血清IFN-γ、IL-2、EGF预测鼻咽癌患者放疗敏感性和预后的相关性分析

王海妮 陈安青

鼻咽癌是发生于鼻咽腔顶部及侧壁的恶性肿瘤，可引起耳闷堵感、鼻塞、听力降低等多种症状，明显危及患者生命安全。放射治疗是鼻咽癌的首选疗法，已有研究证实[1]放疗敏感性是影响鼻咽癌患者预后的独立危险因素。近年来，随着放疗技术的进步，鼻咽癌患者的预后已得到一定改善，但仍有部分患者放疗敏感性差。放疗耐受的机制复杂，目前缺乏准确预测鼻咽癌放疗敏感性的特异指标，机体多种因子可能和此类患者放疗抵抗有关[2]。干扰素-γ（IFN-γ）是具有广泛生物学活性的蛋白质，有抗病毒、抗肿瘤和调节机体免疫功能等多种作用，是机体防御系统的重要因子[3]。白介素-2（IL-2）是参与机体免疫应答的重要细胞因子，可抗肿瘤、抗感染，有研究报道IL-2可作为标志物监测多种恶性肿瘤临床治疗过程[4]。表皮生长因子（EGF）是表皮细胞的有效促分裂剂，参与细胞生长、增殖及转化等过程，促进肿瘤发生及生长[5]。尽管血清IFN-γ、IL-2、EGF在肿瘤领域的研究报道较多，但主要是细胞因子和肿瘤易感性关系，通过以上指标预测肿瘤放疗敏感性及预后的研究报道较少。本研究通过检测鼻咽癌患者血清IFN-γ、IL-2和EGF水平，分析其与患者临床病理特征、放疗敏感性和预后的关系。

资料与方法

1 一般资料 选取山东省青岛市市立医院2010年4月～2013年4月收治的86例鼻咽癌患者，入选标准[6]：经临床症状、体征、EB病毒学检查、镜检、影像学检查及细胞学、组织病理学检查确诊为鼻咽癌；预计生存时间超过3个月；卡氏评分超过60分，体力状况ECOG评分超过2分。排除标准：心肝肾等功能严重异常；远处转移，无法耐受放疗；接受哺乳期或者妊娠期。86例患者中男56例，女30例；年龄（25～74）岁。同期选择64例在我院门诊接受体检的健康者作为对照组，男43例，女21例；年龄（22～76）岁。两组性别、年龄比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

2 方法

2.1 治疗方法：鼻咽癌患者均接受鼻咽部和颈部根治性放疗，给予医用直线加速器，每周5次，每次（1.8～2）Gy，总量（66～76）Gy，持续照射的常规分割照射。鼻咽部总剂量为（6 600～7 600）cGy，（6～9）周。颈部淋巴结转移总剂量为（6 400～7 200 ）cGy，（6～7）周，颈部预防照射剂量总剂量为（5 000～6 000）cGy，（5～6）周。

2.2 资料收集：查阅所有研究对象的病例资料，记录性别、年龄、病理类型、分化类型、临床分期以及放疗前采用酶联免疫法检测血清IFN-γ、IL-2和EGF水平，试剂盒分别来自上海哈灵生物科技有限公司，上海研辉生物科技有限公司，上海研生实业有限公司。

3 观察指标

3.1 放疗敏感性评估[6]：鼻咽癌患者放疗结束后3个月复查鼻咽部MRI，根据肿瘤消退行气。评估肿瘤放疗敏感性。放疗敏感：MRI检查显示鼻咽部无明显软组织增厚、隆起或者鼻内镜检查显示鼻咽部黏膜光滑，无新生物隆起及黏膜糜烂，活检无癌细胞；放疗耐受：MRI检查可见鼻咽部软组织增厚明显，或者鼻内镜下发现鼻咽部黏膜局部粗糙隆起，新生物活检发生癌细胞。

3.2 随访情况：所有患者均予以门诊、电话等方式进行5年随访，入组日期为随访起始日期，随访结束、失访或者死亡为截止日期，记录患者5年生存情况。

4 统计学分析 应用SPSS18.0软件进行数据处理，计量资料用（）表示，选用独立样本t检验，计数资料用[(例)%]表示，用χ2检验比较，以Cox风险比例模型分析预后影响因素，绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析血清指标对鼻咽癌预后的预测价值，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 鼻咽癌患者血清IFN-γ、IL-2、EGF水平和临床病理特征的关系 鼻咽癌患者血清IFN-γ、IL-2、EGF水平在不同性别、年龄、病理类型、分化类型、临床分期中比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2 鼻咽癌组及对照组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较 鼻咽癌组血清IFN-γ、IL-2水平低于对照组，EGF水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

