乙肝病毒血清学检验采用化学发光法与酶联免疫法的效果比照观察

刁颖

乙肝是由乙肝病毒感染导致的传染性疾病,部分患者无症状,典型表现为恶心、呕吐、食欲减退、黄疸、发热等症状［1］。乙肝病毒的传播途径较多,主要包括生活接触传播、输血传播、母婴传播等方式［2］。早期诊断并治疗干预对于控制病毒的传播、扩散并降低病毒感染的严重程度具有重要的意义。实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)是诊断乙肝的金标准,但由于时间长、费用高,并不是首选。目前临床主要采用酶联免疫法和化学发光法检测乙肝病毒,两种方法各有优缺点。本研究比照乙肝病毒血清学检验采用化学发光法与酶联免疫法的效果。

1 资料与方法

1.1一般资料 纳入本院2015年1月～2019年12月收治的5000例行婚前检查体检者。其中男2529例,女2471例；年龄20～42岁,平均年龄(36.4±5.8)岁。

1.2纳入及排除标准

1.2.1纳入标准 ①研究对象为临床体检者,病历完整。②签署本研究知情同意书。

1.2.2排除标准 ①合并血液系统疾病的患者。②合并恶性肿瘤疾病的患者。③合并严重精神障碍性疾病的患者。④妊娠期或哺乳期女性患者。⑤中途因个人原因退出的患者。

1.3方法 采集体检者的静脉血液标本,同时采用酶联免疫法检验和化学发光法检验检测乙肝标志物。抽血前1 d晚上禁食,抽取空腹静脉血5 ml,经差速离心后分离血清用于检测。①酶联免疫法检验的具体操作为：根据酶联免疫吸附测定试剂盒(上海科华生物工程股份有限公司)中说明书的相关操作进行,按照相关试剂进行操作,将相应量的标准液滴入阳性、阴性孔中,随后根据要求分别滴加相应量的特异酶混匀后进行封膜操作。经 37℃水浴孵育30 min后进行洗板、显色。经酶标仪比色得出检测结果。②化学发光法检验的具体操作为：采用全自动化学发光免疫分析仪(罗氏 Cobas e411)以及原装配套试剂,严格根据操作说明书进行操作,记录检测结果。

1.4观察指标 ①比较两种检测方法在不同血清表面抗原浓度下的灵敏度；②比较两种检测方法的阳性检出率；③比较两种检测方法的乙肝病毒标志物检出率。

1.5统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1两种检测方法在不同血清表面抗原浓度下的灵敏度比较 化学发光法在不同血清表面抗原浓度下的检测灵敏度均高于酶联免疫法,差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两种检测方法在不同血清表面抗原浓度下的灵敏度比较［n(%)］

2.2两种检测方法的阳性检出率比较 化学发光法阳性检出率0.86%(43/5000)高于酶联免疫法的0.52%(26/5000),差异具有统计学意义 (P<0.05)。

2.3两种检测方法的乙肝病毒标志物检出率比较 化学发光法的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检出率均高于酶联免疫法,差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两种检测方法的乙肝病毒标志物检出率比较［n(%)］

3 讨论

婚前检查指的是结婚前对男女双方进行常规体格检查和生殖器检查,其中包括乙肝、梅毒、先天性遗传病等,以便发现疾病,保证婚后的婚姻幸福。婚前检查对于男女双方都有着重大意义。乙肝是临床常见的传染性疾病,是由乙肝病毒感染导致的慢性疾病。乙肝病毒具有较强的传染性,可以通过血液、体液等进行传播。近年来虽然发病率随着临床疾病防控有所缓解,但发病基数仍然较大,发病形势不容乐观。乙肝病毒感染肝脏细胞后,可以通过一系列肝脏病理损害导致肝细胞功能障碍,肝脏正常功能受损,导致患者出现食欲减退、肝区疼痛、腹胀、恶心等症状,严重影响患者的生活质量。乙肝病毒长期迁延不愈可以导致肝硬化、肝癌等病变,对患者生命健康造成严重威胁。目前临床研究发现婚孕前检查时,受检人员中出现乙肝表面抗原阳性时,其配偶及子女出现乙肝病毒感染的几率将明显增加,且乙肝病毒感染还会影响母婴结局,易导致产妇及新生儿死亡［3］。因此,加强婚孕前检查乙肝病毒性肝炎发生状况在控制乙肝病毒性肝炎传染、改善母婴结局方面具有重要价值。

