济南地区自然人群幽门螺杆菌感染情况及其免疫分型研究

韩玉刚,崔云朋,李 静,田伟田,曲辉临△

1.山东电力中心医院检验科，山东济南 250001；2.山东省职业卫生与职业病防治研究院，山东济南 250002

幽门螺杆菌(Hp)是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的革兰氏阴性杆菌[1]。Hp定居于人胃黏膜上皮，感染率在发达国家可达50%，发展中国家甚至更高，是慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关性淋巴组织淋巴瘤以及胃腺癌等疾病发病机制中的重要因素[2]。1994年，国际癌症研究署将Hp感染定为Ⅰ类致癌原[3]。为了解济南地区Hp感染情况，本研究采用免疫印迹法对2 557例于山东电力中心医院进行健康体检的济南地区居民进行Hp免疫分型检测，以明确不同年龄、性别自然人群的Hp感染率及其表型的分布特征。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年1-12月于山东电力中心医院接受健康体检者2 557例为研究对象，其中男1 775例，女782例；年龄19～91岁，平均(49±13)岁。所有受检者根据年龄分为5组，其中<30岁组187例、30～<40岁组487例、40～<50岁组759例、50～<60岁组625例、≥60岁组499例。

1.2仪器与试剂 Hp抗体分型检测试剂盒(免疫印迹法)由深圳伯劳特生物制品有限公司提供。

1.3方法 受检者采集静脉血3 mL，分离血清，采用免疫印迹法进行检测，操作过程严格按照说明书要求。将试剂盒从冰箱取出室温平衡10～15 min，在放有印迹膜的反应槽中加入应用液和待检血清，置摇床上室温摇动30 min，弃去反应槽液体，加入洗涤应用液反复洗涤3次，加入酶联试剂后室温摇动30 min，弃去反应槽液体，加入洗涤应用液反复洗涤3次，加入显色剂置摇床上室温摇动5 min，显色；待阳性带显色清晰，蒸馏水冲洗3次终止反应，将印迹膜上的显色区带与试剂盒提供的标准区带进行比较，检测细胞毒素相关蛋白[CagA-116 000(116 000为相对分子质量，其他抗体类同)]、空泡毒素A(VacA-95 000和VacA-91 000)、尿素酶A(UreA-30 000)和尿素酶B(UreB-66 000)水平。相关抗体显色程度低于质控带判断为阴性，反之则为阳性。

分型判断标准，(1)Hp Ⅰ型：仅CagA、VacA任意一种或两种抗体同时阳性；(2)Hp Ⅱ 型：仅UreA和UreB任意一种或两种抗体同时阳性，而CagA、VacA抗体为阴性；(3)Hp阴性：CagA、VacA、UreA和UreB抗体均为阴性[4]。

1.4统计学处理 采用SPSS17.0软件进行数据分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1不同性别受检者Hp感染情况 男、女Hp总感染率分别为56.4%和59.6%，差异无统计学意义(P>0.05)；男、女Hp Ⅰ型感染率分别为33.5%和35.8%，Hp Ⅱ型感染率分别为56.1%和59.2%，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2不同年龄受检者Hp感染情况 Hp总感染率为57.4%，其中Hp Ⅰ型感染率为34.2%，Hp Ⅱ型为57.0%。感染率最高为50～<60岁组，为61.1%，其中Hp Ⅰ型为35.8%，Hp Ⅱ型为61.0%；<30岁组Hp感染率为48.1%，其中Hp Ⅰ型为30.5%，Hp Ⅱ型为47.1%，为感染率最低组。Hp Ⅰ型感染率在各年龄组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。40～<50和50～<60岁组的Hp总感染率和Hp Ⅱ型感染率与<30岁组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3不同年龄组Hp免疫分型阳性率比较 同一年龄组中，均以UreA-30 000抗体阳性率最高，各年龄组分别为96.7%、97.0%、98.5%、99.0%、96.1%；以VacA-91 000抗体阳性率最低，各组分别为43.3%、47.3%、46.2%、40.8%、43.1%。同一年龄组中，其他各型抗体阳性率与UreA-30 000阳性率比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；而不同年龄组同一免疫分型的阳性率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表1 不同性别受检者Hp感染情况[n(%)]

注：Hp Ⅰ型阳性和Hp Ⅱ型阳性者中包括二者均为阳性者。

表2 不同年龄组受检者Hp感染情况[n(%)]

注：Hp Ⅰ型阳性和Hp Ⅱ型阳性者中包括二者均为阳性者；与<30岁组比较，*P<0.05。

表3 不同年龄组Hp免疫分型阳性率比较[n(%)]

