布病虎红平板凝集试验与试管凝集试验的对比

刘婕妤

（甘肃省华亭市农业农村局 动物疫病预防控制中心，甘肃 华亭 744100）

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌病引起的人畜共患的一种慢性传染病。其特征是生殖器官和胎膜发炎，引起流产、不育和各种组织的局部病灶。布鲁氏菌病是我国二类疫病，本病在华亭市各乡（镇）均有不同程度的流行发展趋势，给养羊业造成了严重损失。本文对布病虎红平板凝集与试管凝集试验方法进行了比较，以便为畜间布病检测提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

华亭动物疫病预防控制中心实验室，2017年1月-2019年9月采集的2 888份牛羊血清样品。试验试剂均为山东绿都生物科技有限公司生产。

1.2 方法

对采集的血清样品先采用布病虎红平板凝集试验进行阳性初筛，再用布病试管凝集试验进行结果定性。

1.2.1 虎红平板凝集试验 洁净的玻璃板，其上划4 cm2的方格，将玻璃板上各格标记待检血清号（待检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味），在玻璃板上先滴加抗原0.03 ml，然后按顺序滴加相应的血清0.03 ml，即可直接用滴加血清的枪头搅动血清和抗原使之混合，再弃去枪头，进行下一个待检血清的检测，以此类推。每次试验应设阴、阳性对照。

结果判定：待检血清在室温条件下4 min内出现沙粒状的凝集现象为阳性，出现均匀的粉红色现象为阴性。

1.2.2 试管凝集试验

1.2.2.1 稀释被检血清 牛稀释用1:50、1:100、1:200、1:400（4个稀释度 ）；羊1:25、1:50、1:100、1:200（4个稀释度)。

1.2.2.2 加抗原 将0.5 ml抗原（1:20）加入已稀释好的各血清管中，并振摇均匀，各反应管反应总量为1 ml。

1.2.2.3 设立对照 每次试验都应设立对照。阴、阳性血清对照：加抗原的方法与待检血清相同（阳性血清的最高稀释度应超过其效价滴度）；抗原对照：在0.5 ml稀释液中，加0.5 ml抗原（1：20）。

1.2.2.4 比浊管的配置 此次试验均配制比浊管，根据抗原抗体凝集程度，作为判定结果的参考依据。

1.2.2.5 结果判定 根据出现凝集反应的强度进行判断，出现50%以上的凝集（参照比浊管的清亮度）即可判定为阳性。

2 结果

对采集的2 888份血清样品进行检测发现，虎红平板凝集检出阳性家畜20例，后对该20例血清进行试管凝集定性检测，发现只有19例。因此，两次检测试验结果发现阳性符合情况并不完全一致，由此可推断，布病平板凝集试验有出现假阳性的可能。为了提高试验结果的准确度，可对布病平板凝集初筛的阳性血清再进行试管凝集定性确诊。

3 分析

虎红平板凝集试验和试管凝集试验简便易行。虎红平板凝集试验有较高的敏感性，且操作较试管凝集试验简便、成本低廉、出结果快的优点，可用于大规模的普查。试管凝集试验具有较高的特异性，操作较虎红平板凝集试验繁琐、费时费力、出结果慢，因此在工作中应把两种试验结合起来，先用虎红平板凝集试验筛查，阳性标本再由试管凝集试验进行复核以作出准确的判断。