复合芽孢杆菌制剂对苏姜猪保育仔猪生长性能影响

张君胜，解慧梅，倪黎刚，朱淑彬，赵旭庭

(江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300)

【研究意义】保育仔猪受到断奶综合应激的影响容易发生多种疾病，生产中经常采用添加抗生素来控制保育仔猪疾病的发生，抗生素的使用会导致仔猪微生态区系被破坏，耐药菌产生等一系列问题[1]。益生菌添加剂可以调节微生物菌群结构以及增强免疫耐受,改善动物健康及降低发生食源性污染的风险所以研制益生菌制剂来防治仔猪大肠杆菌性腹湾具有广泛的发展前景[2]。【前人研究进展】芽孢杆菌，进入肠道内能迅速消耗游离氧，使肠腔内低氧，促进厌氧性有益菌生长，且能产生乳酸、芽孢杆菌菌素和短杆菌肽等活性物质，有效抑制致病菌增殖；芽孢杆菌还可合成淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶以及B族维生素等，促进宿主动物对饲料养分的消化[3]。【本研究切入点】苏姜猪是以姜曲海猪、杜洛克猪为亲本培育而成的优质瘦肉型新品种猪，于2013年8月通过国家畜牧种质资源委员会审定，获得了畜禽新品种证书[4]。随着苏姜猪产业化开发进程的加快，迫切需要开展苏姜猪健康养殖配套技术的研究。泰州绿圣元生物科技有限公司生产的凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)制剂菌体活性好，芽孢形成率高[5]，但该菌剂在仔猪养殖中的效果需要进一步研究。【拟解决的关键问题】本研究通过考察复合芽孢杆菌菌剂对保育仔猪的生长性能、腹泻率、粪便中主要菌群以及主要血液免疫指标影响，对芽孢杆菌制剂在苏姜猪仔猪健康养殖中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

复合芽孢杆菌菌剂是由泰州绿圣元有限公司的提供的统福菌复合饲用微生物制剂, 内含凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等，总活芽孢数为1.0×1010cpf/g。

1.2 试验动物及分组处理

试验动物：选择同批断奶(28日龄)的苏姜猪断奶仔猪90头。随机分成3组，每组3个重复，每个重复10头，分别为空白对照组(正常饲喂不添加芽孢杆菌制剂)、0.1 %菌剂添加组和0.5 %菌剂添加组。预实验7 d，正式试验35 d，全期均采用嘉吉公司仔猪料在同一间猪舍饲喂。试验期间由专人统一进行同一模式的饲养管理，并记录每天的发病情况，及时针对治疗。

1.3 日增重测定

正试验开始和结束时，以头为单位对试验猪进行全群称重。在试验的第1和35天早晨空腹称重，7:00-9:00依次分批称重，称重前先将猪哄起活动15 min，待其排出粪尿后称重，第一批称重各处理组的第一重复组，第二批称重各处理组的第二重复组，依此类推，直至称完。平均日增重( ADG)=(结束体重-开始体重)/饲养天数。

1.4 饲料转化率测定

饲料消耗的测定，采用“清箱底法”每7 d以重复组为单位结料1次。若有死亡和淘汰，及时称重和结算饲料，以便试验结束时将死亡和淘汰猪只饲料消耗剔除。饲料转化率即通常所说的料肉比( F /G)。它是指某一阶段内，育肥猪每增重1 kg所消耗的饲料数量。

饲料转化率=测定期间饲料消耗总量/(结束体重-开始体重)

1.5 腹泻率测定

每天记录各组腹泻猪头数，统计试验期间各组腹泻率。腹泻率( %)=试验期腹泻总头日数/试验期饲养总头日数×100 %。

1.6 粪便样品采集与主要菌群测定

采样前要将镊子和5 mL试管洗净后用高压灭菌箱进行灭菌，同时准备好封口袋、酒精棉球、磁盘等，并带好冰袋对样品进行生物活性保存。在饲养试验的第34天对每个重复随机选择2头猪进行新鲜粪样采样，采样后将样品放入4 ℃冰箱中保存，并在1 d内完成试验。分别采用EC肉汤琼脂培养基、TPY琼脂培养基、MRS琼脂培养基测定大肠杆菌群、双歧杆菌群、乳酸菌群数。

