儿童肺炎支原体抗原、抗体胶体金法快速检测的临床应用＊

江小林，朱利明，罗慧

（广东省惠州市第一人民医院检验科，惠州 516003）

肺炎支原体(mycoplasma pneumonia，MP)是儿童和成人社区获得性呼吸道感染的重要病原体，可引起重症或非典型肺炎及多种并发症， 危害严重青少年的健康[1,2]。 研究发现，5 岁以下儿童死亡的首位是肺炎(约占19%)[3]。MP 还可能引发小儿咳嗽变异性哮喘等疾病,严重者可能出现多脏器衰竭甚至死亡[4]。 由于 MP 感染的临床症状并不典型，无法与其他肺炎相区别， 其诊断主要依靠实验室检测[5]。 本研究采用抗体胶体金法快速检测儿童支原体肺炎感染,取得了较好的结果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 以 2018 年 12 月-2020 年 2 月到惠州市第一人民医院门急诊和住院部的400 例MP感染患儿作为研究对象。 其中男212 例， 女188例，年龄 1-14 岁，平均 (5.8±1.6)岁。 选择同期在该院进行体检的 400 例健康儿童体检者作为对照组。 其中男 232 例，女 168 例，年龄 1-12 岁，平均年龄(4.9±1.4)岁。 两组患儿的一般资料无显著性差异(P>0.05)。

1.2 方法[6-8]采集所有受试者全血 3 ml 各 2 管和咽 拭子分泌物 1 份，3500 r/min 离心 10min 取上层血清使用，1h 内检测，剩余血清-80 ℃冰箱冻存以便复查。 间接免疫荧光法（indirect immunofluorescent assay, IFA）采用 IFA 试剂盒（西班牙 VIRCELL 公司提供）， 酶联免疫吸附试验（enyme-linked immunosorbent assay, ELISA） 使用ELISA 试剂盒（芬兰 Ani Labsystems 公司），胶体金法采用MP-IgM 检测试剂盒（深圳市赛尔生物技术有限公司），抗原胶体金法采用凯必利诊断试剂盒，所有操作均严格按照说明书进行。

1.3 观察指标 记录并比较3 种方法检测 MP 的敏感度和特异度， 检测MP 的敏感度=阳性例数/MP感染总数×100%；检测 MP 的特异度=阴性例数/健康儿童总数×100%

1.4 统计学处理 使用SPSS 18.0 统计学软件分析数据,采用 t 检验,以 P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 种方法检测 MP 的敏感度比较 MP 感染组中， 胶体金层析免疫法检测出阳性标本377 例，显著高于 IFA 法(336 例)和 ELASA 法(287 例)，胶体金层析免疫法的敏感度显著高于IFA 法和ELASA法，差异有统计学意义(P＜0.05)。 见表 1。

表1 3种不同方法检测MP的敏感度比较

2.2 3 种方法检测 MP 的特异度比较 对照组中，胶体金层析免疫法检测出阳性标本9 例，显著低于IFA 法(85 例)和 ELASA 法(54 例)，胶体金层析免疫法的敏感度显著高于IFA 法和ELASA 法，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表 2。注：与 IFA 法比较，aP<0.05; ELASA 法比较，bP<0.05

表2 3种不同方法检测MP的特异度比较

2.3 间接荧光法如图所示

3 讨论

肺炎支原体是引起气管支气管炎、 非典型性肺炎、上呼吸道感染的常见病原体，主要由口、鼻分泌物通过空气传播，经飞沫引起呼吸道感染。 其临床症状并不典型，不易与其他肺炎相区别，以鉴别诊断，常被忽视而导致严重的合并症[9,10]。

提高MP 的早期诊断率， 能够显著缩短病程，降低不良事件的发生率， 对于MP 患者尤为重要。MP 的诊断主要依靠实验室检测，检测方法主要有分离培养、PCR 检测、血清学检测等[11,12]。 分离培养是世界卫生组织推荐的诊断金标准， 但是该方法灵敏度不高、耗时长，即使是新型的快速培养法也需5-14d[13]。 PCR 方法灵敏度高、特异性强，但是该法操作繁琐，对操作者技术要求高，不能满足临床快速诊断的需求[14]。被动凝集法是一种常用的血清学检查方法，但是该方法只能检测总抗体，不能区分IgG 和IgM 等每一类的滴度， 需要感染早期和中期双份血清的结果才能判断是否为MP 感染[15]。因此， 抗原与抗体联合诊断仍然是国际上提倡的MP 感染诊断标准。

本研究采用国内唯一的肺炎支原体抗原检测试剂进行测试，该法采用咽拭子，病人依从性好。检测快，15min 出检测结果，病人随测随走，适用于门急诊检测，可用于MP 早期诊断。 在病原体感染初期，疾病临床特征不明显的情况下，抗原检测是疾病初期诊断的主要依据， 该方法可帮助临床医生进行病原学筛查， 并为儿童肺炎支原体感染提供更全面信息， 有利于临床医生做出及时准确的判断，同时为临床合理地用药提供帮助。 该研究发现，应用胶体金快速检测法检测肺炎支原体抗原、抗体， 其敏感度和特异度都显著高于IFA 法和ELASA 法，是一种快速、简便、准确的检验方法，值得进一步研究和推广。 但是，需要注意的是，临床诊断中需要综合性分析才能得出最终诊断结果，不能仅依靠一个指标进行判断， 综合分析各个指标才能客观准确诊断。