AP—4、EZH2基因表达量与子宫内膜癌病灶中细胞凋亡、上皮间质转化的相关性研究

季福水

摘 要：目的 研究AP-4、EZH2基因表達量与子宫内膜癌病灶中细胞凋亡、上皮间质转化的相关性。方法 回顾分析2017年1月～2018年1月在我院进行切除术治疗的35例子宫内膜癌患者临床资料，收集子宫内膜癌病灶和癌旁病灶适量，提取RNA后分别测定AP-4、EZH2基因表达量，进一步测定病灶中细胞凋亡、上皮间质转化基因的表达量。结果 子宫内膜癌病灶内AP-4、EZH2基因表达量高于癌旁病灶，差异有统计学意义（P<0.05）；子宫内膜癌病灶内SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表达量高于癌旁病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin的mRNA表达量低于癌旁病灶；AP-4高表达病灶内SRPX2、RLIP76的mRNA表达量高于低表达病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表达量低于AP-4低表达病灶；EZH2高表达病灶内ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表达量高于EZH2低表达病灶，α-catenin的mRNA表达量低于EZH2低表达病灶。结论 宫内膜癌病灶内AP-4、EZH2基因高表达量，可以抑制癌细胞凋亡、促进癌细胞上皮间质转化，值得临床予以重视和关注。

关键词：AP-4、EZH2基因；子宫内膜癌；细胞凋亡；上皮间质转化

中图分类号：R737.33 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.14.026

文章编号：1006-1959（2018）14-0092-03

Abstract：Objective To investigate the correlation between the expression of AP-4 and EZH2 gene and apoptosis and epithelial-mesenchymal transition in endometrial cancer.Methods The clinical data of 35 patients with endometrial cancer who underwent resection in our hospital from January 2017 to January 2018 were retrospectively analyzed.Endometrial cancer lesions and adjacent lesions were collected.After RNA extraction，AP-4 was determined.The expression level of EZH2 gene was further measured in the lesions and the expression level of epithelial-mesenchymal transition genes.Results The expression of AP-4 and EZH2 in endometrial cancer lesions was higher than that in adjacent lesions，and the difference was statistically significant（P<0.05）.The mRNA expression levels of SRPX2，RLIP76，ZEB1，SALL4，TET1，RANKL and N-cadherin in endometrial cancer lesions were higher than those in adjacent lesions，and the mRNA expression levels of Fat-1，ITLN-1，Caspase-3 and α-catenin were higher.The mRNA expression levels of Fat-1，ITLN-1，Caspase-3 and α-catenin were lower than those of adjacent lesions.The mRNA expression of SRPX2 and RLIP76 in AP-4 high expression lesions was higher than that of low expression lesions，Fat-1 and ITLN.-1，Caspase-3 mRNA expression was lower than AP-4 low expression lesion；EZH2 high expression lesions ZEB1，SALL4，TET1，RANKL，N-cadherin mRNA expression was higher than EZH2 low expression lesion，the mRNA expression level of α-catenin was lower than that of EZH2 low expression lesions.Conclusion The high expression levels of AP-4 and EZH2 in endometrial cancer lesions can inhibit cancer cell apoptosis and promote cancer cell epithelial-mesenchymal transition.It is worthy of clinical attention.

Key words：AP-4，EZH2 gene；Endometrial cancer；Apoptosis；Epithelial-mesenchymal transition

子宫内膜癌（endometrial cancer，EC）是临床女性常见的恶性肿瘤，与患者的生活习惯、非正规雌激素替代质量等因素相关[1]。尤其是今年来发病率不断升高，严重威胁患者的生命健康安全。病灶内细胞凋亡和上皮间质转化异常是子宫内膜癌的重要病理特点，临床研究其调节机制具有重要的作用，本文结合临床病例，分析子宫内膜癌病灶中AP-4、EZH2基因表达量的变化情况和相应的生物学作用，希望为临床子宫内膜癌的诊断、治疗提供一定的参考，为临床的治疗效果的监测提供判断依据。现报告如下：

1资料与方法

1.1一般资料 回顾分析2017年1月～2018年1月在天津市静海区医院进行切除术治疗的35例子宫内膜癌患者临床资料，本研究经过医院伦理委员会批准。年龄26～46岁，平均年龄（38.10±3.18）岁；绝经30例，未绝经16例；其中Ⅰ级9例，Ⅱ级15例，Ⅲ级11例。纳入标准：①均经分段诊刮术病理学确诊为子宫内膜癌；②患者自愿参加本研究，并签署知情同意书。排除标准：①病理证实合并有子宫内膜异位症或宫颈癌、卵巢癌等其他恶性肿瘤；②入院时有急性炎症的患者；③有精神、智力障碍，语言表达障碍者。

1.2研究方法

1.2.1标本采集 手术后留取子宫内膜癌病灶、癌旁病灶适量，用生理盐水清洗后冷冻于液氮中，于15～30 min后取出病灶样本，在-70 ℃超低温冰箱内长期保存[2]。

