肺癌患者外周血循环肿瘤细胞检测结果分析

麦春平 唐慧妍 林丽湘

肇庆市第一人民医院肿瘤科，广东省肇庆市 526000

肺癌是临床最为常见的恶性肿瘤，好发于中老年群体，具有发病率高、致死率高的特点，存活者预后较差，是当前影响人类健康的主要恶性肿瘤[1]。近年来，随着人口老龄化以及生态环境污染加重、吸烟人群的增加，人群肺癌发病率逐年上升，并呈现出一定的年轻化趋势，肺癌防治形势异常严峻，因此加强对肺癌的早期检测，对改善患者预后具有重要的意义[2]。循环肿瘤细胞(CTC)于20世纪60年代末期首次在癌症患者体内被发现，是指因患者自身因素或受外界因素的影响，从原发性(或转移性)肿瘤病灶脱落至血中的肿瘤细胞[3]。研究表明，肺癌患者发生远处转移或复发的诱发因素较多，其中血液中CTC的出现是重要的原因之一[4]。为探讨肺癌患者外周血循环肿瘤细胞检测结果与患者临床特征、治疗效果以及预后的关系，本研究选取我院肿瘤科2016年7月至2017年12月收治的60例肺癌患者进行了检测分析，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年7月到2017年12月在我院肿瘤科接受治疗的肺癌患者60例为研究对象，其中男39例、女21例；年龄45～85岁，平均(64.15±5.16)岁；非小细胞肺癌患者41例、小细胞肺癌患者19例。纳入标准：(1)初诊为原发性肺部肿瘤患者，经细胞学或病理学确诊；(2)TNM分期Ⅰa 期～Ⅲa 期；(3)卡式评分(KPS)≥70分；(4)了解本研究基本情况，自愿参与并签署知情同意书。排除标准：(1)合并心、肝、肾等器官严重功能障碍；(2)伴发其他系统肿瘤；(3)合并自身免疫性疾病；(4)合并传染性疾病。

1.2 标本采集和处理 治疗前、治疗1个月后，采集患者清晨空腹肘静脉血5 mL，置于ACD抗凝管中，在48 h内完成CD45磁珠富集。经ASI液悬浮后，取细胞沉淀摇匀并加入至已包被的平衡otsPin玻片加样区，静置1 h，染色处理。显微镜下计数后，存储于-4℃的冰箱中。

1.3 光镜检查 光镜下，CTC呈圆形或椭圆形，细胞直径≥10 mm，细胞膜完整，PanCK染色阳性，细胞核浆比失常。镜下观察到CTC视为CTC阳性[5]。

1.4 疗效判定 化疗1个月后对患者进行CT检查，参照RECIST标准评定疗效。目标病灶全部消失至少4周以上为完全缓解(CR)；基线病灶长径总和缩小≥30%且持续至少4周为部分缓解(SR)；基线病灶长径总和增加≥20%或出现新病灶为疾病进展(PD)；基线病灶长径总和缩小但未达缓解(SR)或有增加但未达PD为疾病稳定(SD)[6]。

1.5 统计学处理 采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析。计数资料以%表示，比较采用χ2检验；对治疗前后肺癌患者CTC数量增减与疗效的关系进行Spearman秩相关分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 CTC阴性与阳性患者的性别、年龄等一般情况比较 60例肺癌患者中，CTC阳性41例，CTC阳性率为68.33%。CTC阳性患者和阴性患者的年龄、肿瘤最大直径和临床分期比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 CTC阴性与阳性患者的性别、年龄等一般情况比较 (n)

2.2 治疗前后患者CTC数量增减与疗效的关系 化疗1个月后，60例肺癌患者中CR患者5例、PR患者19例、PD患者28例、SD患者8例，将患者CTC数量变化与其疗效进行Spearman秩相关分析发现，患者的CTC数量变化与其疗效呈负相关(r=-0.412)。见表2。

表2 患者CTC数量变化与其疗效的Spearman秩相关分析

2.3 CTC阳性和阴性肺癌患者的生存情况比较 CTC阳性和阴性患者的1年生存率比较差异无统计学意义(P>0.05)，但CTC阳性患者的2年生存率显著低于阴性患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 CTC阳性和阴性肺癌患者的生存情况比较 (n)

3 讨 论

肺癌患者发病早期症状隐匿，确诊时往往已处于中晚期，已失去最佳手术治疗时机，但肺癌又是较早发生血性转移的肿瘤，对患者的健康和生命安全造成严重威胁。调查结果显示，肺癌患者的5年生存率仅为5%～15%，而晚期转移患者的5年生存率不足2%[7]。因此，加强对肺癌早期诊断的研究，寻找灵敏度、特异性高的早期诊断标志物，对改善肺癌患者的预后具有重要的临床意义。

CTC检测凭借其无创性、可重复等特点，近年来在肿瘤诊断、治疗、预后判断中的应用受到了临床的高度重视[8]。关于恶性肿瘤，有“种子和土壤”学说，即认为恶性肿瘤由不同的肿瘤细胞遗传背景亚群构成，不同的亚群的转移潜力存在差异，CTC进入循环系统后会跟随血液循环达到多个组织器官，独立完成远端转移[9]。影响肺癌远端转移的因素较多，如肺癌病灶的大小、临床分期等均是影响其远端转移的因素，其中外周血CTC数量的变化是最为重要的因素之一。李发凯等[10]报道，肺癌患者的预后受CTC的影响，如治疗前后的数量变化等与患者的预后密切相关。

张晓茜等[11]报道，年龄偏高、肿瘤最大径偏大、临床分期Ⅲ期和存在淋巴结转移者的肺癌患者术前CTC阳性率较高。本研究结果显示，肺癌患者的CTC阳性率为68.33%，CTC阳性患者和阴性患者的年龄、肿瘤最大直径和临床分期比较差异有统计学意义，与前述文献报道的结果相似。年龄偏高的肺癌患者，其抗肿瘤免疫功能相对较差，易于发生转移；而肿瘤最大径偏大、临床分期Ⅲ期和存在淋巴结转移均与肿瘤的侵袭能力有关，也是肺癌患者较易发生远端转移的重要原因。王文哲等[12]报道，肿瘤侵袭能力越高、患者免疫功能越弱，肺癌患者的外周血 CTC阳性率越高。本研究结果显示，化疗1个月后，肺癌患者的CTC数量发生了一定的变化，将患者CTC数量变化与其疗效进行Spearman秩相关分析发现，患者的CTC数量变化与其疗效呈负相关(r=-0.412)；CTC阳性和阴性患者的1年生存率比较差异无统计学意义，但CTC阳性患者的2年生存率显著低于阴性患者。结果提示，肺癌患者的CTC数量及变化与患者的临床特征、治疗效果以及预后均存在一定的关系，对临床治疗和判断患者预后具有一定的参考价值。