美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌治疗溃疡性结肠炎效果及对患者血清sRAGE、Vaspin、炎性因子等影响

吴 可，苏鹏飞，佟延新

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis， UC)是一种以腹痛、腹泻及黏液血便等为主要临床表现的多发生于结、直肠的非特异性炎性疾病[1]。UC发病率随着人们饮食结构的改变和生活水平的提高呈上升趋势，且UC易反复发作，多迁延日久，对患者身心健康造成严重影响[2]。目前，临床多采用水杨酸类、免疫抑制剂和糖皮质激素治疗UC，取得了一定效果。但水杨酸制剂单用难以发挥满意治疗效果，免疫抑制剂和糖皮质激素易引起中毒和肠穿孔等不良反应，且部分患者不耐受，不适用于UC的长期治疗。随着研究的深入，部分学者发现肠道微生态环境改善对提高UC治疗效果有一定帮助[3]。为此，本研究观察美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌治疗UC效果及对患者血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)、内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、炎性因子等影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年5月—2017年5月辽阳市中心医院收治符合纳入及排除标准的UC 96例，根据治疗方法不同将其分为研究组(51例)和对照组(45例)两组。研究组男32例，女19例；年龄20～54(38.31±7.49)岁。病程5个月～10年(3.08±1.39)年。病变部位：全结肠21例，左半结肠16例，右半结肠14例。对照组男29例，女16例；年龄21～56(37.42±6.73)岁。病程5个月～11年(3.14±1.42)年。病变部位：全结肠18例，左半结肠14例，右半结肠13例。两组性别、年龄、病程及病变部位等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准同意执行。

1.2纳入及排除标准 纳入标准：①符合“炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(2012年,广州)”[4]中UC诊断标准；②年龄18～65岁；③患者和(或)其家属对本研究知情同意，自愿参与本研究，并签署知情同意书。排除标准：①合并恶性肿瘤及严重心、肝、肾功能不全者；②并发肠穿孔及肠梗阻等严重消化道疾病者；③自身免疫系统疾病者；④有胃肠道手术史者；⑤近1个月内接受糖皮质激素及其他水杨酸类等药物治疗或对本研究药物过敏者；⑥精神和(或)智力障碍者。

1.3治疗方法 所有患者均给予营养支持、对症治疗及心理辅导等常规治疗。研究组在常规治疗基础上给予美沙拉秦(生产企业：黑龙江天宏药业股份有限公司，规格：0.25 g，批准文号：国药准字H20103359)每次1 g，每日3次口服；双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌(生产企业：上海信谊药厂有限公司，规格：0.21 g，批准文号：国药准字S10950032)每次0.42 g，每日3次餐后口服。对照组在常规治疗基础上仅给予美沙拉秦(生产企业：黑龙江天宏药业股份有限公司，规格：0.25 g，批准文号：国药准字H20103359)每次1 g，每日3次口服。两组均治疗2个月。

1.4观察指标、方法及评价标准 ①治疗效果比较：以“炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(2012年,广州)”[4]为依据对两组治疗2个月后临床效果进行评价比较：临床症状消失，结肠镜检查见黏膜大致正常或无活动性炎症为缓解；临床症状基本消失，结肠镜检查见黏膜轻度炎症为有效；临床症状及结肠镜检查均无改善为无效。总有效=缓解+有效。②血清sRAGE、Vaspin、炎性因子及氧化应激指标水平比较：炎性因子包括白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)。氧化应激指标包括一氧化氮(NO)、过氧化脂质(LPO)及超氧化物歧化酶(SOD)。分别于治疗前及治疗2个月后采集两组清晨空腹静脉血8 ml，离心分离血清，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清sRAGE、Vaspin、IL-6、IL-8及TNF-α水平(试剂盒均购自上海颖心实验室设备有限公司)；亚硝酸盐还原酶比色法测定NO，硫代巴比妥酸反应产物比色法测定LPO，黄嘌呤氧化酶法测定SOD(试剂盒均购自北京索莱宝科技有限公司)。③便基质金属蛋白酶9(MMP-9)、钙卫蛋白(Cal)及髓过氧化物酶(MPO)水平比较：分别于治疗前和治疗2个月后留取两组便5～10 g，按质量容积比1∶50加入0.9%氯化钠注射液，充分振荡20 min，取1 ml均浆离心，取上清液0.5 ml采用ELISA法检测MMP-9、Cal及MPO水平，试剂盒购自上海润裕生物科技有限公司。④治疗期间不良反应发生情况比较：治疗期间不良反应包括恶心及腹胀加重等。