1.7 血液样品采集与主要生化参数测定

试验结束的当天每个重复随机选择2头猪，前腔静脉采血10 mL，使用迈瑞全自动生化分析检测仪BS-220检测血清中主要生化参数。使用广州济恒生物科技有限公司SH-1000 lab 酶标仪检测血清中的免疫球蛋白G(IgG)的含量。

1.8 统计分析

使用spass软件处理与分析试验数据，末重、平均日增重、粪便菌群、血清学指标采用F检验邓肯式法分析，腹泻率采用卡方检验法分析。

2 结果与分析

2.1 复合芽孢杆菌制剂对生长性能和腹泻率的影响

由表1可知，初始重3个组之间差异不显著(P>0.05)，末重和平均日增重复合芽孢杆菌制剂添加组均极显著增加(P<0.01)，但是在0.1 %和0.5 %的添加量中，两组间差异不显著(P>0.05)，腹泻率复合芽孢杆菌制剂添加组极显著低于对照组，表明复合芽孢杆菌制剂的添加有降低腹泻发生的趋势。

表1 复合芽孢杆菌制剂对仔猪生长性能和腹泻率的影响

由表2可见复合芽孢杆菌制剂添加组仔猪的日采食量分别为579和605 g，均高于对照组525 g；复合芽孢杆菌制体添加组料重比分别为1.41和1.42，均低于对照组1.63。这说明复合芽孢杆菌制剂的添加可以增加仔猪的采食量，提高消化率，降低料重比。

表2 复合芽孢杆菌制剂对饲料转化率影响

2.2 复合芽孢杆菌制剂对粪便影响

由表3可见，芽孢杆菌制剂的添加显著的降低了粪便的pH值。对照组粪便中大肠菌群数含量极显著高于两试验组(P<0.01)，对照组双歧杆菌和大肠杆菌数均显著低于试验组(P<0.01)。结果表明芽孢杆菌制剂添加有效改善了仔猪肠道微生态体系。

表3 复合芽孢杆菌制剂对猪粪样微生物的影响

2.3 复合芽孢杆菌制剂对血液生化指标影响

由表4可见，复合芽孢杆菌添加组的总蛋白、球蛋白、免疫球蛋白G含量均较对照组显著提高；谷丙转氨酶活性、谷草转氨酶活性显著提高，尿素氮含量显著降低；复合菌剂添加0.1 %组和0.5 %组差异不显著；复合芽孢杆菌添加对总胆固醇和甘油三酯浓度影响差异不显著。

表4 复合芽孢杆菌制剂对血液生化指标的影响

3 讨 论

3.1 对断奶仔猪促生长的影响

芽孢杆菌进入仔猪肠道后可以迅速繁殖产生大量的消化酶和营养物质供仔猪吸收利用，提高生产性能[6]。王晓丹等在断奶仔猪饲料中添加枯草芽孢杆菌显示有良好的促生长效果，可以显著降低断奶仔猪猪的腹泻率，日增重[7]。本研究中添加的统福菌复合芽胞杆菌制剂中的芽胞杆菌以芽孢的方式进入猪体内，具有耐酸耐胆碱能力强，可以在仔猪肠道内能够迅速萌发快速繁殖形成优势菌群，其本身含有大量的营养物质，合成多种维生素等营养物质。研究结果表明统福菌可以有效地帮助仔猪消化饲料，提高饲料的消化率，增加仔猪日增重，具有促进生长作用。

