放疗联合安罗替尼对小细胞肺癌患者胱天蛋白酶 3、多腺苷二磷酸核糖聚合酶表达的影响研究

张昊，崔秀洁，郭玉华，韩志鹏

朝阳市中心医院1肿瘤科，2病理科，辽宁 朝阳122000

肺癌是发生于各级支气管黏膜上皮、腺体的恶性肿瘤，临床发病率较高。小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）是其中比较少见的类型，治疗也比较棘手。由于SCLC的早期临床表现轻微，且无特异性，多数SCLC患者确诊时已经发展至晚期，失去最佳的手术根治机会，仅以放化疗等姑息治疗为主[1]。安罗替尼是一种小分子多靶点酪氨酸激酶抑制剂，可抑制肿瘤新生血管形成而抑制肿瘤的生长，与放疗联合应用时可起到协同增效的作用[2]。胱天蛋白酶3（caspase 3）可引起细胞不可逆性凋亡，又被称为凋亡因子，而肿瘤细胞的凋亡能力下降可促进其转移过程[3]。多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly（ADP‐ribose）polymerase，PARP]是一种细胞核酶，在DNA损伤后被激活，在DNA修复、重组、维持基因稳定、细胞凋亡等方面具有重要的作用[4]。上述两种指标与肺癌的发生、发展密切相关。本研究探讨放疗联合安罗替尼对SCLC患者caspase 3、PARP表达的影响，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2017年1月至2018年1月于朝阳市中心医院治疗的86例SCLC患者为研究对象。纳入标准：①经组织病理学或细胞学检查确诊为SCLC，且入院时均未接受放疗、化疗及手术治疗；②符合世界卫生组织（WHO）肺癌组织学分类法；③年龄≥45岁。排除标准：①合并肝癌、胃癌等恶性肿瘤；②合并肝肾功能严重异常；③精神疾病。按照随机数字表法将86例SCLC患者随机分为放疗组和联合组（放疗联合安罗替尼）。放疗组42例，男23例，女19例；平均年龄（58.73±8.92）岁；TNM分期：I期1例，Ⅱ期12例，Ⅲ期20例，Ⅳ期9例。联合组44例，男26例，女18例；平均年龄（59.61±9.04）岁；TNM分期：I期1例，Ⅱ期10例，Ⅲ期23例，Ⅳ期10例。两组患者基线特征比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。本研究经医院伦理委员会批准，所有患者均知情同意且签订知情同意书。

1.2 治疗方法

放疗组接受调强放疗，每次1.8～2.0 Gy，每周5次，连续治疗6周。联合组接受放疗联合安罗替尼治疗，放疗剂量同对照组；口服安罗替尼12 mg/d，早餐前顿服，服药2周停药1周；21天为一个治疗周期，服用2个周期。

1.3 观察指标及随访方法

分别于治疗前、治疗6周后抽取两组患者空腹静脉血3 ml，以转速3000 r/min、离心半径12 cm、离心时间10 min进行离心处理，取血清检测cas‐pase 3、PARP水平。采用酶联免疫吸附法检测，Synergy H1全功能酶标仪购自美国贝克曼库尔特有限公司，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

治疗期间观察两组不良反应，治疗后以电话询问及患者复查的形式随访1年，记录两组患者生存率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后血清caspase 3、PARP水平的比较

治疗前两组患者血清caspase 3、PARP水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后联合组患者血清caspase 3水平明显高于放疗组，PARP水平明显低于放疗组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。（表1）

表1 治疗前后两组患者血清caspase 3、PARP水平的比较（pg/ml，± s）

表1 治疗前后两组患者血清caspase 3、PARP水平的比较（pg/ml，± s）

组别放疗组（n=4 2）联合组（n=4 4）t值P值6.6 2±2.0 6 6.5 4±2.2 2 0.1 7 1 0.4 3 2 9.7 3±3.3 7 1 1.6 5±3.5 8 2.5 3 1 0.0 0 6 4 1 9.4±2 3.8 9 4 1 7.7±2 3.9 7 0.3 2 6 0.3 7 3 2 6 8.2±1 4.0 8 2 0 9.8±1 2.0 7 2 0.4 0 8 0.0 0 0 c a s p a s e 3治疗前治疗后P A R P治疗前治疗后

