广西南宁地区健康成年男性血清CYFRA21-1参考区间的建立

王芃，叶玉萍，甘敏，张林波，林发全

（1.广西医科大学第一附属医院体检中心，广西 南宁530021；2.广西医科大学第一附属医院检验科，广西 南宁530021）

肺癌是一种临床常见的恶性肿瘤,以非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung cancer,NSCLC)为主[1]。CYFRA21-1为细胞角蛋白19片段，主要用于非小细胞肺癌患者的筛查及预后评估[2,3]。为了建立本地区健康成年男性的血清CYFRA21-1参考区间，本研究收集了4441例广西南宁地区健康成年男性体检者的血清标本进行检测分析，报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2017年1月至2018年1月于广西医科大学第一附属医院进行健康体检的成年男性4516例，年龄为20～89岁，平均年龄为43±12岁，主要为机关事业单位工作人员及企业职工，均为南宁地区常住居民。依照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)的建议，本研究建立了排除标准：⑴有滥用药物、毒品者；⑵有免疫缺陷病史者；⑶体检前1d饮酒者；⑷当前用药者；⑸体检前4周内进行过大手术者；⑹有肿瘤病史者；⑺肝功能、肾功能结果异常者；⑻胸部平片检查结果异常者。经筛选,最终共纳入4441例健康成年男性。

1.2 标本采集 早上空腹采集静脉血于干燥管，标本3000r/min离心10min后上机检测，检测过程均按照标准操作流程进行。

1.3 检测仪器和方法 采用瑞士罗氏Cobas e602全自动电化学分析仪及其相应配套试剂、校准品和质控品，检测血清中CYFRA21-1水平。

1.4 统计学分析 采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析。正态性检验采用Kolmogorov-Smirnov检验。经检验所有计量资料不符合正态分布（P＜0.05）,因此,所有计量资料采用中位数、四分位数间距进行统计描述。用Kruskal-wallis H检验分析比较广西南宁地区健康成年男性不同年龄组血清CYFRA21-1的差别后,用Mann-Whitney U检验进行组间两两比较；Spearman相关分析判断血清CYFRA21-1与年龄的相关关系；P＜0.05为差异有统计学意义。根据美国临床实验室标准化委员会(CLSI)指南建立参考区间,使用D／R比值法剔除离群值,以非参数方法确定参考区间，从第0百分位数到第95百分位数所在的区间即为参考区间[4]。

2 结果

纳入4441例体检者，平均年龄为43±12岁。纳入人群的血清CYFRA21-1的分布频数见图1。为了做分层分析,客观反映广西南宁地区健康成年男性血清CYFRA21-1水平,将研究对象按年龄段分为6个组,分别为21～29岁,30～39岁,40～49岁，50～59岁，60～69岁与≥70岁6个年龄组。采用Kruskal-wallis H检验统计分析各年龄组血清CYFRA21-1差异,结果显示:各年龄组血清CYFR A21-1水平差异具有统计学意义(P<0.05),见图2，P<0.05。

图1 4441例健康成年男性CYFRA21-1的分布频数

图2 广西南宁地区健康成年男性不同年龄组血清CYFRA21-1水平的比较

采用Mann-Whitney U检验进行组间两两比较，除20～29岁与30～39岁年龄组外，其余各年龄组间均存在差异(P<0.05)。对广西南宁地区健康成年男性血清CYFRA21-1水平与年龄进行Spearman相关分析发现，血清CYFRA21-1水平与年龄呈正相关(r=0.185,P<0.05)。血清CYFRA21-1检测结果经Kolmogorov-Smirnov检验,不符合正态分布,应采用非参数方法建立参考区间,见表1。

血清CYFRA21-1水平年均增长量=(后10年CYFRA21-1均数－前10年CYFRA21-1均数)/10。由此可得,20～29岁、30～39岁、40～49岁、50～59岁、60～69岁组血清CYFRA21-1水平年均增长量分别为-0.004、0.017、0.023、0.021、0.043μg/L。

3 讨论

细胞角蛋白是存在于上皮细胞中的细胞骨架中间丝蛋白，其表达对特定的组织具有特异性。细胞角蛋白19片段可在低分化的鳞状上皮细胞中表达，在肺鳞癌组织中可大量表达[5]。当癌变的细胞溶解、坏死脱落时,癌细胞内的CYFRA21-1会大量释放进入血液循环[6]。研究发现血清CYFRA21-1水平可鉴别肺部疾病的严重程度，对非小肺癌的诊断以及病情变化的监测具有重要意义[7,8]，对于乳腺癌、子宫颈癌、直肠癌等的诊断与治疗也具有一定参考价值[9-11],是一个灵敏度极高的肿瘤标记物[12]。然而，血清CYFRA21-1水平受年龄、性别、饮食习惯和地域等因素的影响,不同厂家的试剂或不同的检测方法，其检测结果也有一定差异[13]。因此，各实验室需要建立适合本地区人群的血清CYFRA 21-1参考区间。

近年来,我国非小细胞肺癌发病患者人数不断上升，病理类型以鳞癌和腺癌为主，好发年龄集中在60岁～69岁，具有明显的性别、年龄差异性，以男性患者居多[14]。Zhao等[13]对9954例中国汉族人血清CYFRA21-1水平进行研究,其参考区间为0.00～4.47μg/L,与本研究中20～29岁、30～39岁、40～49岁年龄组确立的参考区间相似；本研究各年龄组参考区间均大于江苏地区健康人群建立的参考区间0.00～2.84μg/L[15]，也大于瑞士罗氏公司提供的参考区间0～3.30μg/L。健康人群血清CYFRA21-1水平存在差异与检测方法不同有关，可能与种族特征、所处地域、饮食特点和生活习惯等因素也有一定关系。本研究对广西南宁地区4441例健康成年男性血清CYFRA 21-1水平分年龄段进行了分析，发现其水平随着年龄的增长而升高，与年龄呈正相关(r=0.185,P<0.05)，与其他学者的研究结果一致[16,17]。本研究比较了不同年龄组血清CYFRA21-1水平的年均增长量,结果显示30岁以后,血清CYF RA21-1水平的增长速度随年龄的增长而加快，其中60～69岁年龄组血清CYFRA21-1水平的增长速度最快,每年平均增长0.043μg/L。

本研究存在一定局限性,参考区间的建立受到多种因素的影响,包括检测方法与地区人群抽样等。研究对象主要为机关事业单位工作人员及企业职工，文化水平和生活水平较高，有一定的保健意识，且每年定期体检，与从事体力劳动和其他行业的男性相比，常见疾病的构成情况可能不同。此外，≥70岁年龄组中的研究对象数量相对较少，对研究结果的准确性有一定影响。因此，本研究确立的健康成年男性血清CYFRA21-1水平的参考区间仅适用于广西南宁地区使用电化学发光免疫法检测的临床实验室。