中草药添加剂对肉牛免疫相关指标的影响

黄嵘峥,杨俊杰,蒋烈戈,苏 政

(新疆生产建设兵团第九师畜牧科学研究所,新疆额敏834600)

饲料添加剂一直以来都是养殖业的点睛之笔，随着抗生素的危害逐渐被认识，新的天然环保饲料添加剂逐步进入大众视野，中草药添加剂便是其中一种。中草药是纯天然的植物产品，作为饲料添加剂无药物残留，无抗药性，药效不减，能提高机体免疫系统功能，增强免疫力，通过对动物机体的整体调节，使之向有利于健康方向发展[1]。中草药添加剂配伍较多，药效种类丰富，能够调节动物免疫性能，提高机体抗氧化能力[2]，目前在奶牛、家禽、猪等动物上都有较深入的研究，对肉牛中草药添加剂研究较少，本试验选取党参、黄芪、熟地、甘草、柴胡等多味中草药组成配伍，旨在研究其对肉牛免疫机能的影响，为该产品进一步应用提供试验数据。

1 材料方法

1.1 试验时间与地点 试验时间于2018年8-11月进行，其中预饲期15 d，试验期90 d。试验选择在新疆生产建设兵团第九师第170团牧泰新养殖合作社进行。

1.2 试验材料 中草药添加剂由党参、黄芪、熟地、甘草、柴胡、鱼腥草、青蒿、大青叶、陈皮经粉碎过20目筛后按一定比例混合组成。

1.3 试验设计与饲养管理 试验牛由第170团牧泰新养殖合作社提供，随机选取体重体况相近的肉牛20头，每组5头，分为对照组，试验I组、II组、Ⅲ组。分为4个时期，每期30 d(预试期30 d，试验期90 d)，饲喂前驱虫保健，采取栓系饲养模式，全混合日粮饲喂，每天饲喂2次(9:00和17:00)。试验期保证肉牛自由饮水采食。

1.4 试验日粮 以肉牛现有日粮为基础日粮，其组成与营养水平见表1。对照组饲喂基础日粮，试验I组、II组、Ⅲ组分别在基础日粮中添加130、150 g/d和180 g/d中草药添加剂。每日(16:40)饲喂1次。

1.5 样品采集 分别于试验开始第30、60、90天采血，采用颈静脉穿刺采血，抽取1～2 mL血液，采血后注入10 mL采血管，于室温下自然凝固10～20 min，离心15 min(3 000 r/min)。收集血清，于4 ℃冰箱保存。

1.6 免疫指标测定 免疫指标CD4+、CD8+、IL-2测定采用双抗体夹心法酶联免疫吸附法(ELISA)。免疫球蛋白试剂盒均由北京言必信科技有限公司提供，操作方法按说明书进行。

1.7 数据处理 数据采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析，用LSD法进行多重比较。数据用平均数±标准差表示。

表1 基础日粮的组成及营养水平(干物质基础)

2 结果

2.1 中草药添加剂对肉牛免疫性能影响 由表2可知，试验30 d，试验Ⅲ组肉牛血清中IL-2浓度最高，为(212.15±26.18)pg/mL，显著高于对照组(P<0.05)，试验I、II组肉牛血清中IL-2浓度高于对照组，但差异不显著(P>0.05)，试验Ⅲ组肉牛血清中CD4+含量为(58.05±4.36)ng/mL，显著高于对照组和试验I组(P<0.05)，CD8+含量为(14.21±4.03)ng/mL，显著低于对照组(P<0.05)，CD4+/CD8+值为5.12±1.47，显著高于对照组、试验I组、试验II组(P<0.05)；试验60 d，试验Ⅲ组肉牛血清中IL-2浓度显著高于对照组、试验I组、试验II组(P<0.05)，试验Ⅲ组CD4+浓度显著高于对照组(P<0.05)，CD8+浓度低于对照组，差异显著(P<0.05)，CD4+/CD8+值显著高于对照组(P<0.05)；试验90 d，试验I组肉牛血清中IL-2浓度显著高于对照组(P<0.05)，试验I、II组肉牛血清中IL-2浓度高于对照组，但差异不显著(P>0.05)，试验I组CD4+含量为(40.32±2.10)ng/mL，显著高于对照组(P<0.05)，试验Ⅲ组高于试验II组，但差异不显著(P>0.05)，试验I组CD8+含量为(14.58±3.22)ng/mL，显著低于对照组(P<0.05)，CD4+/CD8+值显著高于对照组(P<0.05)。