3 鼻咽癌患者放疗耐受组及放疗敏感组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较 鼻咽癌患者放疗敏感组血清IFN-γ、IL-2水平高于放疗耐受组，EGF水平低于放疗耐受组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

4 鼻咽癌患者生存组及死亡组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较 鼻咽癌患者生存组血清IFN-γ、IL-2水平高于死亡组，EGF水平低于死亡组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

5 鼻咽癌患者预后Cox比例回归分析 Cox比例风险模型显示，血清EGF水平及放疗敏感性是影响预后的危险因素，IFN-γ、IL-2为保护因素，见表5。

6 血清IFN-γ、IL-2、EGF对鼻咽癌患者预后的预测价值分析 根据鼻咽癌患者死亡组及生存组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平绘制ROC曲线，曲线上各点提示其不同水平，IFN-γ曲线下面积为0.719（95%CI为0.611～0.826，P＜0.001），敏感度和特异度分别为0.750和0.655；IL-2曲线下面积为0.773（95%CI为0.665～0.881，P＜0.001），敏感度和特异度分别为0.500和0.948；EGF曲线下面积为0.884（95%CI0.814～0.954，P＜0.001），敏感度和特异度分别为0.929和0.714；联合检测曲线下面积为0.937（95%CI为0.888～0.986，P＜0.001），敏感度和特异度分别为0.929和0.844，联合检测曲线下面积明显高于单个指标，见图1，表6。

表1 鼻咽癌患者血清IFN-γ、IL-2、EGF水平和临床病理特征的关系（）

表1 鼻咽癌患者血清IFN-γ、IL-2、EGF水平和临床病理特征的关系（）

临床特征 例数 IFN-γ（ng/L） t值 P值 IL-2（ng/mL） t值 P值 EGF（μg/L） t值 P值性别 0.699 0.485 1.105 0.272 0.768 0.444男56 30.79±5.80 4.44±0.69 3.38±0.48女30 31.65±4.65 4.61±0.66 3.46±0.42年龄（岁） 0.852 0.396 1.972 0.051 1.487 0.140＜50 52 31.49±4.91 4.38±0.78 3.35±0.48≥50 34 30.47±6.14 4.68±0.52 3.50±0.42病理类型 0.408 0.683 1.058 0.292 0.263 0.793角化性癌 21 31.51±4.09 4.36±0.70 3.38±0.40非角化性癌 65 30.95±5.82 4.54±0.67 3.41±0.47分化类型 0.115 0.908 0.983 0.328 0.545 0.586分化型 24 30.98±5.16 4.61±0.58 3.36±0.50非分化型 62 31.13±5.49 4.45±0.71 3.42±0.44临床分期 0.221 0.825 1.959 0.053 0.875 0.383Ⅰ～Ⅱ期 30 31.26±5.27 4.30±0.63 3.35±0.48Ⅲ ～Ⅳ期 56 30.99±5.46 4.60±0.70 3.44±0.44

表2 鼻咽癌组及对照组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较（）

表2 鼻咽癌组及对照组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较（）

组别 例数 IFN-γ（ng/L） IL-2（ng/mL） EGF（μg/L）鼻咽癌组 86 31.09±5.40 4.50±0.68 3.41±0.46对照组 64 42.11±6.06 8.75±1.45 2.06±0.30 t值 11.731 23.897 20.454 P值 0.000 0.000 0.000

表3 鼻咽癌患者放疗耐受组及放疗敏感组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较（）

表3 鼻咽癌患者放疗耐受组及放疗敏感组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较（）

组别 例数 IFN-γ（ng/L） IL-2（ng/mL） EGF（μg/L）放疗耐受组 35 26.05±5.07 3.76±0.44 4.00±0.53放疗敏感组 51 34.54±5.62 5.00±0.84 3.00±0.41 t值 9.683 11.708 12.552 P值 0.000 0.000 0.000

表4 鼻咽癌患者生存组及死亡组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较（）

表4 鼻咽癌患者生存组及死亡组血清IFN-γ、IL-2、EGF水平比较（）

组别 例数 IFN-γ（ng/L） IL-2（ng/mL） EGF（μg/L）死亡组 58 25.81±5.68 3.52±0.65 3.74±0.49生存组 28 31.95±4.82 6.53±0.74 2.71±0.39 t值 4.924 19.228 9 9.725 P值 0.000 0.000 0.000