2.2 不良反应的比较

两组患者白细胞减少、中性粒细胞减少发生率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。（表2）

表2 两组患者不良反应发生情况的比较[ n（%）]

2.3 生存率的比较

联合组患者1年生存率为93.2%（41/44），高于放疗组的76.2%（32/42），差异有统计学意义（χ2=4.83，P＜0.05）。

3 讨论

近年来，由于社会人口老龄化、环境污染等因素的影响，肺癌的发病率、病死率呈上升趋势，高发于中老年人群，且男性发病率更高，这可能与男性多存在吸烟等不良行为有关[5]。由于肺癌早期的临床表现以干咳、咳痰、胸痛、胸闷等为主，患者往往未能引起重视，大多数患者在确诊时已失去手术根治机会。放化疗是此类患者的常用治疗方法[6]。SCLC是肺癌的少见类型，约占肺癌的20%，对放化疗的敏感性更高[7]。放疗是通过放射线对肿瘤细胞进行辐照，进而产生放射性损伤，三维适形放疗具有定位精度更高、靶区外剂量衰减更快等优点，是目前SCLC的常用化疗方法[8]。

安罗替尼是国内自主研发的一种新型抗血管生成靶向药物，可有效抑制血管内皮细胞生长因子（vascular endothlial growth factor，VEGF）、血小板源性生长因子（platelet derived gowth factor，PDGF）、成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）、c‐酪氨酸蛋白激酶（c‐tyrosine protein kinase，c‐KIT）等激酶，抑制新生血管形成，进而抑制肿瘤组织生长、转移[9]。安罗替尼在肺癌、胃癌、结直肠癌、甲状腺癌、食管癌、软组织肉瘤等多种恶性肿瘤的治疗中均具有广泛的应用[10]。已有的研究发现，安罗替尼可有效抑制肿瘤细胞增殖，控制病情进展，延长恶性肿瘤患者的生存时间[11]。本研究中采用放疗联合安罗替尼治疗患者1年生存率高于单用放疗患者。这一结果提示，放疗联合安罗替尼治疗SCLC具有更好的治疗效果，可明显提高患者的生存率。这一结果与已见报道的研究结论一致[12]。这可能是由于安罗替尼可抑制新生血管形成，降低肿瘤组织的含氧量，提高其对放射线的敏感性，以提高放疗效果，进而更好地控制肿瘤病情的进展。

细胞凋亡异常是恶性肿瘤发生和进展的主要机制之一，多种酶类在其中发挥着重要的作用[13]。caspase 3是半胱氨酸蛋白酶家族成员之一，可转导细胞凋亡信号，是引起细胞凋亡过程的关键酶。caspase 3活化后可与特异性底物相结合而促进细胞凋亡，其表达降低可引起肿瘤细胞无限增殖[14]。PARP是一种细胞核酶，可诱导机体启动损伤修复机制，参与DNA的损伤修复过程，是引起耐药性、肿瘤细胞恶性程度升高的危险因子，其表达增高可引起肿瘤细胞对放化疗的敏感性下降而影响抗肿瘤治疗效果[15]。本研究中采用放疗联合安罗替尼治疗患者治疗后血清caspase 3水平明显高于单用放疗患者，PARP水平明显低于单用放疗患者。这一结果提示，放疗联合安罗替尼可以有效提高SCLC患者血清内caspase 3水平，降低PARP水平，促进肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。这是由于安罗替尼与放疗可起到协同增效作用，共同促进肿瘤细胞凋亡。

已有的研究发现，安罗替尼的不良反应以高血压、胃肠道不适、肝功能异常、蛋白尿等较多见[16]。本研究发现，两组患者治疗期间的不良反应以白细胞减少、中性粒细胞减少较多见，但不良反应发生率比较无差异。这一结果提示，安罗替尼的用药安全性较高，在说明书推荐剂量下与化疗联合应用时不会增加不良反应风险。

综上所述，放疗联合安罗替尼可以有效提高SCLC患者血清内caspase 3水平，降低PARP水平，延长患者的生存时间，值得临床进一步研究。