2019年雷山县羊绦虫、肺丝虫、肝片吸虫、捻转血矛线虫感染情况调查

王家培， 余四九， 王家鹏， 余秀伟， 潘 武

(1. 甘肃农业大学，甘肃 兰州 730070； 2. 贵州省黔东南苗族侗族自治州雷山县农业农村局，贵州 雷山 557100))

雷山县养羊历史悠久，目前主要饲养有黔东南小香羊、贵州黑山羊、贵州白山羊、黔北麻羊。据调查统计，2018年全县存栏羊3.8万只，其中黔东南小香羊3.1万只(占81.58%)，分布几乎覆盖全县。饲养方式主要以放养为主，多数养羊户对羊病尤其是绦虫病、肺丝虫病、肝片吸虫病、捻转血矛线虫病等寄生虫病的预防意识较淡薄。寄生虫病通常症状表现不明显，为慢性消耗性疾病，常导致产肉量不高，养羊经济效益低。为了解雷山县饲养羊群的寄生虫感染情况，2019年对雷山县羊绦虫(Moniezia)、肺丝虫(D.filaria)、肝片吸虫(Fasciola.hepatica)、捻转血矛线虫(Haemonchuscontortus)4种主要蠕虫开展调查，为防治提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 受检羊选择雷山县万城食品有限公司屠宰场中来自雷山县境内的羊286只作为调查对象。

1.1.2 主要试剂羊肺丝虫酶联免疫检测(ELISA)试剂盒、羊肝片吸虫酶联免疫检测(ELISA)试剂盒，南京森贝伽生物科技有限公司生产。

1.2 方法

1.2.1 寄生虫的调查和记录方法先调查待宰羊的来源，做好来自的乡镇和饲养模式(常年存栏数≥50只为规模场，常年存栏数<50只为散养户)等记录。被选为调查对象的羊先用无抗凝剂真空采血管颈静脉采血5 mL，填写相应标签后保存，然后屠宰取出内脏，分离各器官，按照先解剖时粪便观察和检测，然后粪便恒温培养检测和血清检测的顺序进行调查，做好相应记录。

1.2.2 绦虫检查及判断

1.2.2.1 检查方法和顺序(1)剖开胃和肠，肉眼观察内容物中是否有成虫或幼虫。(2)从胃的5个不同部位、小肠的3个不同段位和大肠的3个不同段位分别取出份量相当的粪便共100 g，混合后置于适量清水中，用玻璃棒将粪便搅拌均匀，静置沉淀10～20 min，弃去上清液，再于沉淀物中重新加入清水，重复5次，最后取部分沉淀物于黑色背景，肉眼或用放大镜进行观察。(3)将沉淀物在光学显微镜下进行观察鉴定。(4)按第2步取样法取粪便100 g，加上余下的所有沉淀物，加入适量水拌匀，放于培养皿中置37 ℃ 恒温箱中培养14 d后，再对培养物进行观察和检测[1，2]。上述4步观察和检测顺序中，只要其中1个步骤检查到绦虫或虫卵，即视为该羊感染绦虫；检测不到的视为该羊无绦虫感染。

1.2.2.2 成虫或幼虫的判断羊的绦虫主要是莫尼茨绦虫，其头节呈扁圆形，在虫体最前端有4个吸盘，头节后面的颈节部分不分节，再向后是由颈节生长出来的未成熟体节(可以看出一节一节的体节)，再往后就是成熟体节(形状近乎正方形)，虫体最后为含卵体节(长方形，内部充满虫卵)，全身呈乳白色或浅黄色，虫体长1～6 m，宽16 mm[1，3]。有的虫体静置3～10 min后可观察到轻微蠕动。

1.2.2.3 虫卵的判断在高倍显微镜下，绦虫卵一般呈无色或灰色的近圆形或三角形，直径50～60 μm。虫卵中央有一梨形体状的六钩蚴，内外胚膜分开，中间含有或多或少的液体，并有颗粒状内含物[4，5]。

