右美托咪定对SAH后大鼠早期脑损伤的保护作用及机制探究

李红霞，肖 军，刘志杰，霍晓强，苏 春

（遵化市人民医院，河北 唐山 063000）

蛛网膜下隙出血（SAH）是一种严重的脑血管事件，通常伴有永久性脑损伤[1]。早期采取有效干预措施缓解脑损伤，改善预后是目前的研究重点，本研究通过实验室手段观察海马Ca1区椎体细胞形态和数目以及脑损伤蛋白表达水平反应脑损伤程度，探讨右美托咪定对SAH后大鼠脑损伤的保护作用。

1 资料与方法

1.1 实验动物与分组

32只清洁级成年SD大鼠（SPF大鼠）平均身长18.25f1.32 cm，购于广东省实验动物中心。随机均分为4组，分为假手术组（A组）、蛛网膜下腔出血（SAH）组（B组）、SAH+右美托咪定组（C组）和SAH+PD98059（ERK1/2抑制剂）组（D组）。

1.2 动物模型及标本制备

本研究采用血管内穿刺法制备SAH模型，通过灌注固定取脑法取得大鼠脑组织标本。

1.3 神经功能观察

评价指标主要包括食欲、运动和神经功能缺失3方面，见表1。

1.4 早期脑损伤观察

HE染色观察海马Ca1区神经元数目，免疫组化观察海马区神经元特异性烯醇化酶（NSE）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）和细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）水平。western blot比较海马区NSE、hs-CRP和ERK1/2阳性表达水平。Western blot操作常规裂解电泳，转膜、加抗体等步骤，转膜使用PVDF膜，抗体按1:3000比例稀释。

表1 实验动物神经功能、食欲和运动等行为学评分

1.5 统计学分析

本研究所有数据资料均采用SPSS 2.0进行统计学分析，计量资料采用（mean SD）表示，组间均数比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验法。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 SAH后大鼠神经功能和行为学观察

B、C、D组大鼠SAH后行为学评分均高于A组，其中B组大鼠SAH后行为学评分明显高于C组，但相对略低于D组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 各组大鼠行为学评分比较

2.2 海马Ca1区神经元数目比较

各组大鼠海马区神经元数目分别为A组142.24f2.65、B组70.61f3.05、C组87.29f3.21、D组61.06f3.14，B、C和D组均低于A组， B组明显低于C组，但相对略高于D组。

2.3 免疫组化结果比较

B、C和D组NSE和hs-CRP阳性率均高于A组，其中B组NSE和hs-CRP阳性表达高于C组且低于D组，但ERK1/2阳性表达低于C组（P均＜0.05）

2.4 western blot结果比较

hs-CRP蛋白B组阳性表达高于C组且低于D组；C组ERK1/2阳性表达在各组中最高，D组ERK1/2阳性表达率低于B组（P＜0.01）。

表3 各组大鼠脑组织蛋白表达比较

3 讨 论

蛛网膜下隙出血是一种致死率和致残率极高的脑血管病变，研究者发现，SAH后的早期脑损伤在SAH发生后的大脑神经损伤的发生有着重要的影响，减轻SAH后的早期脑损伤对于神经功能修复，改善预后，提高患者生存率和生命质量[2]。

右美托咪定是一种常用的α2受体激动剂，在神经系统疾病和损伤中发挥多重脑组织保护作用。研究发现右美托咪定可以通过降低大鼠体温、抑制炎症反应来减轻继发性脑损伤改善大鼠神学行为学评分[3]。相关研究表明，右美托咪定对包括SAH和缺血再灌注所致脑损伤有保护作用[4]。本研究显示，右美托咪定干预后，大鼠行为学评分得到了改善（均P＜0.05）。同时海马Ca1区神经元数目也明显的提高，提示右美托咪定对于SAH后大鼠大脑神经系统具有一定的保护作用。

ERK1/2蛋白与神经系统的发育和功能的有着密切关系，在周围神经系统发育过程中起着至关重要的作用[5]。研究表明，右美托咪定可以通过ERK1/2途径预防抑郁大鼠因电惊厥休克引起的学习和记忆障碍[6]。本研究结果显示，D组大鼠SAH后NSE和hs-CRP表达均发生了增加，但C组大鼠NSE和hs-CRP表达明显低于B、D两组。与B组比较，应用PD98059抑制ERK1/2激活的D组NSE和hs-CRP表达明显高于B组。既往研究通过建立大鼠缺血再灌注模型，证明右美托咪定可以通过促进ERK信号通路的转导改善缺血性脑损伤[7]。本研究结果与之前报道基本一致，提示右美托咪定可能是通过ERK信号通路的激活，改善SAH后大鼠脑组织免疫炎症反应，从而达到早期脑损伤的保护作用。

综上所述，右美托咪定可能是通过激活ERK信号通路，抑制SAH后大鼠脑组织免疫炎症反应，保护海马Ca1区神经元细胞，从而达到SAH患者早期脑损伤的保护作用。