免疫固定电泳联合游离轻链检测对多发性骨髓瘤的诊断价值

胡玉皎，郝晓柯，程晓东，周铁成，张 莹，胡娟娟，刘家云

空军军医大学西京医院检验科，陕西西安 710032

单克隆浆细胞出现恶性增殖，同时单克隆免疫球蛋白分泌过多被称为多发性骨髓瘤，而患者不产生单克隆免疫球蛋白则称为未分泌型多发性骨髓瘤，该情况发生率较低。多发性骨髓瘤属于恶性肿瘤的一种，主要是由于骨髓内单一浆细胞株异常增生导致的[1],其主要临床特点为易出现贫血、感染和骨质破坏，而造成以上情况发生的主要原因是正常多克隆浆细胞出现过量分泌，严重阻碍多克隆免疫球蛋白分泌[2]。根据相关统计结果显示，在我国每10万人有2～3人为多发性骨髓瘤，女性的发生率低于男性，占比约为1∶1.6，其中40岁以上的患者为该疾病的高发人群[3]。多发性骨髓瘤早期并无明显的表现，且起病较为缓慢，其临床表现多为淀粉样变、感染、贫血、神经症状、骨痛、高钙血症、肾功能不全等，由于无确切的临床表现，易造成漏诊、误诊，而错过最佳治疗时间，给治疗增加困难[4]。因此，及早确诊对多发性骨髓瘤的治疗尤为重要，本研究探讨采用免疫固定电泳联合游离轻链检测对多发性骨髓瘤的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2017年7月1日至2019年5月16日来本院治疗的多发性骨髓瘤患者836例为研究组，其中男506例，女330例，年龄42～79岁，平均(61.4±5.4)岁。研究组的纳入标准：(1)所有多发性骨髓瘤患者均符合《中国多发性骨髓瘤诊治指南 (2020 年修订)》[5]的诊断标准；(2)患者神志清晰，无精神疾病，可进行正常沟通交流；(3)患者对此次研究均知情且同意；(4)患者年龄在40～80岁。研究组排除标准：(1)患有肾脏或其他严重疾病；(2)患有传染性或皮肤疾病；(3)处于昏迷状态或患有精神疾病，无法进行沟通交流；(4)患者依从性较差或拒绝参与此次研究。收集同期本院体检健康者80例作为对照组，其中男48例，女32例，年龄41～80岁，平均(61.2±5.6)岁。对照组纳入标准：(1)患者均为健康人群；(2)年龄在40～80岁。对照组排除标准：拒绝参与此次研究。

1.2方法

1.2.1患者血清总蛋白的检测 收集2组研究者的晨起空腹静脉血3～5 mL，室温静置30 min，随后分离血清，防止溶血及脂血情况的发生，使用日立7600全自动生化分析仪对参与此次研究者的血清总蛋白水平进行检测。阳性判断标准：总蛋白水平≥85 g/L[5]。

1.2.2仪器与试剂 使用SEBIA CAPIA Arys 2毛细管电泳仪行血清蛋白电泳检测。使用SEBIA Hydrasys 2 Scan全自动电泳仪及配套试剂进行血清免疫固定电泳检测。使用日立7600全自动生化分析仪和英国Binding Site 游离λ/κ轻链检测试剂盒(免疫比浊法)，严格按照仪器和试剂说明书进行操作。严密监测室内质控，确保检测当日室内质控均在控。

2 结 果

2.1多发性骨髓瘤患者血清免疫固定电泳结果 836例多发性骨髓瘤患者血清免疫固定电泳分型结果显示，IgG型462例，其中κ型273例，λ型189例；IgA型223例，其中κ型122例，λ型101例；IgM型40例，均为λ型；游离轻链型111例，其中κ型22例，λ型89例。

2.2比较2组研究者血清免疫球蛋白水平 研究组患者IgG型人群的IgG水平明显高于其他人群，IgA型人群的IgA水平明显高于其他人群，IgM型人群的IgM水平明显高于其他人群(P<0.05)。见表1。

