一起朱鹮雏鸟新城疫的诊治

侯 佳，徐光岚，张军风，刘文旺，雷颖虎，高更更

(秦岭大熊猫研究中心(陕西省珍稀野生动物救护基地)，西安 710402)

新城疫(Newcastle disease，ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)引起禽的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病，具有很高的发病率和病死率，是危害养禽业的一种主要传染病[1]。新城疫是我国规定的一类动物疫病，是世界动物卫生组织(OIE)规定必须报告的传染病[1-2]。新城疫(ND)可感染50个鸟目中27个目250种不同禽类，人也可感染新城疫，表现为结膜炎或类似流感临诊症状[3,4]。近年来，宿主范围有扩大的趋势，鹅、鸭等水禽也可感染发病[5]。

朱鹮(Nipponianippon)是中等体形的涉禽,隶属于鹈形目(Pelecaniformes)鹮科(Threskiornithidae),属国家一级重点保护野生动物；国际自然保护联盟(IUCN)物种红色名录濒危(EN)物种；濒危野生动植物种国际贸易公约(CITES)附录Ⅰ物种[6-7]。朱鹮感染新城疫偶有报道，但尚无治愈的案例报道。

2018年，陕西省珍稀野生动物救护基地(以下简称基地)，人工育雏过程中有10只朱鹮雏鸟相继死亡，经病理剖检和实验室病原检测为新城疫。剩余18只朱鹮雏鸟经检测12只新城疫阳性，后经抗NDV异源高免血清治疗和新城疫疫苗紧急免疫后，16只雏鸟成活。本次朱鹮雏鸟新城疫的诊治，为今后珍稀濒危鸟类新城疫治疗提供了参考方案。

1 临床症状、剖检变化及实验室检测

1.1 临床症状

此次新城疫发病过程，首先雏鸟出现食欲不良或废绝，或呕吐、精神沉郁，除2例便秘外，其余均有水样稀便及黄色粪便。从出现食欲不良到死亡，时间从数小时至2 d不等，大部分病程很短。死亡个体中仅有1例28日龄个体，死亡前出现角弓反张症状，8 h后死亡。

1.2 剖检变化

对其中3例朱鹮雏鸟尸体进行剖检，只有出现神经症状的1例个体病理变化最明显典型，其余2例非典型，具体剖检结果见表1。

表1 朱鹮雏鸟感染NDV后的临床症状及解剖结果

1.3 实验室检测

对16只雏鸟的口腔拭子、尸体1内脏组织、尸体3的内脏组织、脑组织分别进行了NDV、AIV(禽流感病毒通用)、H5(禽流感病毒H5亚型)和H9(禽流感病毒H9亚型)病原检测，检测结果见表2。AIV、H5、H9全部为阴性，除4只雏鸟NDV阴性外，其余样品NDV病原阳性。

表2 实验室NDV及AIV病原检测结果

1.4 尸体1病料细菌分离试验

无菌接种尸体1肠道、肝脏病料到细菌培养基中，进行细菌分离。结果分离到大量的大肠埃希氏菌及少量葡萄球菌和链球菌。对分离到的细菌采用药敏纸片法进行细菌药敏试验。

结果显示，对细菌生长呈现敏感抑制的抗生素为左氟沙星(抑菌环23.22 mm)、诺氟沙星(抑菌环21.06 mm)、环丙沙星(抑菌环23.42 mm)、头孢噻肟(抑菌环24.56 mm)。

2 防控及治疗

2.1 防控

根据传染病实验室NDV病原检测结果立即对朱鹮种群笼舍、饲养区、饲养人员的工服、胶鞋及周围环境进行持续1月的严密消毒，并对朱鹮种群进行紧急免疫。立即将所有人工育雏的朱鹮雏鸟全部转移，并安排固定饲养人员隔离饲养。采取严格措施，杜绝人员活动、器具、车辆将疾病传播给健康种群和园内其它禽类的可能性。对育雏室墙面、地面消毒后进行重新粉刷处理；对育雏室内的办公家具进行仔细消毒。对死亡朱鹮尸体进行无害化处理。

