微生物送检标本在培养前进行涂片镜检的意义分析

蔡恒洋，曲轶，王桂焕

（东港市中心医院检验科，辽宁 丹东 118300）

急性、慢性下呼吸道感染、社区获得性感染及医院获得性感染等疾病均较为常见[1]，随着临床抗菌药物的广泛使用，疾病抗菌药物治疗的耐药性明显增高，为保证患者用药安全和疗效，国家相关部门加强对抗菌药物的合理管理，微生物检验逐渐引起临床高度重视，其检验的药敏结果可直接作为临床治疗感染性疾病的重要依据[2]，因此，检验结果的准确性和有效性直接关系临床医生用药的有效性和合理性[3]。微生物检验标本质量受较多因素影响，如微生物送检标本是否及时、有效检出，将直接影响药敏试验结果的准确性[4]。如何保证微生物送检标本质量，是标本进行药敏培养的关键环节。目前，有效的筛查送检前不合格标本是提高病原菌检出率的重要途径。涂片镜检通过送检标本制作薄片，进行革兰氏染色、显微镜下观察微生物形态，可早期诊断、鉴别细菌，判断标本是否合格，且准确鉴定细菌类型，在微生物送检标本培养前使用，可提升微生物标本送检的合格率和准确率，为临床医师有效用药和治疗提供重要依据[5]。基于此，本研究选取2019年1月至2019年6月本院采集的417份微生物送检标本作为研究对象，旨在探究微生物送检标本在培养前进行涂片镜检的临床意义，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料选取2019年1月至2019年6月本院采集的417份微生物送检标本作为研究对象。

1.2 仪器快速革兰氏染色液（珠海贝索生物技术有限公司），法国梅里埃VT2微生物鉴定系统。

1.3 方法涂片染色镜检：使用无菌棉签挑取痰液、分泌物及脓液标本，提取薄片，取5～8 mL新鲜尿液及其他标本置于无菌试管中，3 000 r/min离心30 min取尿沉渣制作涂片，涂片烘干后，进行革兰氏染色和镜检分析。

接种培养：使用一次性定量无菌接种环（1μL）挑取标本，痰液标本分别接种于血平板、巧克力平板、麦康凯平板、科马嘉平板上，对涂片检出菌株者加种沙保罗培养基，于35℃5%二氧化碳孵化箱中培养1～2 d[6]，采用BD公司Crystal微生物分析系统鉴定。

1.4 观察指标合格标本[7]及阳性结果判断[8]，痰液标本：鳞状上皮细胞≥10个低倍镜视野，外观脓性或血性，白细胞＜25个低倍镜视野表示合格；尿液标本：＜10个油镜视野，平均每个视野有＜1个细菌者表示标本合格；分泌物标本：无菌采集，涂片无鳞状上皮细胞表示标本合格。接种培养结果与涂片镜检符合，检出致病菌与涂片检出致病菌形态相符。

1.5 统计学方法采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析，计数资料用[n（%）]表示，比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 微生物送检标本分布结果417例标本中，痰液标本105份，尿液标本102份，分泌物标本167份，其他标本43份，见表1。

表1 微生物送检标本分布结果Table 1 Distribution results of microbiological specimens submitted for inspection

2.2 标本筛查合格率及不同类型标本阳性率比较不合格标本27份，不合格率6.47%，合格标本390份，合格率为93.53%，不同类型标本阳性率比较差异无统计学意义，见表2。

表2 标本筛查合格率及不同类型标本阳性率比较Table 2 Specimen screening qualification rate and comparison of positive rates of different types of specimens

2.3 合格标本涂片镜检与接种培养阳性符合率比较390例合格标本检出致病菌株阳性101份，占比25.90%，接种培养法检出致病菌株阳性117份。涂片镜检的痰液、尿液、分泌物及其他标本培养的阳性率与接种培养法比较差异无统计学意义，两种培养方法痰液、尿液、分泌物及其他标本阳性符合率分别为78.79%、87.50%、93.33%、86.67%，见表3。

表3 合格标本涂片镜检与接种培养阳性符合率比较Table 3 Comparison of positive coincidence rate of smear microscopy and inoculation culture of qualified specimens

3 讨论

对呼吸道感染医源性感染等疾病患者进行痰液培养及药敏感度试验培养具有重要的临床意义。痰标本培养质量关系细菌培养结果的准确性，而结果的准确性可为临床提供真实可靠的实验依据；同时，有助于临床评估患者病情，制定合理的治疗方案，避免经验性治疗或用药，可显著减少临床抗菌药物滥用，降低抗菌药物的耐药性，改善患者疾病治疗预后，节约有限的医药卫生资源[9]。

痰涂片镜检可保证标本质量，提高标本培养结果准确性。在微生物送检前对标本进行合格筛查，排除不合格标本，是细菌培养的重要依据。目前，国内大部分医院均未进行培养前涂片镜检筛查，而直接进行药敏或标本细菌培养，易影响结果的准确性，临床滥用抗生素，甚至错误的药敏试验结果将导致细菌耐药，疾病误诊或延误治疗病情的最佳时机。因此，在微生物送检前采用统一标准化试验，可避免假阴性，提升标本检查结果的精准度[10]。

本研究结果显示，对417例微生物标本进行涂片镜检，不合格标本27份，合格标本390分，合格率93.53%，其中痰液标本合格占比29.49%，尿液标本31.28%，分泌物标本30.77%，其他标本8.46%。根据涂片镜检结果，对合格标本进行镜检，发现均符合白细胞鳞状上皮细胞≥10个低倍镜视野，白细胞＜25个低倍镜视野，性状分析发现外观脓性或血性，未见唾液或口腔细菌黏液，培养结果均为正常菌群；在微生物标本涂片镜检时，能及时排除不合格标本，降低采集标本的错误率，提高检验结果的准确性和即时性，减少培养工作的误差，降低疾病漏误诊率[11]；同时，避免标本不合格可为临床诊治提供重要、准确的依据。对送检的微生物标本进行革兰氏染色分析，于显微镜下能直接观察微生物是否感染。在显微镜下初步筛查，鉴别细菌类型，选择药敏性纸片；早诊断、早筛查，判定合格的标本，并提示患者是否还需辅助其他项目检查，有利于细菌鉴定[12]。

对390例合格标本进行分析，进一步筛查阳性致病菌117份，涂片镜检阳性101份，不同类型微生物标本的阳性率比较差异均无统计学意义，涂片镜检与接种培养痰液、尿液、分泌物及其他标本符合率分别为78.79%、87.50%、93.33%、86.67%，均较高。对部分存在符合率误差的原因进行分析，可能因涂片制作薄片的材料不当，无法真实反映标本的真实性，或涂片太薄，也对标本真实性会产生一定影响。涂片进行革兰氏染色分析，染色后背景为红色，而阴性杆菌也为红色，因此，会增加漏检或误检率[13]。此外，部分细菌为不动杆菌，镜检下形态与革兰阴性相似，易发生混淆；此外，不排除标本接种造成的污染。为进一步提升和保证微生物标本检验的准确性，需采集更大的样本量，尽可能降低误差率。

综上所述，涂片镜检用于微生物送检标本前筛查，操作便捷，可提升微生物送检标本的合格率，提高标本检出的符合率和阳性率，具有重要的推广价值。