2397例不同产前诊断指征的羊水细胞染色体核型分析

黄如纯，皮回春，吴曼祯，高玉山，吴丽萍

（深圳市龙岗区妇幼保健院 产前诊断中心，广东 深圳 518172）

0 引言

染色体核型出现异常会导致出现染色体疾病，在我国新生儿中发生率约0.5%～0.7%[1]，是一种较为常见的遗传学疾病，可导致流产、死胎或结构、功能异常等，当前对于该疾病的治疗并没有彻底治愈的方式，孕妇年龄结合NT、血清学筛查、NIPT及胎儿超声检查是常见的产前筛查方法，羊膜腔穿刺术是一种较为常见的产前诊断技术，目前进行产前诊断胎儿染色体异常的金标准为羊水细胞胎儿染色体核型分析[2]。本文总结了不同产前诊断指征在我中心行羊水细胞培养的2397例孕妇的染色体核型结果，分析不同的产前诊断指征的孕妇羊水细胞染色体核型，研究产前诊断指征和胎儿染色体异常核型的关系。为产前筛查、产前诊断及产前咨询提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料。试验选取2016年1月至2019年12月之间在我院进行就诊的不同产前诊断指征孕妇作为试验对象，共计选取2397例孕妇，年龄17～46岁，怀孕时间16～31周。根据不同的产前诊断指征进行分组：单纯高龄组；血清学筛查高风险组；胎儿超声异常组；NIPT检测结果异常组；不良孕产史组（复发性流产史、死胎、畸胎引产史或生育过出生缺陷儿病史等）；夫妻一方为染色体异常携带者。参与实验所有产妇均没有介入行产前诊断禁忌证，并均知情统一且签订知情同意书。

1.2 方法。在超声引导下经腹抽取羊水20 mL，常规方法进行G显带染色体核型分析，每例标本采用Leica SL120 全自动核型扫描仪扫描100个分裂相，选择长短合适并且分散较为良好的核型计数20个，分析5个，嵌合体及异常核型加倍计数至100个。核型诊断标准依据2009年人类细胞遗传学国际命名体系（ISCN2009）。

1.3 统计学分析。运用SPSS 23.0统计软件进行统计学分析，采用卡方检验与Fisher精确概率法，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 染色体异常核型在不同产前诊断指征中的检出情况。2397例产前诊断的羊水标本中，产前诊断指征分布由高到低为：血清学筛查高风险（42.76%，1025/2397）、NIPT检测结果异常23.86%（572/2397）、超声检查异常15.56%（373/2397）、单纯高龄15.56%（304/2397）、不良生育史4.59%（110/2397）、夫妻一方染色体异常0.54%（13/2397），共检出染色体异常核型232例，检出率为9.65%。不同产前诊断指征的染色体异常核型检出率由高到低依次为：NIPT检测结果异常27.8%（159/572）、夫妻一方染色体异常15.38%（2/13）、胎儿超声异常5.36%（20/373）、血清学筛查高风险4.2%（43/1025）、不良生育史2.73%（3/110）、单纯高龄1.64%（5/304），对比分析各个组别之间的异常染色体检出率差异有统计学意义（χ2=257.03，P＜0.001）。

2.2 染色体异常核型分布情况。在232例异常染色体核型当中常染色体数目异常为119例，以21三体为主，占数目异常的40.95%（95/232），其中性染色体数目异常有56例，48，XXY，+21为1例，染色体非平衡性结构异常有31例，平衡性结构异常有8例，其中倒位3例，平衡易位4例，罗氏易位1例，嵌合体17例。染色体异常核型详细分布情况见表1。

表1 胎儿染色体异常类型与产前诊断指征分布

2.3 高龄孕妇染色体异常核型差异情况。单纯高龄的孕妇共304例，异常染色体核型5例，检出率为1.97%，高龄合并其他产前诊断指征共623例，异常染色体核型82例，检出率为13.2%，明显高于单纯高龄孕妇，两者检出率具有统计学意义（χ2=31.868，P＜0.001），见表2。

表2 单纯高龄及高龄合并其他产前诊断指征分组染色羊水染色体异常核型比较（n=927）

2.4 NIPT目标染色体检出率。NIPT目标疾病高风险进入介入性产前诊断共147例，NIPT示21三体高风险符合率为77.78%（63/81），NIPT示18三体高风险符合率为30.95%（13/42），NIPT示13三体高风险符合率为8.33%（2/24），见表3。

