个水平时，分别对黄瓜、生菜、菜心进行回收率试验。测出百菌清的回收率为92.0%～104.1%，相对标准偏差在0.9%～4.1%，说明方法准确度较高。结果如表1所示。

表1 百菌清回收率结果表

3 结论

本文建立测定蔬菜中百菌清残留的气相色谱法（GC-uECD），该方法相对于国标GB/T 5009.105—2003检测方法，在前处理方面简化了操作步骤，节约了处理时间、试剂成本，且重现性较好，提高了回收率，具有较低的检出限，对蔬菜中百菌清残留检测更快速、准确。