樊玉萍 程雪绒 雷怀玉 郑 蕾 杨淑惠 赵朝阳
(咸阳市农业科学研究院,陕西咸阳 712034)
平菇(Pleurotus ostreatus)又称侧耳、北风菌,分类学上属真菌门、担子菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属[1],是栽培较广泛的一种食用菌。平菇营养丰富、味道鲜美,含有多种人体需要的多糖[2]、维生素、氨基酸,是一种低油脂、高蛋白的健康菌类,具有提高机体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、调节血糖等功效,深受消费者青睐,市场需求量也不断增加。
栽培平菇一般采用固体菌种接种栽培袋。固体菌种制种时间较长,从母种到栽培种的培养时间需要50~60 d,而液体菌种具有生产周期短、菌种纯度高、菌龄一致、萌发快、生产成本低等优点,在食用菌生产中具有广阔的应用前景[3-5]。随着食用菌工厂化生产的不断发展,固体菌种很难满足高效率生产对菌种的要求,液体菌种应用已成为必然的趋势。因此,筛选优良的平菇液体菌种培养基配方具有一定的现实意义。
笔者进行了平菇液体菌种培养基配方比较试验及液体菌种接种栽培袋出菇试验,以期为平菇液体菌种规模化应用提供理论依据。
(1)供试菌株:平菇615,引自天达食用菌研究所。
(2)培养材料:琼脂粉、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、葡萄糖、红糖、马铃薯、麸皮、玉米粉、棉籽壳、木屑。
(3)试剂、仪器及培养容器:上海博讯实业有限公司医疗设备厂YXQ-LS-50SII 立式压力蒸汽灭菌器、西安博奥仪器有限公司电子天平、上海博讯实业有限公司医疗设备厂SPX-150B-Z 生化培养箱、常州市瑞华仪器制造有限公司HY-5 A 调速振荡器、上海博讯实业有限公司医疗设备厂SW-CJ-1CU超净工作台。
培养容器:1 000 mL 三角瓶、聚乙烯袋(规格为15 cm×30 cm×0.004 cm)。
配方1:玉米粉5 g,麸皮25 g,红糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氢钾0.75 g,硫酸镁0.375 g,水+滤液500 mL;配方2:玉米粉10 g,麸皮20 g,红糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氢钾0.75 g,硫酸镁0.375 g,水+滤液500 mL;配方3:玉米粉15 g,麸皮15 g,红糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氢钾0.75 g,硫酸镁0.375 g,水+滤液500 mL;配方4:玉米粉20 g,麸皮10 g,红 糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氢钾0.75 g,硫酸镁0.375 g,水+滤液500 mL;配方5:玉米粉25 g,麸皮5 g,红糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氢钾0.75 g,硫酸镁0.375 g,水+滤液500 mL。
1.3.1 液体菌种培养及测定方法
锅中加入600 mL 水,水开后加麸皮,煮20 min,过滤,再加玉米粉煮5 min,4 层纱布过滤,滤液加其他辅料,再过滤,倒入量筒中添加水至500 mL。每个配方重复2 次,每个重复3 瓶,并于121 ℃高压灭菌30 min。
灭菌结束后,待培养液温度降至25 ℃以下时,于超净工作台上接种。每瓶接种1 cm2斜面菌种1块,在25 ℃,150 r/min条件下培养7 d。
每瓶培养液取样3次,分别测定菌球数量、菌球直径及菌丝体干重,取平均值。
菌球平均数量测定:培养7 d 后取菌液5 mL,并倒入培养皿内,统计菌球数。计算出1 mL菌液中菌球个数,并计算平均值。
菌球平均直径测定:随机取10 个菌球,排成一行,测定其直径,计算出单个菌球平均直径。
菌丝体干重测定:取100 mL 菌液离心,倒去上清液,菌丝体于60 ℃烘干至恒重,称重。
1.3.2 出菇试验及考察方法
栽培袋装料折干0.364 kg(配方:棉籽壳72%,木屑15%,麸皮10%,石灰3%,料含水量63.6%),于121 ℃高压灭菌2 h,冷却后接种。每袋接种量为25 mL,3 次重复,每个重复15 袋。接种后25 ℃恒温箱培养,观察记录菌丝生长状况和菌丝满袋时间。
当菌丝长满袋5~7 d 后,给予昼夜温差催蕾出菇。出菇温度18~24 ℃、空气相对湿度85%~95%。每袋出菇4潮。
菌丝满袋时间:从接种到菌丝满袋所用时间的平均值;
袋平均产量:称量4潮菇鲜重,计算平均值;
由表1 可以看出,配方3 和配方4 菌球大小均匀,菌球直径中等,菌球形状规则,配方3 菌球平均个数和菌丝体干重最高,菌球平均直径适中;配方1菌球平均直径最小,形状不规则,菌球表面有长刺,菌丝体干重最小;配方2菌球形状不规则,表面有长刺,菌球平均数量最少;配方5 菌球大小均匀,形状规则,菌球平均直径较小。
表1 供试液体菌种培养基中菌丝生长状况
图1 配方3培养的液体菌种
配方3 每毫升菌球平均个数为73.2,与其他配方差异显著;配方2、配方3 的菌球平均直径为2.19 mm、2.12 mm,与配方1、配方4、配方5 差异显著;配方3 菌丝体干重为1.57 g/100 mL,与其他配方差异显著。由此可见,从菌球平均个数及菌丝体干重考察,配方3 最佳,其次为配方4、配方5。因此,用配方3、配方4、配方5 培养的液体菌种接种栽培袋。
由表2 可知,配方3 液体菌种接种栽培袋的平均袋产量和生物转化率最高;配方5 液体菌种接种栽培袋的菌丝满袋时间最短,平均袋产量及生物转化率最低。
表2 3个配方培养的液体菌种接种栽培袋试验结果
配方3、配方4液体菌种接种栽培袋的菌丝满袋时间与配方5 差异显著;配方3 液体菌种接种栽培袋的平均产量最高,为0.512 g/袋、生物转化率也最高,为140.7%,与配方4、配方5差异显著。
配方3 培养的平菇液体菌种接种栽培袋效果最佳。
试验结果表明:平菇615 菌株液体菌种最佳培养基配方为配方3,菌球数量多,菌丝体干重高,菌球大小均匀、形状规则。配方3 培养的液体菌种接入栽培袋,平菇产量及生物转化率最高。