人参-黄芪对衰老大鼠的抗衰老作用及其抗氧化作用机制研究

程波敏，吴海滨，宋晓容，林基伟，李博涵，朱艳萍，刘卓超

(深圳市中医院治未病中心,广东 深圳 518000)

衰老是一种自然的生命现象，以机体各部分组织和器官的功能活动逐渐衰退为特征。中医延年学说对人体衰老或早衰的认识源远流长，以气血津液学说最为经典，气为生命之源，衰老中医所谓“气虚”，即原气不足，脏腑机能逐渐减退的虚弱症候临床常用补益剂延年益寿[1]。现代研究认为衰老是一个内外多种因素(基因、环境和精神心里等)共同作用的综合结果[2]。氧化自由基学说是目前比较公认的衰老原因之一，过量自由基导致细胞功能严重受损以至衰老、死亡[3]，提示抗氧化干预很可能是抗衰老的一个重要靶点。

《神农本草经》中记载：“人参主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目开心益智，久服轻身延年。”人参有抗衰老、抗肿瘤、增强免疫力、益智、调节血管血液系统等作用[1]。研究显示从人参茎叶中提取的人参皂苷(Rb1、Rb2、Rc、Rg1、Rg2等)能不同程度的清除氧自由基，其中Rb1和Rg1被证实作用最强[4]。黄芪最早见于《五十二病方》，复载于《神农本草经》，有“补气”之功；黄芪味甘，具有补气固表、利尿、托毒排脓，生肌之功。其活性成分黄芪甲苷[5]具有抗衰老、抗炎、免疫调节、抗氧化、抗纤维化等作用[6]。综上所述，本研究在衰老大鼠模型上探讨人参-黄芪的抗衰老作用及其发挥抗氧化作用的机制。

1 资料与方法

1.1 实验动物

3月龄SPF级SD雄性大鼠50只由实验动物中也提供，体重分别为300-350g/只。50只大鼠分为5组：对照组、模型组、人参组、黄芪组、人参黄芪组，大鼠在实验动物中心SPF环境下适应性喂养1周后用于试验研究，室温20-25℃，湿度40-60%，定期紫外灯消毒。

在模型组、人参组、黄芪组、人参黄芪组大鼠后肢外侧皮下部位连续注射D-半乳糖，注射剂量为0.125g/kg*d，注射时间为每天上午9∶00-1∶00，连续注射40d。

50只大鼠均在自由摄食、饮水，标准条件下饲养40d。

1.2 干预方式

每日腹腔注射给予黄芪组大鼠200mg/kg黄芪多糖，人参组大鼠40mg/kg人参总皂苷,人参黄芪组大鼠200mg/kg黄芪多糖及40mg/kg人参总皂苷,同时给予正常组和模型组大鼠等量生理盐水，连续注射8周。

1.3 观察指标

1.3.1大鼠外观

研究期间观察大鼠毛色、行动、精神状况等。

1.3.2血清SOD活力、MDA含量检测

大鼠腹腔注射水合氯醛麻醉后从腹主动脉取血，血液立即离也(3500r/min)10min，吸取上清液，操作按试剂盒说明书进行SOD及MDA活力检测。实验中所用手术器械经高压蒸汽消毒，操作遵循无菌原则。

1.4 统计学方法

采用SPSS20.0统计软件进行统计分析。数据以均数±标准差表示，采用t检验或单因素方差分析，组间比较采用LSD法和Bonferroni法；方差不齐时采用近似F检验。对不服从正态分布的实验数据采用中位数表示，采用秩和检验进行比较。

2 结果

2.1 大鼠外观

如图1与正常大鼠相比，通过人工D-gal诱导致衰老的大鼠表现为毛色暗黄，行动迟缓。

图1 正常大鼠(左)与衰老大鼠(右)的外观比较

2.2 大鼠血清SOD指标检测

如图2大鼠经衰老诱导后，血清中SOD活性显著低于对照组大鼠；但以人参或黄芪处理后，相对于衰老模型组，SOD活性显著提高。这一结果表明，实验诱导的衰老能显著降低大鼠血清中的SOD活性，而人参与黄芪能提高SOD活性。

图2 正常大鼠与衰老大鼠经人参与黄芪处理后的血清SOD活性比较

2.3 大鼠血清MDA指标检测

如图3大鼠经衰老诱导后，血清中MDA含量显著高于对照组大鼠；但以人参或黄芪处理后，相对于衰老模型组，MDA含量显著降低。这一结果表明，实验诱导的衰老能显著提高大鼠血清中的MDA含量，而人参与黄芪能降低血清MDA含量。

图3 正常大鼠与衰老大鼠经人参与黄芪处理后的血清SOD活性比较

3 讨论

本实验研究结果显示，人参和黄芪处理后，SOD和MDA活性提高，人参-黄芪联合应用后，相对于衰老模型组，SOD和MDA活性显著提高，表明人参黄芪联用具有更好的抗衰老作用。与既往研究结果相一致。国外学者[7]观察到人参二醇尤其是人参皂苷Rb2通过诱导SOD和CAT基因表达能从基因水平逆转氧化酶调控，发挥抗氧化的关键作用；黄芪与人参作用相似，同样能够通过提高抗氧化酶活性发挥抗衰老的作用[8]。刘莎等[9]的研究表明，黄芪能清除体内自由基，提高细胞的抗氧化能力，调节免疫功能，调节内分泌系统，延长细胞寿命，从而延缓衰老。

综上所述，单独应用人参或黄芪可提高衰老大鼠抗氧化能力，但联合应用效果更佳，具有更好的抗衰老作用。