细胞形态学在急性白血病患者诊断中的应用价值分析

河南省平顶山市第一人民医院（467000）杨海

急性白血病（AL）是一种临床常见的恶性血液学疾病，其发病率位居所有恶性血液系统疾病首位。随着现代医学的不断发展，AL的诊断、治疗亦取得了极大进步，准确了解患者分型对后续治疗具有重要作用。MICM分型是目前被国际医生广泛认可的一种分型方法，但该分型方法对医疗条件要求较高，许多单位并不具备检测条件。细胞形态学检测是一种通过了解细胞比例、数量、结构来判断患者是否存在病变的检测方式，其具有操作简便的有点[1][2]。此次研究分析了细胞形态学分型检测在AL诊断中的应用价值，已期为临床诊断提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 此次研究纳入对象为2016年6月～2019年6月在我院就诊的92例AL患者，其中男性患者49例，女性患者43例，年龄4～72岁，平均年龄（38.15±4.31）岁。

纳入及排除标准：符合AL临床诊断标准，无其他类型血液系统疾病；无严重免疫功能缺陷；无严重精神障碍；所有患者均了解研究内容且签署知情同意书。该研究已获得院伦理委员会许可。

1.2 研究方法

1.2.1 细胞形态学检查 选取合适的骨髓涂片进行瑞氏-姬姆萨染色，100倍油镜下计数200个均匀分布的有核细胞，同时氧化物酶染色（POX）、过碘酸-雪夫反应染色（PAS）、醋酸萘酚酯酶+氟化钠抑制实验（NAE+NaF），计数阳性率并观察酶型，并按FAB标准分型。

1.2.2 免疫学检查 采集1～2mL骨髓液（加入肝素抗凝），使用流式细胞仪进行测定（24h内完成），按CD45/SSC设门分出幼稚细胞群和成熟细胞群，并选择合适的单克隆抗体进行免疫表型检测和抗原表达情况，根据欧洲白血病免疫分类协作组（EGIL）积分标准确定类型。

1.2.3 染色体核型检查 采集2～5mL骨髓液（加入肝素抗凝），按2×106/ml的密度将细胞接种于培养液中，过夜培养，于培养结束前1h加入秋水仙胺（终浓度为0.05ul/ml），离心收获细胞，用固定液（甲醇和冰醋酸以3∶1的比例配置）固定3次，滴片，采用R显带法进行分析，参照《人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN2013）》进行核型描述。

1.2.4 分子生物学检查 采集2～3mL骨髓液（加入肝素抗凝），加入等体积0.9%的NaCl溶液进行稀释，用淋巴细胞分离液分离单个核细胞，裂解细胞后提取总RNA，测定RNA浓度。并使用试剂盒获取cDNA，然后进行多重巢式PCR反应，凝胶电泳后进行结果分析。

1.3 统计学分析 用统计学软件Excel和SPSS22.0进行数据分析，定性资料以n%表示，组间比较行χ2检验，P＜0.05表示差异显著。

2 结果

细胞形态学检查共有71例患者确定为白血病亚型，确诊率为77.17%；免疫学检查共有73例患者确定白血病亚型，确诊率为79.35%；细胞遗传学诊断共有20例患者确诊白血病亚型，确诊率为21.74%；分子生物学诊断共有21例确定白血病亚型，确诊率为22.83%。MICM联合诊断则有90例患者确诊，诊断准确率为97.83%。MICM联合诊断的准确率显著高于单独细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学诊断（P＜0.05），单独细胞形态学、免疫学诊断准确率均高于细胞遗传学和分子生物学诊断（P＜0.05），但细胞形态学和免疫学诊断准确率之间无统计学差异（P＞0.05），细胞遗传学和分子生物学诊断准确率之间也没有统计学差异（P＞0.05）。

3 讨论

了解AL患者亚型是临床治疗的基础，而随着检验医学的不断发展，形态学、免疫学、分子生物学、细胞遗传学等手段在AL分型诊断中发挥了重要作用，但受到试剂、仪器等因素影响，分子生物学、细胞遗传学检测在医院普及较为困难，目前许多三甲医院仍不具备该种检测手段。此次研究结果显示，MICM联合诊断仍是目前最为准确的AL分型检测方法，但细胞形态学检测和单纯免疫学检测并无显著差异，而相较于免疫学检测，形态学检测亦具有一些独特优势：首先形态学检测具有经济、方便快捷、操作简单等优势；对于存在典型形态学变化的AL患者，通过形态学检测可直接诊断，如AML-M3，可为患者及时抢救提供基础[3]；形态学检测和化学染色在单核细胞白血病分型诊断中具有一定优势；有利于尽早判断淋巴瘤患者病理分期；通过形态学检测可为后续免疫学检测的单克隆抗体选择提供帮助[4]。

细胞形态学检查在AL患者分型诊断中具有不可替代的价值，临床检验人员应给予高度重视。