表5 鼻咽癌患者预后Cox比例回归分析

讨 论

图1 血清IFN-γ、IL-2、EGF对鼻咽癌患者预后的预测价值分析

鼻咽癌为最常见的耳鼻咽喉恶性肿瘤，放疗是其主要治疗手段，通过放射性电离辐射作用损伤肿瘤细胞，多数患者对放疗敏感，是放疗效果最好的肿瘤之一，但仍有部分患者对放疗耐受导致放疗失败，是预后不良的主要原因[7]。放疗前敏感性的预测是放射生物学研究的热点及难点，可根据患者具体情况制定个体化治疗方案，提高患者疗效及生活质量，减少不必要的副反应[8]。相关研究报道[9]，某些因子在放疗敏感性方面有重要作用。

IFN-γ为同源性二聚体糖蛋白，主要来自于T细胞、NK细胞、巨噬细胞及B细胞，其和细胞表面受体结合后能够引起信号传导，发挥生物学功能。IFN-γ通过多种途径起到抗肿瘤作用，可激活巨噬细胞并增强其活性，提高免疫系统对肿瘤的杀伤力及清除能力，其作为内源性血管生成抑制因子，通过诱导多种物质的表达抑制血管生成，阻断肿瘤血管供应，阻滞肿瘤复发及转移[10]。IFN-γ可导致血管内皮细胞凋亡，出现出血性坏死，其浓度下降有利于肿瘤细胞的修复，产生射线抵抗。姜凤举等[11]研究报道，增加IFN-γ浓度可增加肿瘤放疗敏感性，出现辐射诱导生长延长，增加活性氧水平。本研究结果显示，IFN-γ表达和患者性别、年龄、病理类型等病理特征无相关性，和患者放疗敏感、预后密切相关，Cox比例回归发现IFN-γ是鼻咽癌患者预后的保护因素，ROC曲线分析也证实其对此类患者预后有较高的预测价值。

表6 血清IFN-γ、IL-2、EGF对鼻咽癌患者预后的预测价值分析

IL-2由Th1细胞分泌，是调节免疫应答的重要细胞因子，已有抵抗病毒、细菌感染，抑制肿瘤细胞增殖分化作用。有关研究发现[12]，IL-2通过促进T细胞增殖，诱导B细胞分泌抗体，提高T细胞杀伤作用，增强NK细胞活性，从而抑制肿瘤细胞活性作用。低浓度的IL-2和肿瘤的不良预后有关，此结论已在宫颈癌、肺癌等实体肿瘤研究中得到证实，可能和其浓度较低，免疫抑制较严重，从而增强肿瘤侵袭性[13]。IL-2浓度降低可导致免疫抑制，促进放疗后肿瘤细胞的修复，从而引起细胞对放射线形成抵抗。本研究结果发现，鼻咽癌患者血清IL-2水平明显低于正常者，放疗敏感组及生存组血清IL-2水平分别高于放疗耐受组及死亡组，说明鼻咽癌患者存在免疫监视功能降低，通过测定其水平有利于患者疗效及预后的评估。

EGF在肿瘤生长及分化中有重要作用，能够刺激细胞分裂和胚胎发生、组织修复及再生有密切关系。鼻咽癌为血管丰富的实体肿瘤，其发生发展中血管生成至关重要，是肿瘤生长及转移的基础，血管数目增加不仅加快肿瘤生长，且可增加血行转移危险性[14]。EGF可协同促血管生成作用，肿瘤血管生成和抑制因子及生成刺激因子之间的动态平衡有关。其中血管内皮生长因子（VEGF）与肿瘤血管生成及浸润转移有关，EGF可刺激血瓶平滑肌细胞诱导VEGFmRNA表达，从而利于肿瘤血管生成，促进肿瘤进展[15]。临床研究发现[16]，EGF过表达可引起肿瘤细胞放射抗拒，可能原因为放疗诱导的肿瘤细胞再增殖需依赖EGF，放射线激活EGF后能够促进肿瘤细胞增殖，抑制放射性所致的肿瘤细胞凋亡。本研究结果显示，鼻咽癌患者血清EGF水平显著高于正常者，且和放疗敏感性相关，预后分析中也发现其为鼻咽癌患者预后影响的独立危险因素。进一步分析ROC曲线显示血清IFN-γ、IL-2、EGF联合检测曲线下面积相对较高，说明联合测定对预后的预测价值更高，能够弥补单个指标的差异。但IFN-γ、IL-2、EGF是否可作为鼻咽癌患者放疗敏感性及预后的重要指标，需更多的研究证实。

综上所述，血清IFN-γ、IL-2、EG在鼻咽癌发生发展中有重要作用，其表达水平和鼻咽癌患者放疗敏感性及预后有关，可指导临床治疗方案的选择。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突