乙型肝炎病毒感染相关肝纤维化程度与脂联素及Th17/Treg平衡的关系

董璐 薛焕利 何瑾瑜△ 曹雅静 杨跃青

(陕西省中医医院，(1.肝病科；(2.检验科，陕西 西安 710003)

临床研究[1-2]显示，乙型肝炎病毒(HBV)感染患者其临床结局与患者机体免疫机制密切相关，尤其对于T淋巴细胞，最为常见的为Th1/Th2细胞失衡学说。有研究[3]显示，脂联素具有着抑制肝纤维化的作用，但是目前仍缺乏脂联素与HBV感染肝纤维化相关性。本文主要探讨分析乙型肝炎病毒感染相关肝纤维化程度与脂联素及Th17/Treg平衡的关系。

1 资料与方法

1.1临床资料 选择2018年1月至12月我院收治的HBV感染患者127例，根据患者肝弹性值(LSM)将患者分为轻度组(LSM<9.7 kPa)55例、中度组(9.7 kPa≤LSM<17.5 kPa)41例、重度组(LSM≥17.5 kPa)31例。轻度组中，男30例、女25例，年龄(33.18±7.32)岁，病程(2.31±0.45)年，体重指数(20.83±3.15)kg/m2，有乙肝家族史者23例；中度组中，男24例、女17例，年龄(35.02±8.21)岁，病程(2.19±0.52)年，体重指数(21.25±2.37)kg/m2，有乙肝家族史者17例；重度组中，男17例、女14例，年龄(34.63±6.30)，病程(2.40±0.36)，体重指数(20.79±1.92)kg/m2，有乙肝家族史者13例。纳入患者均符合2015年《慢性乙型肝炎诊治指南》中乙肝诊断标准[4]；体重指数<28kg/m2；患者入组前未接受保肝治疗及免疫调节治疗且临床资料完整。已排除合并自身免疫性疾病；合并其他类型肝炎患者；合并肝癌、脂肪肝、酒精肝患者；有吸毒史患者；合并心、肾等重大器官疾病患者。各组患者临床资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。患者均知情同意。

1.2方法 采用美国贝克曼AU5800全自动生化分析仪检测患者肝功能指标，包括天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)。采用罗氏CobasTaqMan分析仪检测患者血清HBV-DNA载量，检测严格按照操作说明书进行，并将HBV-DNA载量换成对数后进行计算。患者入院后清晨抽取清晨空腹静脉血，分离血清置于-30℃冰箱内待测，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清脂联素水平，具体操作步骤按照试剂盒使用说明书进行。采用流式细胞仪技术检测患者外周血Th17、Treg表达率，并计算Th17/Treg比值。

1.3统计学方法 采用SPSS25.0统计学软件进行数据分析。正态计量数据用(Mean±SD)表示，计数资料采用例数或百分比表示，两组独立，正态，方差齐资料组间比较采用t检验；样本率的比较采用卡方检验或Fisher确切概率法；采用Pearson相关分析对相关性进行分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1HBV-DNA载量、肝功能指标及血清脂联素水平的比较 随着患者肝纤维化程度的增加，肝功能指标AST、ALT以及血清脂联素水平显著升高(F=33.128、26.394、17.323，P均<0.05)，各组患者HBV-DNA载量比较无显著差异(F=1.564，P>0.05)。见表1。

表1 各组HBV-DNA载量、肝功能指标及血清脂联素水平的比较

2.2Th17表达率、Treg表达率及Th17/Treg比值的比较 随着患者肝纤维化程度的增加，Th17表达率、Th17/Treg比值显著升高(F=7.382、13.420，P均<0.05)，而Treg表达率显著降低(F=10.294，P<0.05)。见表2。

表2 各组Th17表达率、Treg表达率及Th17/Treg比值的比较

2.3相关性分析 患者AST、ALT、脂联素、Th17以及Th17/Treg互为正相关关系(P<0.05)，Treg与AST、ALT、脂联素、Th17以及Th17/Treg水平均成显著负相关关系(P<0.05)，患者HBV-DNA载量与各指标均无显著相关性(P>0.05)。见表3。

表3 各指标相关性分析

3 讨 论

肝纤维化是由多种不同病因，包括各种病毒感染、乙醇以及寄生虫等造成肝脏慢性损伤，最终出现细胞外基质(ECM)合成增多而降解减少，从而造成肝内ECM过度沉积而引起肝纤维化病理改变[6-7]。肝纤维化进一步发展到第4期即为早期肝硬化，此时期增生的结缔组织包绕再生结节并分割残存肝小叶形成假小叶，但在此阶段病理过程仍是可逆的，因此对于HBV肝纤维化患者早期临床诊治具有着重要临床意义[8]。

脂联素是近些年来新发现的一种由体内脂肪细胞产生分泌的脂源性细胞因子，脂联素在血液循环中大量存在，并具有调节脂质代谢、增强胰岛素敏感性、抗动脉粥样硬化以及抑制炎症反应等多种效应，因此学者认为脂联素在肝纤维化进程中具有着重要作用[9]。本研究结果显示，随着肝纤维化程度的增加，患者脂联素水平显著升高(P<0.05)。与研究[10]结果相似。

Th17作为CD4+淋巴细胞亚群之一，可上调多种炎症细胞水平介导的炎症反应，在多种自身免疫性疾病发生发展进程中均发挥着重要作用[11]。而Treg作为T淋巴细胞的另一个亚群，当机体处于正常状态时，Treg可提高免疫耐受而改善机体免疫失衡[12]。本研究结果显示，随着患者肝纤维化程度的增加，Th17表达率、Th17/Treg比值显著升高(P<0.05)，而Treg表达率显著降低(P<0.05)。与报道[13]结果相似，提示免疫机制在HBV感染相关肝纤维化进程中发挥着重要作用。Th17主要通过IL-17发挥作用，进而激活HSC，加速肝纤维化进程并提高炎症程度，此外，Th17可使巨噬细胞在肝炎病灶处的聚集，从而加速了乙肝疾病进程的发展；而Treg可识别、抑制肿瘤细胞活化，同时调节免疫应激反应，有助于自身肝组织的保护。

本研究结果显示，患者AST、ALT、脂联素、Th17以及Th17/Treg互为正相关关系(P<0.05)，Treg与AST、ALT、脂联素、Th17以及Th17/Treg水平均成显著负相关关系(P<0.05)，患者HBV-DNA载量与各指标均无显著相关性(P>0.05)。提示脂联素以及Th17/Treg与患者肝纤维化进程以及肝功能变化密切相关，而与HBV病毒载量无关，且脂联素与Th17/Treg免疫平衡之间具有着一定的影响，其具体尚未明确，还有待进一步研究分析。

综上所述，HBV感染相关肝纤维化患者存在脂联素水平及Th17/Treg平衡异常现象，且随着患者肝纤维化程度的加重，脂联素水平明显升高且Th17/Treg失衡更为严重，且与其他肝功能指标存在一定相关性，可作为HBV感染相关肝纤维化疾病发生发展的潜在生物指标。