磁化水培养淡褐奥德蘑菌丝提升运动耐力的原理分析*

孙群群

（黔南民族师范学院，贵州 都匀 558000）

淡褐奥德蘑（Oudemansiella canarii）又称热带小奥德蘑、“奥德京菇”等[1]。淡褐奥德蘑通体呈灰白色、褐色或淡褐色，褶缘粗糙、菌柄常弯曲。与宽褶菇十分相似，最明显的是淡褐奥德蘑菌褶边缘有暗褐色颗粒。野生多淡褐奥德蘑生长于在林中腐木，在我国黑龙江、海南和吉林等地都有分布，奥德蘑属有30多个品种，大多数品种都可以食用。淡褐奥德蘑是一种近年来才人工驯化的野生新菌种[2]，富含蛋白质、膳食纤维、矿物质和维生素，而且菌肉肉质细嫩、菌柄清脆味道鲜美，是一种不可多得的新型食用菌。除食用外，淡褐奥德蘑还含有一些乙酸乙酯、蘑酮和粘蘑菌素等物质，具有抑菌、抑制人体淋巴细胞、癌细胞和肿瘤细胞生长的功效[3]，在国内消费升级和食用菌产业转型的重要时期，发展淡褐奥德蘑的驯化人工栽培，挖掘其食药用价值具有十分广阔的市场前景。以淡褐奥德蘑为研究对象，研究磁化水对淡褐奥德蘑的生物学效应，并就淡褐奥德蘑对运动能力的影响开展研究。

1 材料与方法

1.1 菌种试剂

淡褐奥德蘑菌株，由北京市农林科学院植物保护环境保护研究所提供。

试验所需试剂：邻苯三酚、硫酸亚铁、水杨酸钠，天津市天力化学试剂有限公司；盐酸、双氧水、磷酸氢二钠、氢氧化钠、蒸馏水等，洛阳市化学试剂厂。以上试剂均为国产分析纯。

1.2 仪器设备

DMJA-GC东磁加爱磁化器，最大磁化能力8 000 GS，由横店集团东磁股份有限公司生产。将纯净水经磁化器的磁场通道，循环磁化30 min得试验用磁化水。

FA2004电子天平，上海精密科学仪器有限公司；HH-S21-4型电热恒温浴锅，上海圣科仪器设备有限公司；101-1型电热恒温干燥箱，上海实验仪器总厂；7230G型可见分光光度计，上海精密科学仪器有限公司。

1.3 培养基及培养方法

培养基[4]：马铃薯100 g、琼脂10 g、硫酸镁0.5 g、硫酸钙0.5 g、葡萄糖10 g。以上材料加纯净水500 mL得马铃薯培养基，为空白对照组（CK）；加磁化水500 mL得磁化培养基，为试验组。于恒温箱（25±2）℃中设置2周，制成试验用培养基。

2 磁化水对淡褐奥德蘑菌株生长的影响

2.1 不同培养基的影响

在试验组培养基上接种4 mm2的淡褐奥德蘑菌块，共5个重复；对照组（CK）也接种等量菌块。将接种好的6组菌种置于恒温箱（25±2）℃培养5 d，每天观察菌丝增长量和长势，测量菌丝体生长速度，菌丝生长速度（V，%）的计算公式为：

式中：S为菌丝总增长量（mm），以菌落边缘增长长度为准；D为培养天数（d）。

试验结果如表1所示。

表1 淡褐奥德蘑菌丝体生长速度比较Tab.1 Comparison of mycelial growth rate of Oudemansiella canarii

由表1可以看出，淡褐奥德蘑菌株在不同培养基上的生长速度和长势表现出了很大的差异性。5个磁化水试验组与对照组相比，长势均好于对照组。第2组长势最好，菌丝生长速度最高为6.20 mm·d-1，与对照组相比增长率为27.0%。而5组平均菌丝生长速度为6.11 mm·d-1，平均增长率为25.2%。肉眼观察淡褐奥德蘑菌株菌丝体的生长状态，5个试验组外观上明显更稠密，与对照组相比生长更加茂盛。菌丝生长速度加快的原因分析可能是由于通过磁化后的水分子密度加大，表面的分子亲和度加大，吸引了更多的氧分子，从而加快了菌株细胞的新陈代谢，从而促进了菌丝细胞分裂生长速度。

2.2 不同磁化强度的影响

为了验证上述猜想，探讨磁化水对淡褐奥德蘑菌株的生物学效应，采用不同磁化强度的水制备马铃薯培养基对淡褐奥德蘑菌株菌丝生长情况进行试验。

采用磁化器对500 mL纯净水进行磁化，分5组进行，循环磁化时间分别为30 min、60 min、90 min、120 min、150 min，对应的理论磁化强度分别为0.1 T、0.2 T、0.3 T、0.4 T和 0.5 T。配制马铃薯基础培养基5组，分别5组不同磁化时间的磁化水作为试验组，对照组用500 mL纯净水代替磁化水。均接种等量淡褐奥德蘑菌块培养5 d，每天记录菌丝增长量，按式（1）计算菌丝生长速度。试验结果如表2所示。