表3 147例孕妇NIPT目标疾病高风险与羊水细胞染色体诊断结果

2.5 染色体异常与胎儿超声异常分布情况。超声异常胎儿共373例，检出异常染色体20例，异常核型的发生率为5.36%（20/373），其中NT增厚196例，占比52.8%（196/373），检出异常染色体核型17例，10例21三体，2例18三体，3例性染色异常，2例非平衡性染色体异常，占胎儿超声异常中检测出异常染色体核型的85%（17/20）。

3 讨论

本研究中，产前诊断指征分布前三位为血清学筛查高风险组、NIPT检测结果异常组及胎儿超声异常，检出染色体异常核型232例，检出率为9.68%，高于近几年国内其他地区文献报道的检出率（5.93%～8.10%）[3-4]，可能与NIPT、超声异常阳性检出率高及各地区人群染色体异常的特异性有关。但NIPT技术筛查存在一定的假阳性率及假阴性率，本研究中，NIPT阳性孕妇进一步产前诊断符合率分别为21三体77.78%、18三体31%、13三体8.33%，低于国内文献报道[5]，这主要可能跟不同实验室以及检测机构质量控制水平差异以及研究样本有限有关。因此，NIPT检测作为一种被大众广泛接受的具有无创性、高准确性的产前筛查技术，已经成为筛查染色体异常胎儿的最有效的方法，但不能作为终止妊娠的依据，需进一步行介入性产前诊断以确诊。

在对2404例产妇当中，因为血清学筛查高风险而进行羊水产前诊断的患者有637例，总共检出22例异常核型，其异常率为3.45%，略低于文献报道4.4%～4.5%[6-7]，可能与深圳市推行NIPT的政策及部分孕妇直接选择NIPT检查有关。但22例异常核型中，8 例21三体，3例18三体，2例性染色体异常，3例非平衡性结构异常，1例倒位染色体核型，5例嵌合体。由此可见血清学筛查不仅能提示21三体及18三体，也能够提示其他异常的染色体，因此针对于血清学筛选高风险孕妇，建议直接进入介入性产前诊断。

伴随着当前我国的计划生育政策的放宽以及生育年龄的推迟，高龄孕妇比例逐年增高，根据我国的《母婴保健法实施办法》相关规定，对于高龄孕妇直接进行羊膜腔穿刺手术的产前诊断，本实验当中单纯高龄直接进入介入性产前诊断的孕妇染色体异常的检出率为1.64%，远远低于高龄合并其他产前诊断指征异常染色体核型检出率（13.16%），两者比较检出率具有统计学意义。因此，对于单纯高龄孕妇是否作为产前诊断独立指征尚待更多样本进一步考量，但对于高龄合并其他高危因素时应更加重视介入性产前诊断，对于胎儿染色体进行检查，及时的找出异常所在，避免染色体疾病患儿的出生。

在产前超声筛选是对胎儿遗传病进行检测的重要手段，其中超声异常的表现包含羊水过多或者过少、胎儿颈项透明层增厚、侧脑室有轻度的扩张、胎儿出现水肿、脉络丛囊肿、胎儿心室内强回声点等和胎儿染色体异常有关系[8-9]。本研究中，包括胎儿结构异常75例，超声软指标异常296例，异常核型的发生率为5.36%，其中NT增厚196例，检出异常染色体核型17例，占胎儿超声异常中检测出异常染色体核型的85%。所以NT增厚在进行早期筛查染色体异常的时候非常的中药，尤其是在染色体数目异常的筛选中具有重大的提示意义，可以作为胎儿染色体异常介入行产前的诊断的一个非常重要的超声筛查指标。

夫妇一方染色体异常是指夫妇一方为染色体异常携带者，可产生染色体遗传物质数量异常从而导致婚后不育、流产、死亡、畸形以及智力低下等等。本研究中，检测出2例平衡易位，均来源于母亲，检出率为15.38%，已足月分娩，目前生长发育良好。232例染色体核型异常病例中，2例易位型三体，7例衍生染色体，均考虑易位染色体导致，因此，对于夫妻一方染色体异常者应尽早行胎儿染色体核型分析，对于考虑易位染色体导致的胎儿染色体异常，因此建议夫妻双方进行进一步的染色体核型分析检查，评估再发风险。

综上所述，严格掌握产前诊断指征，对于不同的产前诊断指正的孕妇进行羊水细胞染色体核型分析，为临床医生在产前筛查、产前诊断及产前咨询中提供参考，对于降低染色体异常胎儿的出身具有非常重要的意义。