肝素抗凝剂对外周血淋巴细胞形态的影响

程凌利，朱大柱，谢荣伟，魏祥坤

(1.泉州市第一医院输血科，福建 泉州 362000；2.泉州市第910医院检验科，福建 泉州 362000)

肝素抗凝剂属于黏多糖硫酸酯类抗凝血药，主要从猪或者牛肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，肝素抗凝剂可阻止血液凝固，因此国际血液学标准化委员会常建议将肝素抗凝剂作为临床行血液学检查过程常用抗凝剂[1]。在日常进行血常规检测过程，常常会遇到自动血液分析仪对淋巴细胞抱紧的情况，提示存在凝血反应，这样会影响检验检验结果[2]。基于此，在本次研究中就进一步探讨了肝素抗凝剂对患者外周血淋巴细胞形态的影响，报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2020年1月-2020年9月门诊收治行血常规检查的123例患者为研究对象，其中男性71例，女性52例；年龄3～63岁，平均年龄(32.1±1.5)岁；成人73例，儿童50例。

1.2 仪器与试剂

检测仪器：日本Olympus-CX21型双目光学显微镜。

试剂与耗材：肝素抗凝管(山东奥赛特医疗器械有限公司)、瑞姬染液(珠海贝索生物技术公司)、高级镜油(珠海贝索生物技术公司)、载玻片与推玻片(JIANG FAN)。

1.3 方法

所有患者现在未使用抗凝剂的情况下推片2张，之后置于装有肝素的血常规抗凝管中，分别将5min、15min、30min、60min、120min作为检测时间节点，将所有血液标本均放置到室温环境下，在检测的时候推片2张，做干燥、固定及染色处理。血片均是由2名从事血液形态学检验的技师遵循相关规范进行操作。在进行检查的时候可先在低倍镜下进行观察，之后借助油镜做白细胞分类计数，分类200个白细胞，特别需注意观察外周血淋巴细胞形态。

1.4 统计学分析

2 结果

在血液检测情况上，成人患者检测各项指标均低于儿童(P<0.05)，成人经肝素抗凝120min后外周血淋巴细胞同未抗凝时比较差异有统计学意义(P<0.05)，儿童经肝素抗凝剂60min、120min后外周血淋巴细胞比例同未抗凝时比较差异有统计学意义(P<0.05)，详见表1。外周血淋巴细胞形态上，儿童与成人细胞形态均以Ⅱ型(不规则型/单核细胞样)为主，Ⅰ型(泡沫型/浆细胞样)、Ⅲ型(未成熟型/幼稚型)比较少见。见表1。

表1 血标本放置时间不同的外周血淋巴细胞检测结果

3 讨论

外周血淋巴细胞在受到病毒与药物等应激源的作用下，常常会出现应激反应及细胞形态学改变，比如原始细胞及细胞幼稚化、细胞体积增大、细胞核体积增大、细胞胞质增多、细胞颜色加深、细胞核不规则、细胞丝状分裂等，此类细胞多被称作为异型淋巴细胞[3]。正常的群体中，外周血中有一定量的异型淋巴细胞，含量占比多在2%内，若异型淋巴细胞大于10%常提示诊断意义突出[4]。相关研究表明，外周血异型淋巴细胞同多种病毒感染存在密切联系，如EB病毒、巨细胞病毒、腺病毒及自身免疫系统疾病等，因此对外周血异型淋巴细胞进行检测对病毒或者相关感染疾病的诊断具有重要意义[5]。

既往的研究中，针对外周血白细胞均未应用抗凝剂就直接分类进行染色，因此并不存在抗凝剂对淋巴细胞的影响。而近年来随着检验技术的发展，多种类型的抗凝剂应用使得传统血液检验方式发生了明显改变[6]。而因为采血到接受临床检验的时间较长，并且标本送至检验科室的时间往往较长，这样常存在检验结果同实际情况不符的问题，分析原因主要是随着时间的增加常出现凝血情况，因此为保证检测结果，常提倡应用抗凝剂[7]。在血液检验中，常用抗凝剂主要为肝素抗凝剂，该抗凝剂的作用机制比较复杂，具体通过同抗凝血酶进行结合，增强抗凝血酶对凝血因子的抑制作用，阻止血小板凝集及防止凝血活酶形成，发挥抗凝的作用。在本次研究中，观察对行血液检验的患者，采取肝素抗凝剂对外周血淋巴细胞形态的影响，结果显示儿童与成人患者在抗凝120min后的外周血淋巴细胞较无抗凝剂检测提高，其中儿童在60min也提高，如此提示对行血液检验的患者，使用肝素抗凝剂后，应尽可能在60min内完成检测。在加用肝素抗凝剂后，外周血淋巴细胞的形态多是以Ⅱ型(不规则型/单核细胞样)为主，这与相关研究结果一致[8]。综合上述相关的探讨及对研究结果的总结，对临床行血液检验的患者需注意以下几点因素：第一，送往检验科室的血常规标本需尽快完成检测，尤其是对儿科标本需先行检测；第二，若全自动血液分析仪存在异型淋巴细胞报警，应在推片后手工镜检；第三，镜检的时候若遇到淋巴细胞大于10%应采取经使用抗凝剂的外周血推片后进行复检，确保检测结果的准确性。

综上所述，针对临床中行血液检验的患者可应用肝素抗凝剂，且加用抗凝剂后续尽快完成检查，保证检测质量。