乙肝病毒感染的早期患者症状表现通常不典型,容易导致误诊、漏诊,不利于患者的早期治疗,如何通过科学有效的诊断措施提高临床检出率是乙肝研究的重点。目前乙肝筛查只要通过检测乙肝标志物,乙肝标志物检测包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb。

乙肝是威胁人们生命健康的常见病。它通常通过血液传播。近年来,我国感染率约为4.02%,感染人数约为4000万。目前,本病的临床检查方法很多,但选择准确率高、检出率高的诊断方法至关重要。化学发光法与酶联免疫法是临床常用的检测手段,通过显色反应可以对相关指标进行定量和定性分析,具有较高的检测准确性［4］。早期检测和诊断对于临床治疗乙肝具有重要意义,可以防止进一步的并发症损害。

酶联免疫法相对简单、成本低,常用于大量血清样品的检测,但易污染样品,经常出现假阴性、假阳性现象,灵敏度相对低于化学发光法,不宜用于乙肝病毒感染的动态监测或乙肝病毒感染的早期检测。化学发光法检测乙肝病毒标志物灵敏度较高,对样品的干扰因素相对较少,自动化程度较高,可用于乙肝病毒标志物的定量检测［5］。适用于乙肝病毒感染的动态监测。目前,酶联免疫法能显著提高特异性和敏感性,但酶联免疫法仍存在一定的假阴性和假阳性结果,特别是在无偿献血等乙肝病毒感染率较低的人群中,假阳性问题非常突出。此外,国内常用的乙肝酶联免疫试剂没有灰色地带,不同厂家的试剂盒截止计算方法也不一致。同时,国产试剂盒之间的检测异质性很大,这主要是由于假阳性因素较多。在临床实验室测试中,程序和使用方法应该经过评估,以确保它们完全符合要求,然后才能采用。在阳性和阴性试验中,一般采用试验方法来判断不同方法是否具有相关性和一致性,但本研究中,酶联免疫法和化学发光法在乙肝患者临床检测中的相关系数有较大差异,提示化学发光法可用于临床术前筛查和血源筛选。化学发光法具有灵敏度高、特异性强的特点,虽然有一些遗漏,但仍有较高的检出率。

本研究选择2015年1月～2019年12月来本院就诊的5000例婚前检查体检者,同时采用酶联免疫法检验和化学发光法检验两种方法检测乙肝标志物,对比两种方法检验效果差异,结果表明,化学发光法在不同血清表面抗原浓度下的检测灵敏度均高于酶联免疫法,差异均具有统计学意义 (P<0.05)。化学发光法阳性检出率高于酶联免疫法,差异具有统计学意义(P<0.05)。化学发光法的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检出率均高于酶联免疫法,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结合研究结果进行分析,酶联免疫法虽然操作简便、价格低廉,但容易受外界因素的干扰,临床应用的灵敏度和阳性检出率不高,相比之下化学发光法采用全自动仪器和配套试剂从而实现了检测的标准化、自动化,进一步提高检测效果,有利于提高检测的准确度。

综上所述,在婚前检查中乙肝病毒血清学的检测意义重大,采用化学发光法检测的灵敏度和阳性率高于酶联免疫法,相比之下检测更加自动化和科学化,检测结果更加稳定,临床应用价值更高。通过采用化学发光法更有利于早期诊断并防止进一步感染扩大,值得临床推广使用。