温度对绿鳍马面鲀胚胎发育和孵化率的影响

邵鑫斌，张立宁，马建忠，单乐州

(浙江省海洋水产养殖研究所 浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室

温州市海洋生物遗传育种重点实验室，浙江 温州 325005)

绿鳍马面鲀(Thamnaconusseptentrionalis)隶属鲀形目、马面鲀属，俗称剥皮鱼、马面鱼等，广泛分布于我国东、黄海及朝鲜、日本沿岸[1]，也见于非洲东、南岸[2]。绿鳍马面鲀综合利用的程度很高，除鲜食外，还制成罐头、冷冻鱼片、鱼糜食品，经深加工制成美味烤鱼片畅销国内外，加工的鱼片是出口的水产品之一。绿鳍马面鲀是优良的养殖鱼类品种。近年来，绿鳍马面鲀胚胎发育、仔稚鱼的发育与生长、苗种系统繁育、工厂化养殖及形态特征与染色体核型分析都有研究报道[3-7]，其中王波[4]和关键等[8]分别详细描述了在18.7～19.2 ℃和21 ℃时该鱼胚胎发育过程，但没有研究温度对绿鳍马面鲀胚胎发育和孵化率的具体影响。本研究系统性探讨温度对该鱼胚胎发育和孵化率的影响，以促进绿鳍马面鲀苗种繁育技术的发展。

1 材料与方法

1.1 受精卵来源

2019年2月下旬开始，在本所下属洞头基地室内水泥池中强化培育的绿鳍马面鲀开始自然产卵，收集分离出受精卵用于苗种生产，从中取少量受精卵用于本次研究。产卵时盐度为22‰，水温20 ℃。

1.2 受精卵孵化方法

采用6个恒温水浴锅，温度分别设定为17、20、23、26和29 ℃，每个恒温水浴锅内放置6个装有1 000 ml沙滤海水的烧杯，将同样数量的受精卵直接放入各烧杯，使其分散沉底，各烧杯用玻璃管微充气，孵化过程中不换水。

1.3 孵化率记录方法

各烧杯放入100颗受精卵，持续观察孵化情况。各温度组中，当有半数以上的烧杯同时有鱼苗在孵化，记为该温度组的孵化时间。待孵化结束后，取出烧杯记录鱼苗数量。孵化期间不进行其他操作。

1.4 胚胎发育观察方法

各烧杯中放入200颗受精卵，前期每隔4～6 h、后期每隔12 h从烧杯中各取5颗受精卵用解剖镜观察发育情况，估算发育时间并记录存活率，胚胎发育阶段划分参照关键等[8]的研究。

1.5 数据处理

采用SPSS 19.0统计软件对相关数据进行方差分析和多重比较(LSD)，实际水温、胚胎各期存活率和孵化率采用平均值±标准差形式表示。

2 结果与分析

2.1 温度对孵化率和胚胎发育各阶段存活率的影响

29 ℃时，受精卵发育到神经胚期后全部死亡，该组孵化率为0；其余各组孵化率随温度升高而升高，26 ℃组孵化率最高，为(47.33±12.19)%；除29 ℃组外，各组间没有显著差异(表1)，但20 ℃组各平行间差异最小，表示该温度孵化最稳定；胚胎发育到神经胚期时，23 ℃组胚胎存活率最高，各组间没有显著差异；在之后发育到出膜前，仅29 ℃组因发育中止而与其余组差异显著，而此阶段存活率最高的是26 ℃组。表明温度主要影响神经胚期以后的胚胎发育。

表1 不同水温下绿鳍马面鲀胚胎发育各阶段的存活率和孵化率

2.2 温度对胚胎发育和孵化时间的影响

本次研究中，开始实验时的受精卵都处于囊胚期，距产卵高峰期约为6 h，其后，各阶段胚胎发育速度随温度升高而明显加快，孵化历时明显缩短(表2)；积温的总体趋势也在下降，但在20～23 ℃时保持相对稳定。

表2 不同水温下绿鳍马面鲀胚胎发育各阶段历时、孵化历时和积温

3 讨论

温度对绿鳍马面鲀胚胎发育和孵化率都有一定的影响。各阶段胚胎发育速度随温度升高而明显加快，当温度达到29 ℃时，胚胎发育到神经胚期后停止，表明神经胚期后的胚胎发育对温度更敏感。在17～26 ℃的水温区间内，绿鳍马面鲀都能孵化，假如以孵化率50%以上为判断胚胎发育适温区的标准[9]，26 ℃时绿鳍马面鲀孵化率最接近50%，应为其最适孵化温度。但是，在本次研究中20 ℃组各平行间差异最小，孵化最稳定，同时各组孵化率也没有统计学上的差异，而且自然情况下绿鳍马面鲀在春末夏初产卵，水温15～21 ℃。再者，从孵化历时与积温看，20 ℃组与23 ℃组相差不大，因此，20～23 ℃为绿鳍马面鲀胚胎发育适温区，略高于王波等[4]认为绿鳍马面鲀的最适孵化温度17～21 ℃。赵传絪等[10]研究水温17 ℃时，历时77～98 h孵化，关键等[8]的研究在(21.0±0.5)℃水温中历时50 h孵化，与本研究基本一致。