动脉瘤性蛛网膜下腔出血病人血清sLOX-1、netrin-1水平变化及其与病人预后的关系

张 兰 库洪彬 王 敏 周 燕

动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aneurysmal subarachnoid hemorrhage，aSAH）有起病急、致残率高和病死率高等特点[1～6]。可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1（soluble lectin-like oxidized lowdensity lipoprotein receptor-1，sLOX-1）是由蛋白酶裂解膜结合受体合成的一种糖蛋白，对动脉粥样硬化发生有重要影响[7]。神经轴突向导因子-1（axon guidance factor-1，Netrin-1）可促进缺血区域神经元再生，减轻缺血性中风后的缺血再灌注损伤[8]。研究发现，动脉粥样硬化病人血清netrin-1 水平低于无动脉粥样硬化病人，提示netrin-1 可能参与动脉粥样硬化过程[9]。本文探讨aSAH 病人血清sLOX-1、netrin-1水平变化及其与病人预后的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象 前瞻性收集2015 年1 月至2018 年7月收治的aSAH共130例（aSAH组），其中男性82例，女性48例；年龄24～75岁，平均（58.62±6.11）岁；体重指数（25.38±2.26）kg/m2。纳入标准：①符合aSAH 的诊断标准[10]；②首次入院治疗，病程＜12 h；③发病前无外伤史；④均签署知情同意书；⑤临床资料完整。排除标准：①存在中枢神经系统疾病史；②合并恶性肿瘤、自身免疫性疾病及造血系统疾病；③再发SAH；④合并严重心、肝、肾功能损伤；⑤合并严重感染。同时，选取我院健康体检者130例（对照组），其中男性65例，女性65例；年龄28～70岁，平均（55.76±4.82）岁；体重指数（24.36±2.71）kg/m2。两组年龄、性别等一般资料相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 检测方法 入院24 h内，取空腹外周静脉血5 ml，3 000转/min离心10 min，取上清液，置-80 ℃保存待测。采用酶联免疫吸附试验法检测血清sLOX-1、netrin-1水平。sLOX-1试剂盒购自天津灏洋生物制品科技有限公司，netrin-1试剂盒购自上海远慕生物科技有限公司。所有操作均按照说明书严格进行。

1.3 预后评估 出院6个月后，采用GOS评分评估预后，4～5分为预后良好，1～3分为预后不良[11]。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0软件进行分析；计量资料以±s 表示，采用t 检验；绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析敏感度、特异度；应用多因素logistic回归分析预后危险因素；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 aSAH 病人血清sLOX-1、netrin-1 变化aSAH 组血清sLOX-1 水平[（1.762±0.610）ng/ml]明显高于对照组[（0.520±0.040）ng/ml；P＜0.05]，而aSAH 组血清netrin-1 水平[（254.600±87.331）pg/ml]明显低于对照组[（788.534±246.510）pg/ml；P＜0.05]。

2.2 不同预后病人血清sLOX-1、netrin-1 比较 出院后6 个月，预后良好78 例，预后不良52 例。预后良好组血清sLOX-1 水平[（1.301±0.560）ng/ml]明显低于预后不良组[（2.236±1.121）ng/ml；P＜0.05]，而预后良好组血清netrin-1 水平[（318.924±120.660）pg/ml]明显高于预后不良组[（152.358±61.725）pg/ml；P＜0.05]。

2.3 影响aSAH病人预后的危险因素 单因素分析示，糖尿病、高血压、术前Hung-Hess 分级、术前改良Fisher 分级、术前WFNS 分级、动脉瘤大小、治疗方式、血清sLOX-1 和netrin-1 是影响aSAH 病人预后的危险因素（P＜0.05，表1）。多因素logistic回归分析显示，术前Hung-Hess分级Ⅲ～Ⅳ级、术前改良Fisher分级Ⅲ～Ⅳ级、术前WFNS分级Ⅳ～Ⅴ级、血清sLOX-1增高和血清netrin-1降低是aSAH病人预后不良的独立危险因素（P＜0.05，表2）。

表1 aSAH病人预后影响因素的单因素分析结果

表2 aSAH病人预后不良影响因素的多因素logistic回归分析结果

2.4 血清sLOX-1、netrin-1水平对aSAH 不良预后的预测价值ROC曲线分析显示，血清sLOX-1、netrin-1 联合检测预测aSAH 预后不良的曲线下面积为0.923（95%置信区间为0.778～0.923；P＜0.001），敏感度和特异度分别为0.842和0.814，见图1。

3 讨论

10%～12%的aSAH 病人在就诊前已死亡，45%～50%的病人发病30 d 内死于并发症，而生存者大多遗留不同程度的神经功能缺损和认知功能障碍[12]，严重影响病人的生活质量。氧化低密度脂蛋白受体-1 属于E 类清道夫受体，可在氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，oxLDL）诱导下活化内皮细胞，引起内皮细胞及血管平滑肌细胞损伤、凋亡，介导巨噬细胞活化和活性氧簇生成，进而促进细胞泡沫化，引发血管功能障碍。sLOX-1可通过特异性结合、摄取ox-LDL 参与动脉粥样硬化的形成过程。动脉粥样硬化是影响颅内动脉瘤形成和破裂的重要危险因素。aSAH 病人血清sLOX-1 明显升高，对病人预后有预测价值[13]。Netrin-1 有调节引导轴突生长、细胞迁移和血管生成的作用。Netrin-1 还具有抗炎特性，可抑制内皮细胞和神经元细胞的凋亡。此外，netrin-1过表达可抑制Notch1信号通路改善缺血性脑损伤患者预后[14]。研究表明，血清netrin-1升高与缺血性脑卒中病人预后改善有关[15]。

LOX-1 主要存在于血管内皮细胞和平滑肌细胞，可通过介导ox-LDL 促进平滑肌细胞增殖和迁移，诱导细胞凋亡，加速动脉粥样硬化的进程；还可诱导内皮细胞产生基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP），引起sLOX-1 表达增加，促进动脉粥样硬化发展。MMP 分泌增多对颅内血管内皮细胞也有损害作用，可通过促进血管重塑，导致颅内动脉瘤的发生、发展。netrin-1可刺激脑血管内皮细胞的增殖和迁移，引起局灶性血管生成；还可通过激活其受体neogenin-1增强MMP 催化活性，促进细胞外基质的局部降解，导致动脉瘤的形成。本文结果发现，aSAH 病人血清sLOX-1 水平明显高于对照组，而血清netrin-1 水平明显低于对照组。这提示血清sLOX-1、netrin-1 与aSAH 发生、发展的病理过程有关。

本文结果还发现，预后良好的aSAH 病人血清sLOX-1 水平明显低于预后不良的病人，而血清netrin-1 水平明显高于预后不良的病人。这提示血清sLOX-1、netrin-1水平可反映aSAH病人的病情变化，可作为判断aSAH 病人预后的标志物。发病时，aSAH 病人脑血管组织氧化应激水平和活性氧的产生增加，LOX-l与oxLDL等配体相结合，增强血管局部氧化应激反应，从而加剧病情进展。血清netrin-1水平是反映aSAH病情严重程度、炎症和预后的潜在生物标志物[16]。血清sLOX-1 和netrin-1 是影响aSAH病人预后的独立危险因素，表明血清sLOX-1、netrin-1 变化与aSAH 临床预后结局有相关性。sLOX-1、netrin-1联合检测的AUC高于其单独检测，说明两者联合检测能明显提高aSAH 别人预后判断的准确性。

总之，血清sLOX-1 升高、netrin-1 降低是aSAH预后不良的重要危险因素，两者联合检测对aSAH预后具有较高预测价值。