1.2.2基因表达量测量 取癌病灶、癌旁病灶样本适量，使用裂解液分离病灶内的RNA，使用试剂盒将RNA反转录为cDNA进行PCR反应，所用引物分别针对AP-4、SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin、，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin基因，依据PCR反应曲线即可计算出相应基因mRNA表达量[3]。

1.3观察指标 观察子宫内膜癌病灶内A、癌旁病灶AP-4、SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin、Fat-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin基因表达量。

1.4统计学方法 本次研究所有数据分析使用SPSS18.0统计软件包进行分析，计量资料采用（x±s）表示，两组间比较采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2结果

2.1子宫内膜癌病灶和癌旁病灶中AP-4、EZH2基因表达量 子宫内膜癌病灶内AP-4、EZH2基因表达量高于癌旁病灶，差异具有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2子宫内膜癌病灶细胞凋亡基因表达量与AP-4的相关性 子宫内膜癌病灶内SRPX2、RLIP76的mRNA表达量高于癌旁病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表达量低于癌旁病灶，见表2。AP-4高表达病灶内SRPX2、RLIP76的mRNA表达量高于低表达病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表达量低于AP-4低表达病灶，见表3。

2.3子宫内膜癌病灶中上皮间质转化基因表达量与EZH2的相关性 子宫内膜癌病灶内ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表达量高于癌旁病灶，α-catenin的mRNA表达量低于癌旁病灶，见表4。EZH2高表达病灶内ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表达量高于EZH2低表达病灶，α-catenin的mRNA表达量低于EZH2低表达病灶，见表5。

3讨论

随着子宫内膜癌发病率的不断提高，临床对其有效治疗方法越来越受重视。但是临床缺少有效的治疗手段，加之疾病的发病机制不完全明确，临床治疗难度较大[4]。为了有效的治疗子宫内膜癌，临床研究其基因表达量与细胞凋亡、上皮间质转化的相关性，希望使临床治疗更具有针对性。

已有研究结果显示，子宫内膜癌细胞中AP-4和EZH2的表达分别能够诱导细胞凋亡、抑制细胞上皮间质转化，但关于子宫内膜癌病灶内AP-4和EZH2表达量的变化以及相应的生物学效应仍未明确[5]。本文通过研究显示，子宫内膜癌病灶内AP-4、EZH2基因表达量高于癌旁病灶。由此表明高表达量的AP-4、EZH2与子宫内膜癌的发生密切相关，且可能参与了细胞增殖、凋亡等过程，以调控子宫内膜癌的发生。AP-4是参与细胞凋亡和增值的调控分子，而子宫内膜癌细胞增殖和凋亡与多种凋亡基因的表达量相关。子宫内膜癌病灶内SRPX2、RLIP76的mRNA表达量高于癌旁病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表达量低于癌旁病灶。同时AP-4高表达病灶内SRPX2、RLIP76的mRNA表达量高于低表达病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表达量低于AP-4低表达病灶。所以，子宫内膜癌病灶内AP-4高表达可以促进增殖基因的表达，抑制凋亡基因的表达，进一步促进肿瘤细胞的增殖，抑制肿瘤细胞的凋亡。而EZH2参与细胞上皮间质转化，是癌细胞转移、侵袭能力增强的重要病理变化。本文研究结果显示子宫内膜癌病灶内ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表达量高于癌旁病灶，α-catenin的mRNA表达量低于癌旁病灶。同时EZH2高表达病灶内ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表达量高于EZH2低表达病灶，α-catenin的mRNA表达量低于EZH2低表达病灶。所以，高表達的EZH2会增加间质转化基因的表达和抑制上皮型基因的表达，从而促进肿瘤细胞的上皮间质转化和侵袭。

总之，对于子宫内膜癌患者来说，病灶内AP-4、EZH2基因呈高表达量，且高表达量的AP-4会抑制癌细胞凋亡或促进癌细胞增殖，而高EZH2基因表达量会促进癌细胞上皮间质转化。

参考文献：

[1]别延红，李纳，吴又明，等.转录因子增强子结合蛋白-4基因沉默对子宫内膜癌细胞凋亡的影响[J].山东医药，2017，57（2）：5-9.

[2]Lv QY，Xie BY，Yang BY，et al.Increased TET1 Expression in Inflammatory Microenvironment of Hyperinsulinemia Enhances the Response of Endometrial Cancer to Estrogen by Epigenetic Modulation of GPER[J].J Cancer，2017，8（5）：894-902.

[3]王娟，马莉，陈静，等.RNA干扰抑制EZH2基因表达对子宫内膜癌细胞上皮-间质转化的影响[J].现代妇产科进展，2017，26（2）：99-103.

[4]Wang J，Liu Y，Wang L，et al.Clinical prognostic significanceand pro-metastatic activity of RANK RANKL via the AKT pathway in endometrial cancer[J].Oncotarget，2016，7（5）：5564-5575.

[5]Liu Y，Wang J，Ni T，et al.CCL20 mediates RANK RANKL-induced epithelial-mesenchymal transition in endometrial cancer cells[J].Oncotarget，2016，7（18）：25-39.

收稿日期：2018-5-7；修回日期：2018-5-17

编辑/王海静