基于焦锑酸钠沉淀法的膦甲酸钠乳膏钠盐鉴别方法研究

彭 茗，宋冬梅，乐 健

(上海市食品药品检验所化学室，国家药品监督管理局化学药品制剂质量分析重点实验室，上海 201203)

膦甲酸钠(foscarnet sodium)是一种广谱抗病毒药[1]，化学名称为膦甲酸三钠盐六水合物，分子式为CNa3O5P·6H2O。膦甲酸钠乳膏是一种乳剂型基质的乳膏，用于免疫功能损害病人对阿昔洛韦耐药的单纯疱疹病毒性皮肤、黏膜感染[2]。

膦甲酸钠乳膏的现行质控标准收载于新药转正标准第55册，标准号为国家食品药品监督管理局国家药品标准WS1-(X-134)-2004Z[3]。该标准中钠盐鉴别采用醋酸氧铀锌沉淀法。醋酸氧铀锌沉淀法系2005年版及以往版本《中华人民共和国药典》(简称药典)附录中钠盐鉴别(2)的方法[4]，但由于醋酸氧铀锌具有放射性，自2010年版药典起，将钠盐鉴别(2)改为焦锑酸钠沉淀法[5]。焦锑酸钠沉淀法是一种高灵敏度的钠离子检查方法，含钠离子的供试品溶液在碱性条件下可以与焦锑酸钾反应，生成白色致密的焦锑酸钠沉淀。此方法曾被应用于血钠检测[6-7]、食品掺假检测[8]等领域中。

本研究改进了膦甲酸钠乳膏钠盐鉴别方法。乳膏经炽灼灰化处理后，采用焦锑酸钠沉淀法，方法的专属性和耐用性良好，可取代现行质量标准中的钠盐鉴别方法。

1 仪器和试药

CWF11/13型高温马弗炉(英国Carbolite公司)；Acculab型电子天平(精度0.01 g)和CP224S型电子天平(精度0.000 1 g)由德国Sartorius公司提供。膦甲酸钠乳膏(规格0.15 g∶5 g，批号180403、181001和181101，上海现代制药股份有限公司)；膦甲酸钠原料(物料编号01.01.506-p-1801001)、空白基质(由聚山梨酯80、三乙醇胺、丙二醇、羟苯乙酯、纯化水、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸、十八醇、白凡士林和轻质液状石蜡组成，上海现代制药股份有限公司)；碳酸钾(纯度99.0%，批号20130222，国药集团化学试剂有限公司)；焦锑酸钾(分析纯，批号150701，上海四赫维化工有限公司)；氢氧化钾(分析纯，批号20121218，上海凌峰化学试剂有限公司)。焦锑酸钾试液按照2015年版药典四部通则8002配制。

2 方法和结果

2.1 供试品溶液的制备 称取膦甲酸钠乳膏约3.3 g(相当于膦甲酸钠100 mg)，置石英坩埚中，于加热板上缓缓炽灼至完全炭化，再置高温马弗炉中，于800 ℃炽灼使完全灰化，放冷，加水2 ml使残渣溶解，作为供试品溶液。

2.2 钠盐鉴别方法 将2.1项下供试品溶液转移至小烧杯中，加15%碳酸钾溶液2 ml，并加玻璃珠若干粒，置加热板上煮沸，无沉淀生成；再加焦锑酸钾试液4 ml，加热至沸；置冰水中冷却，即有致密的白色沉淀生成。

2.3 方法学验证

2.3.1 灵敏度考察 称取膦甲酸钠原料500 mg，于800 ℃炽灼，残渣加水10 ml溶解，摇匀，作为对照品储备液。分别量取对照品储备液1、0.5、0.2和0.1 ml，分别置4个小烧杯中，分别加水1、1.5、1.8和1.9 ml，摇匀，分别作为灵敏度实验溶液(1)、(2)、(3)和(4)，再按2.2项下方法进行实验。结果灵敏度实验溶液(1)～(3)均生成明显的白色致密沉淀，而灵敏度实验溶液(4)生成比较少量的白色沉淀(见图1)。因此，膦甲酸钠原料的焦锑酸钠沉淀法钠盐鉴别的灵敏度为5 mg(按膦甲酸钠原料计)。

