骨关节置换术后切口感染的病原菌分布及血清TLR-4，MCP-1，IL-12的变化

何其濂 吕文强 张晓敏

(1.西安国际医学中心医院关节科，陕西 西安 710075；2.西安高新医院骨科，陕西 西安 710075)

股骨粗隆间骨折为临床中常见的骨折类型且好发于老年人群体，目前临床上针对该疾病最为有效的方式为人工关节置换术，假体周围感染是人工关节置换术后最严重的的并发症，若术后感染则需将假体全部取出，进行二次植入。近年来，随着无菌技术的进步，预防性抗生素的使用还有人工关节置换术技术的提高，国外文献[1]报告骨关节置换术发生术后感染率从10%～15%降至现在的2%～5%。目前临床上用来判断患者是否发生感染以及受感染的程度的指标中较为常见的为TLR-4、单核趋化蛋白(MCP-1)、白细胞介素(IL-12)，可通过其在患者体内的含量水平来判断患者是否受到感染以及受到感染的严重程度。本文主要探讨骨关节置换手术术后切口感染的病原菌分布及血清TLR-4，MCP-1，IL-12水平的变化意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年9月至2020年9月在我院接受骨关节置换手术后且术后并发生感染的40例患者作为观察组，其中男22例，女18例，年龄22～78岁，平均(56.8±9.4)岁，另选择同期在本院接受相同手术治疗且未发生术后感染的患者38例作为对照组，其中男20例，女18例，年龄18～76岁，平均(57.2±8.6)岁，包括髌骨关节置换36例，人工骨头置换23例，全膝表面置换18例。纳入患者均经X线检查明确确诊为骨关节炎、类风湿性关节炎、骨头坏死症、髋部骨折等疾病，且均为第1次实行人工关节置换术；患者临床信息资料完整，且知情同意。

1.2方法 收集观察组和对照组两组成员的临床病例资料，详细准确的记录所有受试成员的基础信息和一般资料，包括抗菌药物的使用、感染病史、年龄、肥胖、营养状况、类风湿关节炎、是否长期饮酒、是否长期服用激素等可能与术后发生感染所有相关性因素。

1.3观察指标 按照卫生部2001年《医院感染诊断标准》[2]进行诊断,主要指标：病原菌感染种类，TLR-4；MCP-1；IL-12指标水平。采用酶联免疫法(ELISA)检测MCP-1；IL-12的水平，ELISA试剂盒购自于上海笃马生物科技有限公司，采用流式细胞术测定血浆白细胞表面TLR-4浓度。抗人TLR4单克隆抗体购自Abcam公司，具体操作方法按照说明书进行。ELISA法操作步骤：清晨采集所有受试成员的肘静脉血5 mL，注入EDTA抗凝管中，离心10 min，转速为转速：2 000～3 000 r/min，分离血清与血浆；分装后保存在-20℃冰箱内待检；用酶标仪检测OD值并计算相应指标的浓度。流式细胞术的操作步骤：制备高活性的细胞悬液，加入50 μL(1∶20)(用DPBS稀释)灭活正常兔血清，在-4℃下储存30 min,洗涤后离心(1 000 r/min)5 min，弃去上清液，加入工作浓度的兔抗鼠荧光标记物50 μL，振摇充分后加1 mL固定液，即可检测。

2 结 果

2.1感染病原菌分布 观察组40例患者体内共分离出病原菌60株，其中包括革兰阳性菌34株(56.7%)，革兰阳性菌中以金黄色葡萄球菌为主，占33.3%，革兰阴性菌22株(36.7%)，革兰阴性菌中以铜绿假单胞菌为主，占20%，真菌占6.7%。见表1。

表1 病原菌分布和构成比

2.2IL-12、TLR-4；MCP-1的表达水平比较 感染组的IL-12、TLR-4；MCP-1水平均高于对照组(P<0.05)，观察组患者接受12周治疗后，三种指标水平均有明显下降。见表2。

表2 两组患者血液中IL-12、TLR-4、MCP-1表达水平的比较

2.3相关因素分析 结果显示，年龄、手术时间、合并症感染、高血压、糖尿病、长期服用激素类药物、肥胖、淤血阻滞、风寒湿痹是发生感染的影响因素(P<0.05)。见表3。

表3 骨关节置换术后切口感染的单因素分析

3 讨 论

目前临床上治疗老年骨关节炎的最佳方法为人工关节置换术[3]，然而，人工置换术易发生术后感染，本实验通过Logistic多因素回归分析发现，患者的年龄、基础疾病(糖尿病、高血压)、并发症感染个数、服用激素类药物以及一些中医证候均是发生术后感染的独立危险因素。由于患者多为老年人，老年人免疫力降低[4]，器官活动能力降低，容易被病原菌侵入，老年人活动能力下降，消化能力弱，营养补给不足，切口愈合慢，术后恢复缓慢，另外，手术时术野范围暴露在外，无菌条件不足时会增加病原菌与切口接触的机会，引发感染[5]。本文结果表明，感染的病原菌有革兰阳性菌占总比的56.7%，革兰阳性菌中以金黄色葡萄球菌为主(33.3%)，革兰阴性菌占总比的36.7%，革兰阴性菌中以铜绿假单胞菌为主(20%)，其他还有真菌类(6.7%)。

本文结果显示，观察组的外周血TLR-4，MCP-1，IL-12水平显著高于对照组，治疗后，观察组的这种指标水平均有明显下降趋势，TLR-4，MCP-1，IL-12的指标水平在机体发生炎症反应时会有明显变化，此外，TLR-4与机体炎性水平密切相关，当机体发生感染或遭受创伤时，TLR4可诱导炎性介质和炎性因子的释放，严重破坏机体的免疫平衡状态，因此联合检测这三种指标在炎症反应中的水平变化具有一定的临床价值[6-7]。通过实验中的Logistic多因素回归分析结果，对预防术后发生切口感染提出一些预防措施[8-10]：(1)实施人工关节置换的患者在手术前应做好充分的全身清洁工作，特别注意手术部位的皮肤清洁，防止手术过程中发生感染；(2)手术条件达到无菌要求；(3)尽量缩短手术时间，减少手术过程出血量；(4)患者及医护人员应做好术后护理工作。