表2 复方中草药添加剂对肉牛血清IL-2、CD4+、CD8+浓度的影响

3 讨论

本试验证明复方中草药添加剂能够提高肉牛血清中IL-2、CD4+的含量及CD4+/CD8+值，从而提高动物机体的免疫力。结果显示，随着饲喂天数的增加，复方中草药添加剂的量应该由高转低。

白细胞介素-2 ( IL-2 )是由活化T淋巴细胞产生的一种重要的细胞因子，能激活T细胞并促进 B细胞分化、分泌抗体，诱导产生干扰素，增强单核细胞以及自然杀伤细胞(NK)的杀伤活性，在机体的免疫反应中具有重要的调节作用[3]。

孙启通过对肉鸡饲喂不同剂量不同组方的中草药添加剂发现，中草药添加剂能够显著提高肉鸡血清中IL-2含量，且同一组方，随着饲喂浓度的升高，肉鸡血清中IL-2含量也出现升高的趋势，但随着饲喂时间的上升，高浓度组添加剂的促进效果反而低于低浓度组[4]。这与本试验的结果一致，试验第30天试验Ⅲ组肉牛血清IL-2浓度比对照组提高了27.12%，差异显著(P<0.05)，试验I组提高了19.46%，差异不显著(P>0.05)；试验第90天，试验Ⅲ组提高了13.14%，差异不显著(P>0.05)，试验I组提高了22.20%，差异显著(P<0.05)。说明随着试验动物的生长发育，中草药添加剂的饲喂浓度应该由高到低，才能显著提高动物血清中IL-2的含量，从而改善动物机体的免疫性能。本试验数据显示，中草药添加剂组的肉牛血清中IL-2的含量显著高于未添加组。说明中草药添加剂能够促进机体血清中IL-2的含量。这与贾玉刚等[5]的报道一致。从整体情况来看，随着试验天数的增加，肉牛血清中IL-2的含量逐渐减少，这可能与IL-2在机体内免疫起到双向调节的作用有关，相比于体外试验，IL-2在机体内的调节作用更为复杂，与各型免疫细胞所处的状态，IL-2自身的来源、浓度和作用时间等因素都密切相关[6]。

CD4+、CD8+是T淋巴细胞的表面抗原，CD4+主要分布在辅助性T淋巴细胞表面，主要参与细胞的免疫分化，协调免疫细胞之间的相互作用。因此，当CD4+T细胞比例增高时，能够快速启动免疫系统，消灭抗原，表面机体免疫性能增强。CD8+分布在抑制性T淋巴细胞和细胞毒性T淋巴细胞表面，其主要功能是清除被感染的细胞。当CD8+T细胞比例升高时，说明机体内病原微生物数量升高，CD8+T细胞需要大量结合受感染的细胞，表明机体此时免疫性能下降，受感染严重[7]。机体内CD4+/CD8+值维持在一个动态平衡，一旦失衡则会导致机体免疫系统发生改变。CD4+/CD8+值升高代表机体免疫性能增强，反之则减弱[8]。本试验数据显示，饲喂复方中草药添加剂的肉牛血清中CD4+含量出现升高的趋势，CD8+含量出现降低的趋势，且CD4+/CD8+值显著高于对照组。这与其他学者的研究一致[9-10]。说明中草药添加剂能够显著提高机体血清中CD4+/CD8+值，改善机体免疫力。