3.2 对有害微生物的颉抗作用

仔猪断奶阶段受到应激，容易造成消化吸收功能紊乱、腹泻，在养猪生产中普遍采用添加低剂量的抗生素来控制仔猪断奶腹泻，但从生态效益和长远发展来看这种方法是不可取的。2017年6月22日，农业部印发了《全国遏制动物源细菌耐药行动计划(2017-2020年)》提出，推进兽用抗生素物减量化使用，实施“退出行动”，在2020年底以前，饲料端“禁抗”，养殖端减抗、降抗为必然。目前很多研究都在寻找预防仔猪腹泻的方法，其中添加益生菌制剂是一条重要的解决思路。益生菌可以通过调整肠道菌群的平衡抑制有害微生物的生长，达到改善猪体健康的目的[8]。华洵璐等研究表明芽孢杆菌进入猪体内以后可以抑制肠道内大肠杆菌、沙门氏菌等病原菌生长，促进乳酸菌和双歧杆菌等有益微生物生长，改善消化道菌群平衡, 有效预防仔猪腹泻[9]。本研究结果也可以看到添加芽孢杆菌制剂后，大肠杆菌极显著的降低，双歧杆菌和乳酸菌等益生菌极显著提高，说明统福菌具有很好的对有害微生物拮抗作用。

3.3 对血清免疫指标的影响

血清免疫指标反映了仔猪生长代谢的能力同时也反映了仔猪抗病能力。在饲料中添加益生菌，在猪肠道内迅速增殖，可以促进双歧杆菌和乳酸菌的繁殖，从而达到维持肠道菌群平衡，有增强仔猪免疫功能的效果[10]。乔宏兴等将黄芪和枯草芽孢杆菌结合饲喂保育仔猪显著提高了保育仔猪体内总蛋白和免疫球蛋白的含量[11]。刘辉等研究发现添加益生菌可以显著提高猪血液中免疫球蛋白总量和免疫球蛋白G的含量[12]。本研究结果中仔猪体内总蛋白、免疫球蛋白和免疫球蛋白G含量显著提高说明本研究所采用的复合芽孢杆菌制剂具有良好的提高仔猪免疫力的效果。血液中谷丙转氨酶活性和谷草转氨酶活性和氨氮含量是反映猪体内氮代谢的主要指标[13]。本研究结果中符合芽孢杆菌添加组内谷丙转氨酶活性和谷草转氨酶活性均有显著提高说明仔猪体内蛋白质合成代谢有所增加，仔猪生长代谢旺盛，复合菌剂在增强仔猪蛋白质合成代谢上有一定的促进作用。

3.4 复合菌剂添加量的影响

足够数量的活菌数是益生菌发挥作用的关键，研究表明，如果一种细菌在盲肠内容物中的浓度低于107个/g，则该菌产生的酶及代谢产物不足以影响宿主,难以满足治疗需要[14]。本次试验所采用的泰州绿圣元有限公司的提供的统福菌复合芽孢杆菌制剂活菌数达到1.0×1010cpf/g，活菌数充足。在本次试验中添加0.5 %的菌剂效果与添加0.1 %菌剂对保育仔猪生长性能和腹泻率的影响效果差异不显著，可能是由于芽孢杆菌制剂中细菌以芽孢的方式存活，芽孢抗逆性强，耐储存、耐酸、耐胆碱，能够很好的穿过胃和十二指肠，芽孢活化后菌体具有极快的繁殖速度，足够数量的芽孢杆菌进入肠道后迅速繁殖形成优势菌群，达到了调整微生态平衡的效果。

4 结 论

在苏姜猪断奶仔猪饲料中添加0.1 %的复合芽孢杆菌制剂添加能够极显著的提高断奶仔猪的日增重(P<0.01)、极显著的降低腹泻率(P<0.01)，提高仔猪采食量，改善仔猪肠道微生态平衡，提高机体免疫力(P<0.05)，促进了机体蛋白质合成代谢(P<0.05)。芽孢杆菌制剂作为微生态制剂具有宜运输、耐储藏的优点，是一种优质的益生菌添加剂。