宫颈管分泌物Th1/Th2亚群与高危型HPV感染相关性研究

毛佩瑜 张晨

女性阴道是一个特异的、结构复杂的、动静态结合的微生态体系[1]。女性阴道内的益生菌在周期性的性激素作用下，分泌各种细菌素和细胞因子，维持阴道酸性环境，使得阴道内不同种类和数量的微生物能与宿主、环境彼此协调、互相制约，共同维持着阴道微生态体系的动态平衡及稳态[2]。这种平衡状态一旦被破坏，条件致病菌过度生长，人体就可能罹患各种生殖道疾病。女性感染HPV后宫颈组织可发生病变，这种病变是否会进展至宫颈高级别病变，主要取决于3个方面：病毒的致病能力、阴道微生态及宿主自身免疫状态。目前，Th1/Th2亚群检测多采用外周血为检测标本，HPV感染女性宫颈管局部分泌物Th1/Th2亚群是否存在异常报道不多。本研究拟通过检测宫颈管分泌物Th1/Th2亚群水平的变化，探讨宫颈管分泌物Th1/Th2亚群与高危型HPV感染的相关性，为及时纠正生殖道高危型HPV感染患者的阴道不良环境及提高HPV转阴率提供理论参考，现报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2018年3月至2019年3月在浙江省中医院检测宫颈管分泌物显示高危型HPV阳性的60例患者为观察组，阴性的受检者60例为对照组，年龄均为 18～35 岁。观察组纳入标准：（1）有性生活史；（2）受检者在检查前48 h无性生活史及阴道灌洗放药史，非月经期，就诊时阴道无异常出血；（3）HPV-16、18、52、58型HPV检测阳性，未进行治疗者；（4）经薄层液基细胞学检测（thinprep cytologic test，TCT）或阴道镜检查及宫颈组织活检确定是否存在外阴、阴道、宫颈器质性病变（如湿疣、上皮内瘤样病变、癌变），其中存在宫颈病变的患者，按子宫颈上皮部分被异型细胞所取代的面积严重程度，分为宫颈上皮内瘤变Ⅰ级（CIN Ⅰ级）、CIN Ⅱ级和CIN Ⅲ级（包括宫颈原位癌），不存在宫颈病变的患者标记为正常宫颈；（5）非妊娠及哺乳期；（6）除外影响免疫状态的内外科疾病；（7）近1个月内无其他特殊食物或药物服用史。对照组纳入标准：女性体检者中HPV检测阴性者。对照组纳入标准除上述（3）、（4）外，余同观察组。观察组年龄18～35（29.05±4.90）岁，对照组年龄18～35（29.45±4.64）岁，两组患者年龄比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 宫颈HPV分型检测 使用专用宫颈刷在宫颈鳞-柱状上皮交界处轻轻刷取数圈，获得适量分泌物及细胞，取出宫颈刷，将刷头拔下并迅速放入保存液中，送检验科进行HPV分型检测。

1.2.2 宫颈管Th1/Th2亚群检测 使用专用宫颈刷刷取宫颈管分泌物，加入至1 ml 0.9%氯化钠溶液中，采用流式荧光法，使用人Th1/Th2亚群检测试剂盒进行细胞因子检测。选取Th1家族中的IL-2及Th2家族中的IL-10作为观测指标（即IL-2/IL-10）。

2 结果

2.1 两组受检者宫颈管分泌物IL-2、IL-10、IL-2/IL-10水平比较 与对照组相比，观察组患者IL-2、IL-2/IL-10水平均降低，IL-10水平升高，差异均有统计学意义（均 P＜0.05），见表 1。

表1 两组受检者宫颈管IL-2、IL-10、IL-2/IL-10水平比较

2.2观察组患者宫颈病变严重程度与宫颈管分泌物IL-2、IL-10、IL-2/IL-10水平的相关性分析 观察组患者正常宫颈27例，CINⅠ级17例，CINⅡ级9例，CINⅢ级5例，宫颈原位癌患者2例。相关性分析发现，观察组患者宫颈病变越严重，宫颈管IL-2水平越低，IL-10水平越高，IL-2/IL-10水平越低，见表2。

表2 观察组患者宫颈病变严重程度与宫颈管IL-2、IL-10、IL-2/IL-10水平的相关性分析

3 讨论

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率呈上升趋势，在中国女性生殖道恶性肿瘤中居首位，严重威胁女性健康。高危型HPV感染是宫颈癌发生的重要原因之一[3]。HPV主要通过性接触传播，尤其是在人体一些特异性部位的皮肤和黏膜，如宫颈柱状上皮和鳞状上皮交界处感染，因而女性更易成为携带者。大部分女性在感染HPV后不出现明显的临床症状，因而很难对HPV感染患者作一个全方位的风险因子评估。

阴道局部免疫环境中的免疫反应在宿主抗高危型HPV感染和宫颈病变进展中起重要作用[4]。在宫颈癌发生早期，机体并未呈现出明显的免疫状态改变，但阴道局部免疫微环境已因高危型HPV的持续感染而发生变化。可见，高危型HPV的持续感染可能与阴道免疫微环境改变密切相关[5]。

本研究中，通过对两组患者宫颈管分泌物IL-2、IL-10、IL-2/IL-10检测发现，观察组宫颈管分泌物IL-2、IL-2/IL-10水平比对照组下降，IL-10水平上升。同时在观察组患者中随着宫颈病变严重程度加重，宫颈管分泌物IL-2水平呈下降趋势，IL-10呈上升趋势，IL-2/IL-10呈下降趋势。由此可知，高危型HPV感染的宫颈病变严重程度与IL-2水平呈负相关，与IL-10水平呈正相关，与IL-2/IL-10水平呈负相关。这表明在感染状态下，Th1和Th2分别促进自我分泌，试图消除病毒的持续感染，抑制疾病的进一步发生。然而，当Th1/Th2平衡失常，不能消除持续性感染时，疾病逐渐发展，并且发生Th1向Th2漂移，机体处于Th2型细胞优势状态，这导致细胞免疫缺陷并逃脱肿瘤监视而致宫颈癌。

综上所述，高危型HPV感染患者宫颈管Th1/Th2亚群失衡，Th1向Th2漂移，且宫颈病变严重程度与Th1/Th2亚群失衡相关。