1.2.3 肺丝虫检查及判断

1.2.3.1 检查方法和顺序用剪刀沿着喉部往肺部的气管和支气管切开，感染肺丝虫的气管和支气管内充有黄白色或红色黏液，其中含有很多伸直或呈团的虫体。如果解剖法没有检查到，再进行羊肺丝虫ELISA检测。

1.2.3.2 成虫或幼虫的判断虫体呈中间大、两端逐渐变小的棒状体，顔色多为乳白色，黑色肠管穿行于体内；口囊小而浅；雄虫长30～80 mm，交合伞末端分开，1对交合刺粗短；雌虫长50～112 mm，阴门位于虫体中部；幼虫的前端有纽扣状结节[1，4，6]。

1.2.3.3 虫卵的判断虫卵为椭圆形，大小为(40～60)μm×(20～25)μm，有的内含幼虫[3，5]。

1.2.3.4 羊肺丝虫ELISA判断如果肉眼和镜检都观察不到虫体，再对所采样的血液进行羊肺丝虫ELIAS 检测，检测呈阳性的判断为感染肺丝虫，呈阴性的判断为无肺丝虫感染。

1.2.4 羊肝片吸虫检查及判断

1.2.4.1 检查方法和顺序用剪刀沿着胆管切开，感染肝片吸虫病可观察到浅黄色的唾液样物及棕红色的新鲜活虫体。

1.2.4.2 成虫或幼虫的判断虫体为红色，呈扁平叶状，长20～35 mm，宽5～13 mm，其前端呈圆锥状突起，头锥基部变宽，形成肩部，肩部以后逐渐变窄。显微镜下可观察到体表生有许多小刺，前端有口吸盘，肩部水平线中部有腹吸盘；雌雄同体，2个分支状的睾丸前后排列于虫体的中后部，1个鹿角状分支的卵巢位于腹吸盘后方右侧，在卵模与腹吸盘之间为盘曲的子宫，内充满黄褐色虫卵[3，4，7]。

1.2.4.3 虫卵的判断虫卵呈椭圆形，黄褐色，长120～150 μm，宽70～80 μm；前端较窄，有一不明显的卵盖，后端较钝；在较薄而透明的卵内，充满卵黄细胞和1个胚细胞[3～5]。

1.2.4.4 羊肝片吸虫ELISA判断如果肉眼和镜检都观察不到虫体，再对所采样的血液进行羊肝片吸虫ELISA检测，检测呈阳性的判断为感染肝片虫，呈阴性的判断为无肝片吸虫感染。

1.2.5 捻转血矛线虫检查及判断

1.2.5.1 解剖检查感染捻转血矛线虫病羊的内脏显著苍白；胸、腹腔及心包积水；大网膜和肠系膜胶样浸润；肝脏呈浅灰色，质脆易烂；切开羊第四胃可观察到胃内容物呈浅红色，含有大量虫体，胃黏膜水肿，有虫体引起的伤痕和浅溃疡；雄虫长10～20 mm，为浅红色；雌虫长18～30 mm，可见红色的消化道和白色的生殖器相扭缠，形成红白相间的外观，阴门位于虫体后半部，有一拇指状阴门盖；虫卵呈卵圆形，淡黄色，长75～95 μm，宽40～50 μm[1，3，5，6，8]。

1.2.5.2 粪便培养检查如果上述检查观察不到虫体，则从第四胃的5个不同部位分别取出份量相当的粪便，混合置于适量清水中，用玻璃棒将粪便搅拌均匀，静置沉淀10～20 min，弃去上清液，再于沉淀物中重新加入清水，重复5次，最后取沉渣进行肉眼观察或镜检。如果仍观察不到，再将余下的沉渣和从第四胃的5个不同部位分别取份量相当的粪便，混合后放于培养皿中，置于37 ℃ 60%～70%湿度的恒温箱中培养7 d后，对培养粪便进行肉眼观察和镜检[1，2]。以上检测观察到虫体或虫卵者则视为该羊感染捻转血矛线虫，检测不到则视为该羊未感染捻转血矛线虫。