表1 2组研究者血清免疫球蛋白水平比较

2.3M蛋白检出患者血清游离轻链结果 研究组κ型患者的κ轻链水平、κ/λ值与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，研究组λ型患者的λ轻链水平、κ/λ值与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，对照组人群的κ轻链、λ轻链水平、λ/κ值与未检出M蛋白的多发性骨髓瘤患者比较，差异有统计学意义差(P<0.05)。见表2。

表2 M蛋白检出患者血清游离轻链结果[M(P25～P75)]

3 讨 论

多发性骨髓瘤是单克隆的浆细胞恶性增殖性疾病，该疾病对浆细胞进行单克隆，而结构均一的单克隆免疫球蛋白主要是由增生的浆细胞产生[6]。多发性骨髓瘤患者根据体质的不同，临床表现也不一样，本研究的836例多发性骨髓瘤患者主要是由于出现肾功能不全、反复感染、骨折、贫血、蛋白尿、发烧、腰腿痛等一种或多种症状而到本院就诊[7]。通过骨髓检查、免疫固定电泳、免疫球蛋白定量、游离轻链检测等确诊为多发性骨髓瘤[8]。根据相关研究结果显示，判断患者是否为多发性骨髓瘤及治疗后的复发、预后情况，可依据患者的血清、尿液电泳和免疫固定电泳、游离轻链检测等结果[9]。本研究结果显示，IgG型462例，其中κ型273例，λ型189例；IgA型223例，其中κ型122例，λ型101例；IgM型40例，均为λ型；游离轻链型111例，其中κ型22例，λ型89例，与相关研究结果无明显差异[9]。

免疫固定电泳是抗体反应、电泳技术与抗原相结合，该技术结合了单克隆抗体的灵敏度及特异度，同时，具备蛋白质电泳的高分辨率分离技术，因此，具有结果判读直观、特异度强、分辨率及灵敏度高的特点[10]。根据报道结果显示，免疫固定电泳在对单克隆球蛋白进行检测时其检出量在6～10 mg/L，诊断的灵敏度在93%以上，同时对M蛋白的免疫球蛋白性质也可以准确检测出来，是目前临床上对M蛋白检测及对其进行免疫化学鉴别的“金标准”[11]。本研究结果显示，研究组患者IgG型人群的IgG水平明显高于其他人群，IgA型人群的IgA水平明显高于其他人群，IgM型人群的IgM水平明显高于其他人群(P<0.05)。

多发性骨髓瘤患者的免疫球蛋白出现浆细胞恶性增生，导致M蛋白水平异常增高，通过反馈机制对正常免疫球蛋白的合成进行抑制，造成多发性骨髓瘤患者的抵抗力显著降低，进而使患者出现反复感染和发烧等临床表现。免疫固定电泳是目前临床上较为有效的对M蛋白及分型快速分离和鉴别的方法，该方法具有较高的准确度、灵敏度和特异度，对多发性骨髓瘤的分型、预后情况及临床治疗效果都有重要意义[12]。

本研究结果显示，研究组κ型患者的κ轻链水平、κ/λ值与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，研究组λ型患者的λ轻链水平、κ/λ值与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，对照组患者的κ轻链、λ轻链水平、κ/λ值与未检出M蛋白的多发性骨髓瘤患者比较，差异有统计学意义(P<0.05)。在进行免疫固定电泳的基础上联合游离轻链检测可以明显提高检出率，同时将漏诊、误诊的概率降低。若患者在进行免疫固定电泳检测时未被检测出，则λ轻链、κ轻链水平或κ/λ值上会出现相应的提示，所以，在对患者进行免疫固定电泳联合游离轻链检测时，若其中一种检测结果为阳性则可提示单克隆免疫球蛋白疾病，同时进行骨骼的X线、核磁共振成像、CT及骨髓穿刺等更进一步的检查，以使检出率提高，从而降低漏诊率。在临床上对于多发性骨髓瘤的诊断，免疫固定电泳和游离轻链检测均具有重要的价值，联合检测意义尤为突出。

目前，临床试验主要采用免疫固定电泳对M蛋白进行检测，尤其是对M蛋白进行分型的意义较为突出，也可进一步筛查血清蛋白电泳异常和球蛋白增高的患者，可有效缩短多发性骨髓瘤的诊断时间。