黄芪多糖、灵芝多糖和转移因子对犬瘟热免疫效果的影响

孙康迪，柳青云，方咏青，程子凯，李富桂

（天津农学院 动物科学与动物医学学院，天津 300384）

犬瘟热俗称犬瘟、狗瘟，是由犬瘟热病毒引起的一种高度接触性传染病，传染性强，传染率可高达 80%以上。临床上以双相体温升高、急性鼻卡他和随后的支气管炎、卡他性肺炎、严重胃肠炎和神经症状为特征。犬瘟热最早被发现于18世纪后叶，1905年卡尔（Carre）发现其病原为一种病毒，所以此病也曾被称为 Carre病。我国于1980年首次分离获得此病毒。犬瘟热是对当前养犬业和毛皮动物养殖业危害最大的疫病之一。

免疫促进剂又称免疫增效剂或免疫增强剂，能增强或调节机体体液免疫和细胞免疫的作用。黄芪多糖在抗肿瘤和抗感染方面具有显著的免疫调节作用[1]。灵芝多糖具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、解毒、抗病毒、抗细菌、抗辐射等广泛作用[2]。转移因子作为机体白细胞中有免疫活性的T淋巴细胞所释放的一种能够转移免疫致敏信息的因子，能特异性和非特异性地增强受体的免疫应答能力[3]。为探究免疫促进剂对犬瘟热（CDV）免疫效果的影响，本试验选用转移因子、黄芪多糖和灵芝多糖3种免疫促进剂，通过（CDV-Ab）ELISA试剂盒测定犬瘟热抗体效价，比较试验组与对照组免疫效果的差异，从而筛选出临床上与预防犬瘟热疫苗联合使用的最佳免疫促进剂。

1 材料

1.1 试验动物

12只体型均等的2月龄健康幼犬，购于天津某狗场，免疫过1次国产五联苗。

1.2 疫苗及试剂

美国辉瑞的卫佳捌疫苗（20180305）；转移因子（20180508）；黄芪多糖（商品名免疫多肽20180706）、灵芝多糖（商品名免疫多糖膏20180608），均由天津农学院兽医病理学实验室提供；犬瘟热ELISA试剂盒（批号20181216），购自上海恒远生物科技有限公司。

2 方法

2.1 试验动物分组与给药

每条犬采血后皮下注射美国辉瑞的卫佳捌八联疫苗，然后将12只犬随机分为4组，每组3只，即A、B、C组为转移因子组、黄芪多糖组、灵芝多糖组，D组为对照组。

免疫后，A组每只犬口服1 mL转移因子；B组每只犬口服0.1 g/mL黄芪多糖；C组每只犬口服1 mL灵芝多糖；D组每只犬口服1 mL生理盐水。

2.2 抗体效价检测

使用犬瘟热病毒抗体（CDV-Ab）ELISA试剂盒对犬瘟热的抗体效价进行测定，并制图分析。

2.3 统计学分析

采用 SPSS 20.0 软件对试验数据进行统计分析，试验数据以“平均值±标准误”表示，采用单因子方差分析进行均值间多重比较，比较试验组与对照组抗体效价的差异性，0.01＜P＜0.05表示差异显著，P＜0.01表示差异极显著。

3 结果

3.1 犬瘟热抗体效价检测结果

由表1可知，转移因子组和黄芪多糖组在第二天采血时，抗体效价就与对照组有显著差异，且一直保持增长趋势，在第四天采血时抗体效价与对照组有极显著差异；灵芝多糖组在第四天采血时，抗体效价就与对照组有极显著差异。由以上结果可以得出，转移因子的免疫促进效果最佳，其次是黄芪多糖、灵芝多糖。

表1 犬瘟热抗体效价变化及其差异性分析

3.2 试验组与对照组在不同时间抗体效价的变化

未使用免疫增效剂的对照组在第四天采血时，增长速度比较缓慢，与A、B、C 3组显示出明显差异。A、B、C 3组试验组均在第六天时抗体效价达到最高，之后与对照组一样，抗体效价逐渐降低，见图1。

图1 各组抗体效价的变化

4 讨论

本试验中转移因子、黄芪多糖、灵芝多糖均对犬瘟热病毒免疫具有增强作用，但转移因子的免疫增强效果优于黄芪多糖，黄芪多糖优于灵芝多糖。刘霞等在转移因子对家禽疫病防控的应用中阐明，转移因子是动物白细胞中具有免疫活性的 T淋巴细胞所释放的具有免疫功能的透析物质[4]。鲍玉林等在研究黄芪多糖对舍饲藏羊生长性能和免疫功能的影响中证实，黄芪多糖能显著提高舍饲藏羊的生长性能和免疫功能[5]。李琴等证实了黄芪多糖对血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的作用[6]。陈文华等阐明了灵芝多糖在抗肿瘤、调节免疫、抗糖尿病、保护肝脏、保护心肌细胞、抗癫痫、抗辐射等方面起作用[7]。成杰等研究发现，转移因子（TF）在临床上对活疫苗和油乳剂灭活苗均有很好的协同作用，能增强机体细胞免疫，促进抗体快速产生和高峰期的维持，提高疫苗抗体滴度，可通过半透膜，不被胃蛋白酶、胰蛋白酶、DNA酶、RNA酶等分解[8]。李磊等阐明，中药免疫增效剂低毒、无残留、无污染且在提高动物免疫力、增强动物抗病性等方面具有重要的应用价值[9]。王奇等证实免疫增强剂具有增强免疫系统功能、提高机体抗病能力的作用，从而使动物健康生长[10]。杨美璐等证实，灵芝多糖具有增强免疫力、抗氧化、抗肿瘤、降血糖和降血脂等功效[11]。路德成证实不同添加水平的黄芪多糖均能改善新城疫疫苗的免疫效果[12]。郑新新等证实黄芪多糖在体内外均具有显著的免疫调节作用[13]。以上研究均表明，免疫增效剂具有广阔的应用前景。本试验发现转移因子、黄芪多糖、灵芝多糖对犬瘟热病毒疫苗免疫具有显著的增强作用，为进一步防控该病提供了参考依据。