1.2.6 诊断和统计本次调查采用质量性状记录法进行定性记录，即无论采用哪种方法，只要观察或检测到有1个以上的寄生虫或虫卵以及ELISA方法检测呈阳性者，则诊断为感染了相应的寄生虫；如果都观察或检测不到者，则诊断为未感染相应的寄生虫；同时呈混合感染者也分别记录。所记录的数据采用质量性状计数法进行统计，换算为感染率(%)，然后进行差异显著性检验。

2 结果与分析

2.1 季节性感染情况由表1可见：绦虫每月均检查到；肺丝虫除7月份外，其他11个月检查到；肝片吸虫除1、7、9月份外，其他9个月检查到；捻转血矛线虫除1、2、7、11、12月份外，其他7个月检测到。从总体上看，4种寄生虫在雷山县羊群中均有感染。

表1 2019年各月4种寄生虫感染情况

2.2 不同虫体及不同养殖模式感染情况由表2可见：在调查的286只羊中，绦虫感染率最高(45.11%)，其次为肺丝虫(31.47%)、肝片吸虫(27.27%)，捻转血矛线虫感染率最低(18.18%)。绦虫与肺丝虫、肝片吸虫、捻转血矛线虫比较差异极显著(P<0.01)。肺丝虫与肝片吸虫、捻转血矛线虫比较差异不显著(P>0.05)。肝片吸虫与捻转血矛线虫比较差异极显著(P<0.01)。散养户与规模场比较，4种寄生虫感染率均较高，其中：绦虫、肺丝虫病、肝片吸虫差异极显著(P<0.01)，捻转血矛线虫差异显著(P<0.05)。

表2 4种寄生虫感染率统计

2.3 混合感染情况由表3可见：规模场中混合感染略高于单一感染，差异不显著(P>0.05)。散养户中混合感染明显高于单一感染，差异极显著(P<0.01)。 规模场的单一感染率极显著高于散养户(P<0.01)， 混合感染率差异不显著(P>0.05)。

表3 4种寄生虫混合感染统计

2.4 区域性感染情况由表4可见：4种寄生虫在8个乡镇都有感染。总体上乡镇内不同种寄生虫的感染率差异不显著(P>0.05)。各乡镇间同种寄生虫的感染率差异不显著(P>0.05)。

表4 4种寄生虫的区域性分布

3 结论

本次调查结果显示：绦虫、肺丝虫、肝片吸虫、捻转血矛线虫在雷山县养殖羊群中感染率均较高，其中散养户的感染率显著高于规模场；4种寄生虫呈混合感染的现象比较普遍。

4 讨论

4.1绦虫、肺丝虫、肝片吸虫、捻转血矛线虫对羊群危害极大，被称为羊的4大寄生蠕虫[1]。从调查结果分析，这4种寄生虫在雷山县养殖羊群中均有感染，原因主要是全县境内总体上属于中亚热带季风湿润气候，年均气温17～20 ℃，最高气温35.6 ℃，最低气温-8.9 ℃。近5年来全县无霜期270～351 d(2019年仅14 d有霜期)，年平均相对湿度80%，冬暖夏凉，且全县8个乡镇的气候差异不大，都适宜这4种寄生虫生存，全年均可感染羊，各乡镇间的感染率差异不显著。

4.2雷山县目前养羊模式均为放牧，病羊和健康羊直接和间接接触机会较大，寄生虫的感染概率也较大，同时也给羊群寄生虫混合感染提供了便利，往往是有1只羊感染寄生虫后，同群羊或邻近的羊群就会感染。

4.3从调查结果看，散养户寄生虫感染率明显高于规模场，说明规模场做了一些预防工作，但效果不好，而散养户基本没有进行寄生虫病的预防工作，因此规模场和散养户对羊寄生虫病的综合防治意识还有待提高。