由表2可以看出，0.3 T组的磁化水菌丝生长速度最高达6.84 mm·d-1，与对照组相比增长率最高达39.0%。虽然5组磁化水的平均菌丝生长速度为5.98 mm·d-1，均高于对照组的4.92 mm·d-1，前面0.1 T、0.2 T、0.3 T组菌丝生长速度呈稳步上升趋势，说明磁化的生物学效应表现良好，适当增加磁化强度能够加快菌丝的生长速度，表现出了正生物学效应。原因可能是磁化提高了菌丝细胞的携氧能力，提高了菌丝细胞壁的渗透性，从而使细胞获得了更多的氧和其它微量元素，促进了细胞分裂生长。但继续加大磁化强度后，在0.4 T组和0.5 T组，菌丝生长速度总体呈下降趋势，特别是最后一组0.5 T组增长率仅为0.4%，与对照组几乎没有差异性，说明过高的磁场对淡褐奥德蘑菌株的生长没有太多的生物学效应，不能促进菌丝的生长。分析其原因可能是磁场过大，已经破坏了菌丝细胞壁，干扰了细胞的正常生长，或是过大的磁场强度直接杀死了部分菌丝细胞，抑制了菌丝生长。

表2 不同磁化强度对淡褐奥德蘑菌丝体生长速度的影响Tab.2 Effect of different magnetization on the growth rate of Oudemansiella canarii mycelium

3 淡褐奥德蘑还原力测定

将接种的淡褐奥德蘑菌种正常培养成熟后采摘（从接种到子实体成熟约30 d～40 d），经清净、晾干、切片后在80℃下烘箱中烘干60 min，上粉碎机制成粉，过80目筛，得淡褐奥德蘑粉末备用。配制不同浓度的淡褐奥德蘑样品溶液，取8只洁净试管编号，精确秤取 0、0.02 g、0.04 g、0.06 g、0.08 g、0.10 g、0.12 g、0.14 g 淡褐奥德蘑粉末 8 份，各加入 5.0 mL乙醚溶解，配制成浓度为 0、4 mg·mL-1、8 mg·mL-1、12 mg·mL-1、16 mg·mL-1、20 mg·mL-1、24 mg·mL-1、28 mg·mL-1的样品溶液。分别吸取不同浓度的样品溶液 2.5 mL 加入 0.2 mol·L-1pH 6.6 的磷酸缓冲溶液2.5 mL和 1%的铁氰化钾2.0 mL，混匀后50℃水浴20 min，冷却后加入10%FeCl32.5 mL。然后以4 000 r·min-1离心10 min，取上层清液5.0 mL，加蒸馏水 5.0 mL 和 0.1%FeCl31.0 mL，待充分混合反应10 min，以蒸馏水为参照，于700 nm处测定吸光度，吸光度越大则说明还原力越强，试验结果如表3。

表3 不同浓度的淡褐奥德蘑还原力测定Tab.3 Determination of reducing power of Oudemansiella canarii with different concentrations

由表3可知，淡褐奥德蘑的还原能力随浓度的增大开始是增加的，但后来还原能力有所下降。

4 淡褐奥德蘑抗氧化性能的测定

通过测定羟自由基含量来对淡褐奥德蘑抗氧化性能进行测定，其原理是根据Fenton反应原理，过氧化氢与二价铁混合产生·OH，后者反应活性高，存在时间短，加入的水杨酸能与·OH生成在510 nm处有强吸收的有色物质，若加入的样品有抗氧化性就会与水杨酸形成竞争，使有色物减少，吸光度降低，即在此波长下可以测出·OH的生成情况，进而检测出样品氧化的抗活性。在2.0 mL不同浓度的淡褐奥德蘑样品溶液中加入依次加入6 mmol·L-1硫酸亚铁溶液1 mL、水杨酸2.0 mL和6 mmol·L-1氧化氢溶液2 mL过氧化氢溶液6 mmol·L-1，40℃水浴保温，30 min后在500 nm处测吸光度，用2 mL蒸馏水代替过氧化氢溶液测定本底吸光度，进行3个平行试验，取其平均值作为试验结果，试验结果以清除率E表示，清除率（E，%）的计算公式为：

式中：A1为样品吸光度；A2为本底吸光度；A0为空白。

淡褐奥德蘑清除羟自由基的试验结果如图1所示。

由图1可知，随着淡褐奥德蘑样品溶液浓度增加，清除率不断上升，浓度达到12 mg·mL-1时，清除率达到最大值41.6%，随后不断下降，当样品溶液浓度达到约22 mg·mL-1后清除率甚至出现了负值，这说明淡褐奥德蘑清除羟自由基时浓度在12 mg·mL-1左右时清除效果最好，超过这一浓度清除效果反而降低，浓度过高反而会促进羟自由基的生成。

5 结论

淡褐奥德蘑是一种新型的食用菌，其食（药）用价值还有待进一步挖掘。目前对于其生物学效应的研究还比较少，本文中针对磁化水对淡褐奥德蘑的生物学效应进行了研究，结果表明磁化水对淡褐奥德蘑菌丝体生长有一定的影响，磁化水能促进菌丝细胞分裂生长，加快菌丝体的生长速度，适当增加磁化强度能够加快菌丝的生长速度，呈现正生物学效应。磁化生物学效应可以缩短淡褐奥德蘑的制种时间和生长周期。但过大的磁化强度会对菌丝生长产生抑制作用。

淡褐奥德蘑对运动能力的影响主要表现在其具有一定的还原能力和抗氧化性，一定浓度的样品溶液可以清除机体自由基，减少自由基对人体细胞的氧化，减少人体组织细胞的非正常损耗，促进新陈代谢从而延缓运动性疲劳。还原能力表明了淡褐奥德蘑这种抗氧化剂具有的活性，可以加快运动能力的恢复，增加运动耐力。

试验结果可以作为人工栽培淡褐奥德蘑的参考。受研究条件限制，菌种磁化的机理尚不太清楚，有关淡褐奥德蘑其它的生物学效应的作用机理和对运动能力的具体影响还需后期进一步研究。