BAF53a表达对口腔鳞状细胞癌患者预后的影响

李蕴蕴，李瑞喆，秦 慧，郭茹菲，杨召阳，尹玉慧，王 静，李珊珊

1)郑州大学第一附属医院口腔科 郑州 450052 2)郑州大学第一附属医院病理科 郑州 450052

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是一种常见的恶性肿瘤，全球每年约有60余万新发病例，其死亡率在过去10 a并没有太大变化，5 a生存率仅50%左右[1]。OSCC可发生在口腔的任一部位，如颊部黏膜、上下牙龈、硬腭、舌部前2/3(包括舌背、舌腹和舌侧缘)、口底，局部复发和远处转移被认为是预后不良的主要原因。BAF53a(也称为ACTL6A)是Brg/brm相关因子(BAF)复合体的亚基之一，它在哺乳动物的神经系统发育[2]、维持干细胞分化以及基因转录调控等方面发挥至关重要的作用[3]。有研究[3-9]报道BAF53a的异常表达与骨肉瘤、胶质瘤、卵巢癌、肝癌、前列腺癌、结肠癌的进展有关；且在头颈部鳞状细胞癌中BAF53a与P63具有协同作用，并可调节关键基因，促进肿瘤细胞的增殖、抑制分化；作者推测BAF53a可能也是OSCC的潜在分子标记物之一。为此，本文研究了BAF53a在OSCC中表达的临床意义以及对预后的影响，旨在为OSCC的诊断及预后判断提供依据。

1 对象与方法

1.1研究对象收集2012年1月至2014年8月郑州大学第一附属医院手术切除、并经病理确诊的OSCC石蜡包埋标本(均选取癌组织和癌旁正常组织)，共71例，并对所有病例进行了电话随访。患者术前均未行放化疗及其他抗肿瘤治疗，术后均未发生围手术期死亡。本研究经郑州大学第一附属医院医学伦理委员会批准，所有随访患者或其直系家属均已签署知情同意书。71例手术切除标本中，男40例，女31例，中位年龄为64.6岁。组织学分级：Ⅰ级13例，Ⅱ级48例，Ⅲ级10例。有淋巴结转移者12例，无转移者59例。根据美国癌症联合委员会(American Joint Committee on Cancer，AJCC)和国际抗癌联盟共同发布的肿瘤TNM分期第8版(唇和口腔肿瘤TNM分期)对本组病例进行T分期：T1期8例，T2期20例，T3期26例，T4期17例。所有标本均以体积分数10%中性缓冲福尔马林液固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。

1.2组织标本中BAF53a蛋白表达的免疫组化检测采用免疫组化SP法。兔抗人BAF53a多克隆抗体购自美国Novus公司，SP-9000试剂盒、二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。严格按试剂说明书步骤进行操作。结果判定[5]：BAF53a表达于细胞核，呈棕褐色或黄褐色颗粒。根据染色细胞数和染色强度评分的乘积判定结果。阳性细胞数<10%计为0分，10%～计为1分，50%～计为2分，70%～100%计为3分；染色强度：无染色计为0分，浅黄色计为1分，黄褐色计为2分，棕褐色计为3分。两项指标的乘积6分以下为低表达，6分及以上为高表达。

1.3随访所有患者均通过电话随访，随访时间截至2018年6月7日，总生存期为手术日期至患者因该病死亡或随访截止日期。

1.4统计学处理采用SPSS 21.0进行数据分析。应用χ2检验或精确概率法比较OSCC组织中BAF53a蛋白的表达及与临床病理参数的关系。应用Log-rank检验评估OSCC组织中BAF53a表达与生存期的关系，应用Cox回归模型分析BAF53a表达与OSCC预后的关系。检验水准α=0.05。

2 结果

表1 OSCC组织中BAF53a蛋白的表达及与临床病理参数的关系 例(%)

图1 BAF53a在癌旁正常组织(A)及OSCC组织(B)中的表达(SP,×200)

2.2BAF53a表达与OSCC预后的相关性分析见图2、表2。由图2可知，BAF53a高表达患者的总生存期更短。将单因素Cox回归分析结果中与预后有关的临床病理参数纳入多因素Cox回归分析，结果显示，BAF53a表达与肿瘤的组织学分级是影响总生存期的预后因素。

图2 OSCC组织中BAF53a表达与生存期的关系

表2 OSCC患者预后影响因素的单因素及多因素Cox回归分析

3 讨论

BAF53a(ACTL6A)是ATP依赖性SWI/SNF样BAF染色质重塑复合物的主要成员之一，它通过抑制SWI/SNF诱导的KLF4以维持表皮干细胞的干性[10]。有研究[11]显示，BAF53a在激活原癌基因的活性中起至关重要的作用。近年来的研究[3]发现：BAF53a具有抑制细胞分化、维持细胞的自我更新能力以及细胞多能性的作用(包括胚胎干细胞、表皮干细胞及造血系统中的祖细胞)，这些特性提示BAF53a与肿瘤细胞的恶性生物学特征有关。

以往的研究[4-9]表明，BAF53a的高表达与多种肿瘤的发生、发展密切相关。有研究[7]显示ACTL6A(BAF53a)在肝癌细胞系及肝癌组织中高表达，并且显示ACTL6A(BAF53a)的高表达与肿瘤的恶性生物学特性显著相关，ACTL6A(BAF53a)的高表达是影响肝癌患者OFS、OS的独立危险因素。通常情况下组织学分级是反映肿瘤恶性度(即肿瘤分化程度)的一个重要病理指标，肿瘤分化差(低分化)预示着肿瘤细胞具有更强的增殖能力及更强的侵袭力；淋巴结转移、肿瘤浸润深以及T分期更晚则反映了肿瘤细胞具有更强的侵袭力及更差的预后。本研究运用免疫组化法检测了OSCC组织和癌旁正常组织中BAF53a的表达，发现BAF53a在OSCC组织中呈高表达状态。此外，BAF53a的高表达还与OSCC的T分期、组织学分级以及淋巴结转移有关(P<0.001)，表明OSCC中BAF53a的高表达预示着肿瘤具有更高的恶性程度以及更强的侵袭性，也提示患者具有更差的预后。本研究还观察了OSCC中BAF53a的高表达对患者总生存期的影响，发现BAF53a高表达患者的总生存期明显低于低表达患者。Cox多因素分析结果显示，除了肿瘤的组织学分级之外，BAF53a也是影响患者总生存期的一个独立预后因素。这些结果更进一步说明OSCC中BAF53a的高表达是OSCC不良预后的指征。由研究[12-13]结果显示，头颈部鳞状细胞癌中ACTL6a与P63具有协同作用，并可调节关键基因，激活Hippo-YAP途径；Hippo-YAP途径的激活，可促进肿瘤细胞的增殖、抑制分化，并导致肿瘤预后不良。

综上所述，BAF53a在OSCC中具有促癌作用，BAF53a的高表达对评估OSCC的预后具有指导意义，其作为OSCC潜在的预后评估分子标志物的价值是显而易见的。但BAF53a的作用机制及相关功能尚需深入研究，其临床应用价值也有待进一步探索。