注：与同一年龄组UreA-30 000比较，*P<0.05。

3 讨 论

Hp是一种微需氧革兰阴性菌，与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌的发生密切相关[2-4]，我国Hp感染率较高，但各地报道的感染率不同，引起的病变程度也不同。部分患者感染后仅表现为胃炎或无明显胃部病变，而部分患者可表现为消化性溃疡甚至胃癌[5-7]。究其原因，除了患者个体差异、胃黏膜损伤等因素外，Hp的不同毒力因子在Hp的致病性中也发挥着重要作用[8]。

Hp有多种毒力因子，目前研究最多，且与严重胃部疾病相关的两种毒力因子为CagA和VacA。CagA是Hp Cag致病岛上CagA基因的编码产物，是一种致癌蛋白，也是Hp感染导致宿主产生炎性反应的重要效应蛋白，可诱导上皮细胞产生IL-8、激活NF-κB信号通路、重塑细胞骨架及参与细胞基座的形成，通过细胞信号转导引起胃黏膜上皮细胞增殖及萎缩，与消化性溃疡和胃癌的发生密切相关[7-8]。VacA是除CagA外被广泛研究的毒力因子，其可通过诱导胃黏膜上皮细胞空泡化、引起线粒体释放细胞色素C导致细胞凋亡、引发促炎性反应并结合细胞膜受体等多种作用，导致定植部位胃黏膜上皮细胞损伤[7]。Hp尿素酶作为Hp的定植因子和毒力因子，在Hp感染过程中起发挥着特殊作用。尿素酶不仅存在于Hp的细胞质中，还是Hp主要的细胞膜表面蛋白，在Hp血清学检测中是主要的标志性抗原之一，Hp尿素酶由多个亚单位构成，其中UreA-30 000和UreB-66 000能使机体产生较强烈的免疫应答，并生成相应的抗体[9]。

目前Hp按是否表达CagA和VacA分为两型：Ⅰ型为致病性较强的产细胞毒素菌株[CagA和(或)VacA阳性]；Ⅱ型为毒性较弱的不产细胞毒素菌株(CagA和VacA阴性)，这类菌株感染后一般只引起慢性浅表性胃炎或无临床表现。Hp感染后特异性地定植于胃上皮细胞并在局部增殖，刺激机体产生炎性反应及免疫反应，产生可检测的全身性抗体，且具有其特异性，如CagA与相对分子质量为128 000和116 000的免疫区带相关，而VacA则对应相对分子质量为95 000和91 000的区带。因此通过免疫印迹法对Hp进行免疫分型检测，有助于判定感染Hp的不同致病类型，对Hp感染患者的跟踪与治疗有重要意义。

国内外研究表明，Hp感染与社会经济、卫生状况等密切相关，Hp的感染率在发达国家为30%～50%，我国自然人群Hp感染率在50%以上，且经济条件落后、卫生条件差的地区感染率更高[9]。Hp的检测方法包括组织学检测、快速尿素酶检测、核素标记的尿素呼气试验、免疫印迹法及分子生物学检测等方法，其中免疫印迹法具有简便、快捷、重复性好的优点，尤其适合于大规模的体检及流行病学调查。本研究对济南地区2 557例于山东电力中心医院进行健康体检的自然人群进行了Hp及其免疫分型检测，结果显示Hp总感染率为57.4%，男、女分别为56.4%和59.6%；其中Hp Ⅰ型为34.2%，Hp Ⅱ型为57.0%。本研究Hp Ⅰ型感染率与国内其他地区报道相近，而总感染率和Hp Ⅱ型感染率高于国内平均水平[7,10]，因此推测本地区总检出率的增高主要是由于Hp Ⅱ型的高感染率引起。进一步分析发现，Hp Ⅱ型UreA抗体检出率明显高于UreB抗体，因此本地区高检出率的UreA抗体决定了Hp的高感染率。

本研究不同年龄组Hp感染率存在差异，其中感染率最低为<30岁组，Hp总感染率为48.1%，Hp Ⅰ型为30.5%，Hp Ⅱ型为47.1%；而感染率最高为50～<60岁组，Hp感染率为61.1%，Hp Ⅰ型为35.8%，Hp Ⅱ型为61.0%；比较不同年龄组的Hp感染率发现，Hp总感染率和Hp Ⅱ型感染率有随年龄增大而升高的趋势，但≥60岁组检出率有所下降，与相关报道一致，可能与该组多为离退休老干部，文化水平与家庭生活层次较高、卫生条件较好有关[9]。

综上所述，本地区Hp的感染率高，主要以Hp Ⅱ型感染为主，且不同年龄、性别人群的感染率不同，临床应将Hp感染作为防治的重点，根据流行病学资料，有针对性地开展预防、治疗及跟踪随访工作，从根本上降低消化系统溃疡和恶性肿瘤的发生率，提高本地区居民的身体素质和健康水平。