2.2 治疗

2.2.1 NDV高免血清的制备 选NDV免疫过的且在免疫期的SPF公鸡2只，无菌心脏采血法取血，10 000 r/min离心分离血清。按1 mL血清加入各1 000单位的青霉素和链霉素，置-20℃冷冻保存，备用。

2.2.2 治疗及紧急免疫 第一时间对出现症状(食欲不好)的雏鸟肌注NDV高免血清进行治疗，雏鸟日龄、体重、NDV高免血清使用剂量详见表3。对无症状(食欲正常)的雏鸟随机选取2只接种鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(La Sota株+F株)。在所有雏鸟的饲料中按0.1 g/(只*天)添加诺氟沙星，连用3 d。在NDV高免血清0.5 mL剂量组5 d后出现1例死亡个体后，该组剩余3只雏鸟再次肌注NDV高免血清1.0 mL。

表3 高免血清治疗感染NDV的朱鹮雏鸟情况

肌注NDV高免血清6日后分批次对无症状朱鹮雏鸟免疫接种鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗，雏鸟日龄、体重、接种剂量详见表4。

表4 朱鹮雏鸟接种鸡NDV、AI二联苗情况

在治疗过程中，后续孵化出2只朱鹮雏鸟在7日龄时进行了免疫接种。

2.3 治疗结果

2.3.1 朱鹮新城疫治疗结果 12只NDV检测阳性的朱鹮雏鸟，在经高免血清治疗和紧急免疫接种鸡NDV、AI二联苗治疗过程中死亡2只，其中1只雏鸟在高免血清治疗5 d后死亡，另1只是在免疫后次日死亡，剩余(感染NDV的)10只全部成活，治愈率83.3%。

2.3.2 复检 在最后1例朱鹮雏鸟死亡37 d(最后3只雏鸟接种免疫21 d)后，对人工育雏的16只朱鹮雏鸟，以及在大群中随机挑选的5只成鸟，采集了口腔、肛门拭子，送实验室进行NDV病原检测，检测结果1只朱鹮雏鸟阳性，其余均为阴性。随后对该雏鸟再次进行NDV免疫。

3个月后，再次对16只雏鸟及大群中随机挑选的24只朱鹮成鸟，采集口、肛拭子及血液，送实验室进行NDV病原检测及抗体水平检测。除有1只雏鸟NDV病原检测为阳性外，其余均为阴性。所有雏鸟及在大群中选的24只朱鹮成鸟NDV抗体水平全部合格，合格率均为100%，雏鸟组NDV抗体平均值(log2)6.4，抽检组NDV抗体平均值(log2)5.2，详见表5。

表5 NDV抗体检测结果

对16只雏鸟再次免疫2个月后，静脉采血进行NDV病原检测全部阴性。

3 讨论

此次朱鹮雏鸟感染NDV后，发病快，死亡率高，典型症状个体少，病死率达54.54%，因此实验室诊断尽早确定病原对控制病情极为关键。2001年范光丽等[8]对2例幼龄朱鹮感染新城疫死亡病例进行了系统的病理学观察，结果表明，朱鹮与禽类感染新城疫的病例变化基本一致。2003年，屈红丽等[9]报道了幼龄朱鹮感染新城疫后的防治情况；2007年，贾文孝等[10]、张军风等[11]同时报道了成年朱鹮新城疫与大肠埃希氏菌混合感染的诊治。在未使用高免血清及紧急免疫的情况下，抗病毒及抗菌药物治疗未获成功。

这次朱鹮雏鸟感染ND成功治愈尚属首次，治愈率83.3%，可为以后朱鹮等珍稀濒危鸟类防治ND提供参考借鉴经验。治疗过程中，由于朱鹮雏鸟生长发育十分迅速，不同日龄个体体重差异较大，因此在用高免血清治疗和紧急免疫接种鸡NDV、AI二联苗治疗过程中，应注意根据体重调整注射剂量。

在免疫接种后的复检过程中，2次出现个别阳性结果，且非同一只个体，提示NDV在感染群体内存活时间可达数月之久。因此，治愈群体在合群前一定要做好复检工作，防止带毒个体将病毒传播给健康种群。

由于陕西省处于候鸟迁徙的路线之上，因此应进一步对朱鹮NDV毒株分析监测，为珍稀鸟类防疫工作提供科学指导。