2.3.2 专属性实验 称取空白基质3.58 g，置石英坩埚中，按2.1项下方法制备空白溶液，再按2.2项下方法进行实验，结果未生成白色致密沉淀(见图2)。另取空白基质3.32 g和膦甲酸钠原料0.102 1 g，置石英坩埚中，按2.1项下方法制备空白加样溶液，再按2.2项下方法进行实验，结果生成致密的白色沉淀(见图2)。说明空白基质无干扰，方法专属性良好。

图1 灵敏度实验中溶液(4)的俯视图和侧面图A：俯视图；B：侧面图

2.3.3 耐用性实验 取批号为180403的膦甲酸钠乳膏样品，分别称取1.66、3.36和6.80 g，分别置石英坩埚中，按2.1项下方法制备供试品溶液，再按2.2项下方法进行实验，结果均生成致密的白色沉淀，说明样品的取样量在50%～200%的范围内，均呈正反应，耐用性良好。另取批号为180403的样品，分别称取3.43、3.36和3.38 g，分别置石英坩埚中，按2.1项下方法制备供试品溶液，炽灼温度分别设为600 ℃、700 ℃和800 ℃，再按2.2项下方法进行实验。结果在600 ℃的炽灼温度下，样品不能完全灰化(见图3A)，对结果造成干扰；700 ℃和800 ℃的炽灼温度均能使样品完全灰化(见图3B、C)，结果均生成致密的白色沉淀，说明本方法的炽灼温度在700 ℃～800 ℃的范围内，耐用性良好。

图2 专属性实验中空白溶液和空白加样溶液的俯视图和侧面图A：空白溶液的俯视图；B：空白溶液的侧面图；C：空白加样溶液的俯视图；D：空白加样溶液的侧面图

图3 膦甲酸钠乳膏经炽灼后的照片A：炽灼温度为600 ℃；B：炽灼温度为700 ℃；C：炽灼温度为800 ℃

2.4 样品检测 分别取批号为180403、181001和181101的膦甲酸钠乳膏样品3.36、3.36和3.54 g，分别按2.1项下方法制备供试品溶液，再按2.2项下方法进行实验，结果均生成致密的白色沉淀，即钠盐鉴别(2)均呈正反应。

3 讨 论

9.0版欧洲药典[9]和42版美国药典[10]均收载了膦甲酸钠原料，其中钠盐鉴别均采用焦锑酸钠沉淀法，且均将样品直接溶于水后制备供试品溶液，无需炽灼。因此，作者曾考虑将乳膏直接用水分散后离心，取水层作为供试品溶液进行钠盐鉴别(2)的实验。但由于水层为下层，不易获取澄清的下层溶液，且浑浊的下层溶液对结果造成干扰。另尝试取水层滤过，取滤液作为供试品溶液，分别使用滤纸以及孔径为0.45和0.22 μm的滤膜过滤。结果用0.45 μm的滤膜过滤较困难，不易获得鉴别实验需要的2 ml体积，且滤液不澄清；用0.22 μm的滤膜虽滤液澄清，但极难过滤，不具可操作性。综上，用水直接分散样品后离心、过滤制备供试品溶液的方法不可行。

2015年版药典四部通则中钠盐鉴别(1)采用焰色反应法，即观察钠元素特征的鲜黄色火焰。作者曾采用空白基质对焰色反应法的专属性进行考察，结果多种处理方法下的空白基质或空白溶液经灼烧后均能产生鲜黄色火焰，对该乳膏剂的焰色法钠盐鉴别产生干扰(见表1)。因此药典通则钠盐鉴别(1)，即焰色反应法鉴别不适用于膦甲酸钠乳膏。

表1 空白基质火焰法鉴别钠盐的干扰情况

本研究采用经典的焦锑酸钠沉淀法，解决了现行膦甲酸钠乳膏国家标准钠盐鉴别方法无法获得试剂的问题，且方法专属性强、操作简单，采用常规试剂和设备即可完成实验，无需使用复杂的仪器，适合于该产品质量标准的制订。需注意的是，在炽灼装有乳膏的石英坩埚时，应将加热板温度尽量调低，待乳膏渐渐融化并缓缓蒸干后，再将加热板温度调高进行炭化，否则融化的乳膏在较高的加热温度下会溅出坩埚外，影响实验的实际取样量。