温度对暴马丁香中齐墩果酸提取的影响

贲佳楠，张馨心，宫福帅，秦佳梅

（通化师范学院·吉林通化·134002）

暴马丁香主要分布在我国的三北地区，东北是主产区[1]，是一种综合利用率极高的树种[2～4]。树皮入药称暴马子皮，具有止咳平喘、清肺化痰等功效，广泛用于岑暴红止咳片或胶囊的生产[5]。含多种药用活性成分[6，7]，其中齐墩果酸具有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿、降血糖、降血脂、镇静的作用[8]。还有诱导肿瘤细胞分化和凋亡、抑制肿瘤细胞的生成和转移等作用[9]。是治疗心脑血管和癌症方面疾病的是重要原料之一。因其结构复杂，不易人工合成，只能从植物中提取[10]。因此，本实验将探究温度对超声提取暴马丁香中齐墩果酸提取的影响，为了更好地利用和保护暴马丁香资源提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

供试材料为2017年11月26日采自吉林省白山临江的暴马丁香的干皮和2018年5月13日采自同地暴马丁香的枝条、叶片，将干皮和枝条剪成1～3cm小段，装入尼龙纱袋中晾晒，叶片于室内阴干。用FZ102型植物粉碎机粉碎，过40目筛，装袋、标识，备用。原植物经通化师范学院生命科学学院植物教研室秦佳梅教授鉴定为暴马丁香 [Syringa reticulata（BL.）var.mandshurica(Maxim.)Hara]。

1.2 试剂

齐墩果酸标准品购自上海金穗生物医药有限公司，纯度≥98%；乙醇、甲醇、香兰素、浓硫酸等化学试剂均为分析纯；纯净水。

1.3 方法

1.3.1 标准曲线的绘制

用BS210S型电子天平精密称取0.006g齐墩果酸标准品，置于5mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀。分别精密量取 20、40、60、80、10、120μL 的标准品溶液分别置于6个不同的试管中，于PC-1000型数显式电热恒温水浴锅中加热，挥干甲醇。取出放冷，分别向6个试管加入8%香草醛—乙醇溶液0.5mL和72%的浓硫酸5mL，摇匀，放置至管壁无残留液。将各试管置于60℃恒温水浴上加热10min，取出立即冷水浴15min。用721E型分光光度计于540nm处测吸光值[10]。以齐墩果酸质量浓度（X，mg/L）为横坐标、吸光值（Y）为纵坐标，进行线性回归，结果见图1，得回归方程为：Y=0.027x+0.1179，R2=0.9996＞0.999， 表明齐墩果酸的质量浓度在4.4～26.1mg/L范围内线性关系良好。

图1 齐墩果酸标准曲线

1.3.2供试溶液制备

分别精密称取1.0g试材，按液料比为20∶1加入70%的乙醇，置于超声波清洗机中用300w超声频率[11]，分别在 30、40、50、60、70℃的温度条件下， 超声提取30min，放冷至室温，加入70%乙醇补足重量，摇匀，过滤。精密量取续滤液10mL，加水15mL，置水浴上蒸去乙醇和水。残渣加甲醇适量使其溶解，转移至10mL量瓶中，并加甲醇稀释至刻度摇匀，作为供试品溶液。三次重复。

1.3.3 提取样品的测定

将1.3.2供试样品溶液，按标准曲线1.3.1项下方法测吸光值，代入标准方程计算。

1.4 数据处理

本实验得出数据均利用DPSV7.05版及Excel进行处理分析。

2 结果与分析

2.1 不同温度对暴马丁香枝条中齐墩果酸提取的影响

表1 不同温度对暴马丁香枝条中齐墩果酸提取结果

表1结果表明，在提取温度为30～50℃时，提取的齐墩果酸随温度的升高而增大，50℃条件下提取的齐墩果酸含量达2.7533%。但继续增加温度，提取的齐墩果酸含量则降低。在5%水平，50℃和60℃之间差异不显著，且50℃条件下的与其他温度条件的差异均达到显著水平。在1%水平，50℃条件下的只与30℃之间达极显著差异，与其他条件之间的差异不显著。

2.2 暴马丁香叶、枝条、树皮中齐墩果酸的含量测定

依1.3.2方法，选50℃提取测定，结果见表2。枝条中的齐墩果酸含量最高，为2.9993%。其次为干皮的，达2.1951%。最后为叶片的，为1.9885%。

表2 白山临江暴马丁香叶，枝条，皮中齐墩果酸的含量

3 结论与讨论

3.1 暴马丁香中齐墩果酸提取条件

目前齐墩果酸的提取方法研究较多的是醇提法和水提法，本实验通过超声辅助提取法，方法简单、时间短，可用于批量生产。在其他超声条件不变的情况下，超声温度为50℃时提取效果最佳。

3.2 资源利用

齐墩果酸广泛存在于多种植物中，如龙芽檧木[11]、木瓜[12]、女贞子[13]、凌霄花[14]等。高晓洁等（2018）[15]对浙产6种威灵仙类药材中齐墩果酸的含量进行测定，结果为威灵仙、扬子铁线莲、粗齿铁线莲、毛蕊铁线莲、柱果铁线莲中齐墩果酸含量分别为0.381%，0.172%，0.395%，0.00184%，1.70%。而本实验中检测暴马丁香枝条中含量最多高达2.9993%。暴马丁香不同部位齐墩果酸含量为枝条＞干皮＞叶。与王化[16]等（2015）采用RP-HPLC法测定暴马丁香中齐墩果酸的的含量结果一致。对暴马丁香枝条的利用可不剥皮，直接用于提取。