15种免疫增效剂对鸡新城疫免疫效果影响的对比研究

田澍瑶，杨雨，胡玥，武志伟，张子卉，袁艳阳，李富桂

（天津农学院 动物科学与动物医学学院，天津 300384）

鸡新城疫（Newcastle disease，ND）是由副粘病毒引起、感染率和致死率高、对养鸡业危害严重的高度接触性、急性、烈性传染病[1-2]。最常用的预防方式是接种疫苗，为保证抗体效价达到期望的水平，疫苗常与免疫增效剂共同使用。免疫增效剂（immuneintensifiers）是一类具有增强疫苗保护力作用的物质，可提高畜禽机体的特异性和非特异性免疫应答能力，并有效控制畜禽疫病，保障畜牧业的健康发展[3-5]。应用免疫增效剂可以缩短免疫接种后达到保护抗体水平的时间或提高疫苗的抗体效价以减少因疾病造成的损失。免疫增效剂在禽类养殖及疾病防治方面显示出了越来越重要的作用[6-7]。为探究免疫增效剂对鸡新城疫免疫效果的影响，本试验选用常见的15种免疫增效剂进行对比性试验，以方便指导生产实践中最适宜免疫增效剂的选择。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物

160只23日龄健康、雄性北京油鸡，之前免疫过新城疫冻干苗1次。

1.1.2 试验试剂及免疫增效剂

鸡新城疫（ND）抗原（批号 20180406），购自北京中海生物科技有限公司；鸡转移因子（批号180508），天津市瑞普生物技术有限公司出品；牛转移因子（批号20180305），大连百利天华制药有限公司出品；猪转移因子（批号180501），天津市乐狮动保有限公司提供；猫干扰素（批号20180810），北京中科拜克生物技术有限公司出品；犬α干扰素（批号20180830），北京中科拜克生物技术有限公司出品；犬 γ 干扰素（批号20180709），北京中科拜克生物技术有限公司出品；康健灵（多糖）（批号20180604），广西南宁大动保生物科技有限公司生产；枸杞（批号20180411），天津百奥泰科技发展有限公司生产；灵芝（批号20180714），天津市东丽灵芝生产基地生产；黄芪注射液（批号20180205），正大青春宝药业有限公司出品；灵芝孢子粉（批号20180804），天津市东丽灵芝生产基地生产；脂多糖（批号20180716），购自北京索莱宝科技有限公司；四合一（转移因子＋胸腺肽＋干扰素＋免疫球蛋白）干扰素（批号 20180305）；1%鸡红细胞悬浮液，自制；ND-IB-EDS灭活油乳剂三联苗（批号20180308），黑龙江生药一厂出品。

1.2 试验方法

首先对全部试验鸡进行釆血，测定 ND抗体效价，然后在每只鸡颈部皮下注射ND-IB-EDS灭活油乳剂三联疫苗，并将160只试验鸡随机分成16组，1-15组为试验组给予不同的免疫增效剂1 mL，对照组口服等量生理盐水。在给药后第2、4、6、8、10、12、14、17、22、28天分别翅静脉采血，分离血清，采用微量HI试验检测ND抗体效价，并用SPSS软件进行差异显著性分析，与对照组比较其差异是否显著。

2 结果与分析

2.1 免疫后各组的新城疫 HI抗体效价检测结果及其差异显著性分析

采用SPSS 20.0软件对16组试验数据进行统计分析，数据以“平均值±标准误”表示，比较试验组与对照组抗体效价的差异性，0.01＜P＜0.05表示差异显著（肩标*），P＜0.01表示差异极显著（肩标**）。具体统计结果见表1。

表1 16组试验鸡的新城疫HI抗体效价显著性分析

2.2 免疫后鸡新城疫血凝抑制抗体效价变化结果

15种免疫增效剂在不同时间的 HI抗体效价变化见折线图1和图2。

图1 7种免疫增效剂在不同时间ND HI效价变化折线图

图2 8种免疫增效剂在不同时间ND HI效价变化折线图

2.3 结果分析

由图表可知，15种免疫增效剂在早期（4-12 d）时均对鸡 ND的免疫效果有增强作用[8-9]，抗体效价均高出1～2个HI抗体滴度。统计学分析结果表明：有 2种免疫增效剂在给药后第四天、有 6种在给药后第八天时与对照组相比均差异显著。但从效果、价格及方便使用等方面综合考虑，在养禽业生产实践中建议使用鸡转移因子[10]。

3 讨论

3.1 15种免疫增效剂的免疫效果比较

本试验中，脂多糖、康健灵（多糖）＋灵芝孢子粉、鸡转移因子、四合一干扰素、猪转移因子、犬γ干扰素和康健灵（多糖）对鸡新城疫免疫具有良好的增强作用[11-12]，在第四天和第八天即差异显著（0.01＜P＜0.05），高出对照组2个滴度左右并持续在高水平上；但到近第三周时抗体效价与对照组的差距在逐渐缩小；到第四周时几乎无差距。其他免疫增效剂虽然与对照组相比差异不显著，但却高于对照组1个效价滴度。说明这15种免疫增效剂均对ND疫苗有不同程度的免疫增效作用[13]。

3.2 免疫增效剂的临床使用

免疫增效剂的使用既提高了疫苗对动物机体的保护率，又可以联合抗生素等提高疗效，同时减少应激，还解决了疫苗和特异抗体应用范围窄的问题[7]。使用免疫增效剂的一系列优点让越来越多的免疫学家开始加强对免疫增效剂的研究，使其成为当代免疫学研究的热点之一。实践证明，免疫增效剂具有快速简便、经济实用等特点。目前，免疫增效剂广泛应用于免疫接种、疾病治疗和抗应激的生产实践中[14]。通过15种免疫增效剂对新城疫免疫效果影响的对比性研究，了解了各种免疫增效剂的免疫效果。综合考虑，在养鸡业生产中，使用免疫增效剂可以快速升高抗体效价，建议在家禽养殖业生产实践中首选鸡转移因子，其他珍禽也可选择脂多糖、康健灵（多糖）＋灵芝孢子粉和四合一干扰素等。研究结果证明，免疫增效剂与疫苗联合应用相较于单独使用疫苗有显著增强免疫效果的作用[15]。

3.3 试验条件调整以减少误差

为尽量减小试验误差，所有试验鸡的外界条件均一致，如饲喂、饮水，每隔1 d在每组内采相同数量的血样进行抗体检测。在微量 HI试验过程中，每个凝集板上均设有矫正抗原和空白对照，以免判定结果出现误差。