莫小政
(大化瑶族自治县六也乡水产畜牧兽医站,广西 大化 530800)
罗非鱼为我国最具市场竞争力的水产养殖品种之一。但随着大面积的生产养殖,罗非鱼的各种疾病逐渐增多,严重威胁着罗非鱼产业的健康持续发展[1]。在鱼类养殖过程中,经常使用抗生素来治疗细菌性疾病,但随之而来的耐药菌株的产生、畜产品残留、耐药谱广等问题,使抗生素逐渐退出在此行业中的应用。近年来,研究者开发出各种替代抗生素的产品,其中,中草药得到广泛的关注,并取得一定的效果。研究表明,中草药可以提高鱼类的生长性能、抗氧化力、免疫功能、肌肉品质,并具有低毒、高效、低残留等优点[2-6]。现以罗非鱼为研究对象,探讨在其日粮中添加不同剂量的中草药对其免疫性能的影响,以期为中草药在罗非鱼养殖生产中的应用提供一定的理论依据,使中草药合理地替代抗生素应用到鱼类的养殖中提供试验依据。
所用的中草药主要是由鱼腥草、黄芪、黄芩、金银花、板蓝根、大黄、连翘、甘草等组成,购买于当地的中草药市场,混合粉碎后加入饲料中使用。鱼为大化盛博渔业有限公司的吉富罗非鱼,其生长良好,无病、无伤。
试验选取200尾体质量为(6.45±0.05)g健康状态良好的罗非鱼,按照单因素随机分组原则分成4个处理组,每组5个重复,每个重复10尾。各组试验罗非鱼分别饲喂含有0、0.2%、0.4%和0.8%的中草药添加剂,其中未添加中草药组为对照组。对照组基础日粮原料组成和营养成分含量,见表1。
表1 对照组基础日粮原料组成和营养成分含量
采用静水养殖方式,将罗非鱼饲养在80 cm×60 cm×50 cm的养殖箱中。每日早晨定时清除箱内粪便,每日换水量为总水量的1/3。每日09:00和17:00投喂2次。饲养期间水温23~25℃,pH值为7.5,自然光照,水中 ρ(溶解氧)>5.2 mg/L。试验周期为8周。
罗非鱼测定免疫指标包括:血清溶菌酶、补体C3、补体C4、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A和免疫球蛋白G。测定所需试剂盒购自南京建成生物工程研究所,严格按照试剂盒说明书进行测定。
试验数据经Excel 2010进行初步整理统计后,再采用SPSS 24.0进行单因素的方差分析,并用Duncan’s法对组间数据进行多重比较,P<0.05作为显著性判断标准,结果用平均数和标准误呈现。
不同剂量中草药添加剂对罗非鱼免疫性能的影响见表2。由表2可见,不同剂量的中草药添加剂显著提高了罗非鱼的生长性能。其中,0.4%中草药组的补体C3含量较对照组显著提高30.76%(P<0.05),其余中草药组有提高C3含量的趋势,但未达到显著水平(P>0.05);0.4%中草药组的免疫球蛋白G含量比对照组显著提高18.14%(P<0.05),其余中草药组有提高免疫球蛋白G含量的趋势,但未达到显著水平(P>0.05);0.4%中草药组的溶菌酶活性比对照组显著提高9.56%(P<0.05)。不同剂量中草药对补体C4、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M含量未产生显著影响(P>0.05)。以上结果表明,在罗非鱼日粮中添加一定剂量的中草药具有提高免疫力的功能,且最适添加量为0.4%。
表2 不同剂量中草药添加剂对罗非鱼免疫性能的影响①
动物机体的免疫球蛋白含量直接反映机体免疫功能的强弱,补体和溶菌酶是机体内非特异性免疫蛋白。免疫球蛋白、补体、溶菌酶对于鱼类机体抵御外源微生物的入侵起着重要的作用,其含量和活性越高代表机体的免疫功能越强[7]。研究结果表明,0.4%中草药组的补体C3含量较对照组显著提高30.76%(P<0.05);免疫球蛋白G含量比对照组显著提高18.14%(P<0.05);溶菌酶活性比对照组显著提高9.56%(P<0.05)。在罗非鱼日粮中添加一定剂量的中草药有提高免疫力的功能,且最适添加量为0.4%。陈福艳等[8]研究酵母多糖-中药复合制剂对罗非鱼非特异性免疫的作用发现,0.2%的添加剂量显著提高了补体C3和C4含量。李鸣霄等[9]在饲料中添加0.1%~0.2%的刺五加超微粉显著提高了罗非鱼的补体C3含量和溶菌酶活性。该研究结果与上述研究结果类似,中草药提高罗非鱼免疫力可能与其含有丰富的有机酸、生物碱、黄酮、苷类等营养活性物质有关。
在试验条件下,在罗非鱼日粮中添加一定剂量的中草药可以提高罗非鱼的补体C3含量、免疫球蛋白G含量及溶菌酶活性,且最适添加量为0.4%。