罗氏Cobas 8000 e602检测性激素6项的性能验证

张洪艳，王红英

江苏省苏州市吴江区儿童医院检验科,江苏苏州 215129

根据ISO15189 CNAS-CL03:2012《医学实验室质量和能力认可准则》的规定，在开展新的检测项目，更换检测系统或改变检测试剂盒厂商时，实验室需对其相关方法学分析性能进行验证，对厂商提供的评价资料主要性能进行确认，并每年定期对仪器进行性能验证[1]。

Cobas 8000检测系统为生化免疫分析一体的检测设备，具有高效的分析能力。本室采用罗氏Cobas 8000 e602电化学发光免疫分析仪进行性激素6项检测。为评估该检测系统是否满足临床诊疗的需求，本文按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)的标准及相关参考文献[2]对检测项目进行性能验证，包括正确度、精密度、参考区间、线性范围的验证。现将孕酮(PROG)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、泌乳素(PRL)及睾酮(T)的性能验证结果报道如下。

1 材料与方法

1.1标本来源 本院门诊、住院或健康体检者的新鲜血清，标本要求无溶血、脂血及黄疸。

1.2仪器与试剂 德国罗氏公司Cobas 8000 全自动免疫分析模组中e602电化学发光免疫分析模块。罗氏原装试剂PROG批号：45262154，E2批号：56325120，LH批号：26542527，FSH批号：56215201，PRL批号：22562542，T批号：25621058，用同时期配套罗氏质控品及校准品。

1.3方法

1.3.1仪器使用方法 按操作说明书的要求进行系统维护保养，室内质控在控，然后再进行验证实验。

1.3.2精密度验证 将正常水平质控、病理水平质控每天各检测3次，连续检测5 d，各得15个检测结果。收集实验数据，计算均值、标准差、变异系数(CV)。判断标准：批内精密度CV值<1/4允许总误差(TEa)，批间精密度CV值<1/3TEa(25%)，TEa为25%，为通过。

1.3.3正确度验证 用国家卫生健康委临床检验中心的室间质评物，5个水平，均测3次，收集实验数据，求均值后与室间质评的回报靶值比较计算其偏移[3]。判断标准：偏倚值<1/2TEa，TEa为25%，能力验证实验(PT)≥80%,表示正确度合格,为通过。

1.3.4线性范围验证 依据NCCLS EP6-A2对线性范围进行验证。选择足量的浓度尽量达到线性上限及线性下限的标本各1例，高值标本可用通用稀释液或低值标本稀释成系列不同浓度的评价标本；最好有6个或以上系列浓度的实验标本，数据点数不得低于5个，浓度范围遍布整个预期可报告范围。将高值标本(H)与低值标本(L)以L、1H∶4L、2H∶3L、3H∶2L、4H∶1L，H的体积比例混合，每个浓度重复检测3次，记录结果。尽量在同一批次内完成所有样品的检测，所有样品应当以随机的顺序进行检测。

以直接测定结果计算得出的相应浓度为Y，以通过稀释测定的结果为X，经回归方法学统计，得到R2值。评判标准：以预期浓度为Y，测定均值为X，进行线性回归，求得方程Y=aX+b。a在0.9～1.1且R2≥0.95，b接近于0，所有数据在范围内则线性范围通过验证。

1.3.5参考区间验证 收集20例健康人血清标本及时检测，要求其年龄、性别等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许10%的数据超过所验证的参考范围，否则需重新建立参考范围。检测前质量控制要求：(1)体检中心筛选合格候选个体；(2)标本无肉眼可见溶血；(3)乙型肝炎表面抗原阴性，且于到达实验室后立即检测。统计方式：通过率=测定结果在参考范围内的例数/总测定例数×100%，通过率≥90%为合格。

2 结 果

2.1精密度验证 精密度验证通过，见表1。

表1 批内、批间精密度验证结果

2.2正确度验证 正确度验证通过，见表2。

表2 正确度验证统计结果

2.3线性范围验证 线性范围验证通过，见表3。

2.4参考区间验证结果 所选20例体检健康者，检测结果有19例或20例在参考区间内，即95%以上的结果在参考区间内，参考区间的通过率在不同项目不同性别中均为100%，均符合≥90%的判断验证标准，该参考区间符合对健康人群的筛选，参考区间验证通过。

3 讨 论

检查性激素6项能够大致判断患者是否存在激素分泌异常，激素分泌异常可影响患者的生育能力、性生活能力。目前，在社会压力非常大的状态下，女性月经紊乱及不孕不育的患者数量呈明显上升趋势，故性激素6项检查显得尤为重要，而精确可靠的检查结果能够更好地满足临床医生对疾病的诊断和治疗要求。

检测系统的验证项目通常包括正确度、精密度、线性范围、参考区间等性能指标。本研究结果表明，本实验室的各项指标性能均验证通过，说明本实验室性激素6项检测项目能为临床提供准确的检测结果。据相关要求，医学实验室每年必须对所有检测项目进行1次验证，以保证检测结果的准确性。在实际工作中，本实验室已对目前所开展的18个电化学发光检测项目进行验证，以保证检测结果达到质量目标要求。

精密度是在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度，以不精密度来间接表示，体现随机误差。本实验中各项批内精密度及批间精密度均符合公认的质量标准要求[4-5]，能够满足临床需求。

正确度是待测物的测定值与其真值的一致性程度，以偏倚来反映。笔者利用国家卫生健康委临床检验中心的室间质评物测量，将实验数据均值与室间质评的回报靶值比较计算其偏移。结果显示，本实验室性激素6项正确度均符合要求。

线性范围就是同时检测待检项目上下限之间的不同浓度，看是否成线性关系，从而保证在该浓度范围内检测结果的准确性。以上线性范围的验证可见，回归方程a值均在0.9～1.1，且R2≥0.95,表明本仪器线性范围良好，在线性范围内的检测结果准确可靠。不足之处在于，验证过程中缺乏极限的浓度要求，所以以后工作中仍需定期评审。

参考区间是指依据所有参考值的分布特性及临床使用要求，选择合适的统计学方法进行归纳分析后确定的限值，包括参考上限和参考下限，90%以上的健康人群检测结果在参考区间范围内，说明该参考区间符合对健康人群的筛选[6]。本研究中，参考区间验证均通过，说明本实验室的参考区间适用于健康人群筛查，符合临床要求。

综上所述，本实验室罗氏Cobas 8000 e602电化学发光免疫分析仪检测性激素6项的性能验证均能达到相关的标准，能够满足临床诊断和治疗的需求[7]。