杠板归水浸液对小白鼠生长性能、血液生化指标及脏器病变的影响

2021-03-01 09:15李华坤
现代畜牧兽医 2021年1期
关键词:灌胃小白鼠脏器

李华坤

(徐州生物工程职业技术学院,江苏 徐州 221006)

杠板归是蓼科蓼属植物,又名蛇倒退、刺犁头、刺蓼。杠板归性微寒、味酸,归肺、膀胱经,具有抗炎、抗病毒、止咳祛痰、保肝、抗肿瘤、抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性、抑制乙酰胆碱酯酶活性等药理作用,常用于泻痢、疔疮肿痛、蛇虫咬伤等症[1]。近年来,中药药源性肝损伤事件引起医药界、制药业、管理部门及公众的高度关注[2]。本试验以小白鼠为研究对象,通过研究杠板归对小白鼠的生长性能、血液生化指标、脏器病变等的影响,旨在为临床合理使用杠板归提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验动物为昆明小白鼠。杠板归全草来自广东揭阳。药敏试纸购自杭州滨和微生物试剂有限公司。

1.2 仪器与试剂

普通营养琼脂购自天津市英博生化试剂有限公司、SX-500高压灭菌锅购自日本TOMY公司、DRI-CHEM NX500iVC全自动干式生化分析仪购自北京安普生化科技有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 小白鼠饮水给药

将杠板归水浸液浓缩至1 g/mL药液。 根据半数致死量(LD50)分级法,无毒中药LD50>50 g/kg,把小白鼠最大给药量定为50 g/kg, 按照组间剂量比值为 1∶0.7设计3个剂量组,分别0.75、0.50、0.35 g。等浓度灌胃给药,给药容积分别为 0.75、0.50、0.35 mL。取雌、雄性小鼠6只,体重(15.0±0.1) g,随机分成3组,每组2只,雌、雄各1只。给药前小鼠禁食12 h,自由饮水。按剂量设计分别单次灌胃给予小鼠杠板归药液,给药后立即观察小白鼠活动状态变化。

健康清洁级小白鼠,选择雌、雄鼠各6只,体重在19~21 g,分为3组,雌5只为1组、雄5只为1组,其余2只为空白对照组。空白对照组小白鼠正常饮水喂料7周,其余2组停止饮水、正常喂料,每天用10%杠板归200 mL给小白鼠饮用,第2 d更换新的药物并计算出药物消耗剂量。大约每只老鼠饮用4mL/d,连续7周,观察小白鼠活动状态变化。对死亡的小鼠剖检观察脏器病变,对未死亡的小白鼠心脏采血,测定生化数值,未死亡小白鼠粪便采集做药敏试验,后将小白鼠致死观察脏器病变。

1.3.2 小白鼠血液生化指标定

灌胃杠板归7周的小白鼠称量体重,仰卧保定后用注射器进行心脏采血0.6 mL,将血液放入指型管中,10 000 r/min离心2 min,取上清液至另一指型管内在生化分析仪上测定。

1.3.3 药敏试验

采集灌胃杠板归7周的小鼠鲜粪0.4 g放入试管中,加入1 mL生理盐水浸泡,用玻璃棒捣碎,3 000 r/min离心3 min,取上清液作为药敏试验用菌液。用灭菌棉拭子蘸取制备好的菌液,涂布到培养基表面。用镊子将药敏片分别贴在各组培养基的表面,37 ℃温箱内培养24 h测定抑菌圈的大小。

2 结果与分析

2.1 半数致死量(LD50)

灌胃给药0.75 g的小鼠30 s左右全身抽搐死亡,灌胃给药0.50 g和0.35 g的小鼠无死亡。说明杠板归LD50在16~50 g/kg之间是小毒中药。

2.2 杠板归对小白鼠生长性能的影响(见表1)

表1 杠板归对小白鼠生长性能的影响Tab.1 The effect of Gangbangui on the growth performance of mice 单位:g

饲喂7周后,空白组2只和饮用杠板归10只小白鼠均未死亡,小鼠活动状态无差异、排粪尿、饮水吃料等均正常,每周体重平均增加2.7g左右。饲喂7周试验小白鼠期间小鼠活动状态无差异、运动灵活、排粪尿、饮水吃料等均正常。由表1可知,试验小白鼠平均每天增重0.4 g左右,对照组小白鼠增长重量比饮用杠板归小白鼠增长重量多,杠板归可能影响动物机体生长。

2.3 杠板归对小白鼠血液生化指标的影响(见表2)

由表2可知,使用杠板归的小白鼠血液中总蛋白、白蛋白、肌酐、碱性磷酸酶、总胆固醇、钙水平降低。

2.4 杠板归对小白鼠粪便药敏试验结果(见表3)

由表3可知,肠道菌对杠板归中介,对四环素、头孢噻肟、卡那霉素、氯霉素敏感,对苯唑西林耐药,说明杠板归不易产生耐药性。

表2 杠板归对小白鼠血液生化指标的影响Tab.2 The effect of Gangbangui on the blood biochemical indexes of mice

表3 杠板归对小白鼠粪便药敏试验结果Tab.3 Results of drug sensitivity test of Gangbangui to mice fecess

2.5 杠板归对小白鼠脏器病变的影响(见图1、表4)

由表4、图1可知,对照组小鼠剖检心脏、肾脏、肺等均无异常,饮用杠板归的小白鼠肝脏上有结节,其余脏器均正常。

表4 杠板归对小白鼠脏器病变的影响Tab.4 The effect of Gangbangui on the lesions of organs in mice

3 讨论

小鼠生长发育受饲料影响较大[3]。本试验结果表明,杠板归对小白鼠生长性能性能产生影响。景志忠等[4]采用4个不同营养标准的饲料配方,饲养繁殖昆明仔鼠,其增重规律为:在1~20、40~60日龄间仔鼠生长发育较慢,增生幅度较小;120~140日龄间生长发育较快,增重幅度较大;雄鼠增重速度快于雌鼠;营养与小鼠生长呈正相关,且在20~40日龄间,不同营养组间差异显著或极显著。

本研究结果显示,使用杠板归的小白鼠血液中总蛋白、白蛋白、碱性磷酸酶和肌酐含量异常,说明杠板归对肝脏有影响。中草药成分复杂,在临床中很少有病原菌对中草药产生耐药性,这也是临床上经常使用中草药防病治病的重要原因。中草药长期不规范使用才出现对肝脏的损伤,所以不易被人们认识到。中药药源性肝损伤的发生具有较大隐匿性,为临床常见的药物不良反应之一[5]。调查显示,中草药肝损伤病例中多数是由于病患不去正规医院就诊而滥用中草药所致。

中草药饲料添加剂对动物生产性能、免疫指标及肉品质均有影响。在饲粮中添加0.2%的中草药,不仅能够显著提高北京鸭的生长性能、屠宰性能以及机体免疫,还能改善鸭肉品质[6]。正确使用中草药使动物饲料的利用率、动物的繁殖性能、抗应激能力等都显著提高[7]。大量的中草药在养殖企业中应用,本试验了解到中草药不易产生耐药性的优点和潜在肝损害的缺点,为临床合理用药提供建议。

4 结论

杠板归LD50在16~50 g/kg之间是小毒中药,对小白鼠有一定毒性。

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