2 结果

2.1治疗效果比较 治疗2个月后，研究组总有效率为92.16%高于对照组总有效率75.56%，差异有统计学意义(χ2=4.998，P=0.025)，见表1。

2.2血清sRAGE和Vaspin水平比较 治疗前，两组血清sRAGE和Vaspin水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2个月后，两组血清sRAGE和Vaspin水平均较治疗前降低，差异有统计学意义(研究组：t=14.055、P<0.001，t=21.139、P<0.001；对照组：t=8.771、P<0.001，t=15.831、P<0.001)。治疗2个月后，研究组血清sRAGE和Vaspin水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。见表2。

表1 采用不同方法治疗的溃疡性结肠炎两组治疗2个月后临床效果比较[例(%)]

注：研究组在常规治疗基础上采用美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌进行治疗，对照组在常规治疗基础上仅采用美沙拉秦进行治疗；aP<0.05

表2 采用不同方法治疗的溃疡性结肠炎两组治疗前后血清sRAGE及Vaspin水平比较

注：sRAGE为可溶性晚期糖基化终末产物受体，Vaspin为内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂；研究组在常规治疗基础上采用美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌进行治疗，对照组在常规治疗基础上仅采用美沙拉秦进行治疗；与本组治疗前同一指标比较，bP<0.01

2.3血清炎性因子比较 治疗前，两组各血清炎性因子水平比较差异均无统计学意义(P<0.05)。治疗2个月后，两组血清IL-6、IL-8及TNF-α水平均较治疗前降低，差异有统计学意义(研究组：t=26.378、P<0.001，t=25.794、P<0.001，t=28.941、P<0.001；对照组：t=19.626、P<0.001，t=20.751、P<0.001，t=23.273、P<0.001)。治疗2个月后，研究组血清IL-6、IL-8及TNF-α水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。见表3。

表3 采用不同方法治疗的溃疡性结肠炎两组治疗前后血清炎性因子水平比较

注：研究组在常规治疗基础上采用美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌进行治疗，对照组在常规治疗基础上仅采用美沙拉秦进行治疗；IL-6为白细胞介素6，IL-8为白细胞介素8，TNF-α为肿瘤坏死因子α；与本组治疗前同一指标比较，bP<0.01

2.4血清氧化应激指标比较 治疗前，两组各血清氧化应激指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗2个月后，两组血清NO和LPO水平均较治疗前降低(研究组：t=23.992、P<0.001，t=11.913、P<0.001；对照组：t=17.082、P<0.001，t=5.803、P<0.001)，血清SOD水平均较治疗前升高(研究组：t=28.510、P<0.001；对照组：t=15.435、P<0.001)，差异有统计学意义。治疗2个月后，研究组血清NO和LPO水平低于对照组，血清SOD水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。见表4。

表4 采用不同方法治疗的溃疡性结肠炎两组治疗前后血清氧化应激指标比较

注：研究组在常规治疗基础上采用美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌进行治疗，对照组在常规治疗基础上仅采用美沙拉秦进行治疗；NO为一氧化氮，LPO为过氧化脂质，SOD为超氧化物歧化酶；与本组治疗前同一指标比较，bP<0.01

2.5便MMP-9、Cal及MPO水平比较 治疗前，两组便MMP-9、Cal及MPO水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗2个月后，两组便MMP-9、Cal及MPO水平均较治疗前降低，差异有统计学意义(研究组：t=34.180、P<0.001，t=26.706、P<0.001，t=34.155、P<0.001；对照组：t=26.122、P<0.001，t=21.786、P<0.001，t=23.479、P<0.001)。治疗2个月后，研究组便MMP-9、Cal及MPO水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。见表5。

表5 采用不同方法治疗的溃疡性结肠炎两组治疗前后便MMP-9、Cal及MPO水平比较

注：研究组在常规治疗基础上采用美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌进行治疗，对照组在常规治疗基础上仅采用美沙拉秦进行治疗；MMP-9为基质金属蛋白酶9，Cal为钙卫蛋白，MPO为髓过氧化物酶；与本组治疗前同一指标比较，bP<0.01

2.6不良反应发生情况比较 治疗期间，研究组出现恶心2例，腹胀加重1例；对照组出现恶心2例。两组出现不良反应者症状均较轻微，未对治疗产生影响，后皆自行缓解。

3 讨论

UC的发病机制现尚未阐明，相关研究显示其与炎症反应、氧化应激、肠道屏障功能缺陷和菌群失调等因素有关[5]。晚期糖基化终末产物受体(RAGE)作为一种于单核巨噬细胞和血管内皮细胞等细胞中普遍存在的跨膜传导多配体受体，在机体免疫和炎症反应中发挥重要作用。樊洁等[6]研究发现，UC患者体内RAGE与配体作用可诱导氧化及多种炎性介质表达，并可活化NF-κB，从而导致TNF-α及IL-6等大量炎性因子释放，且与炎性因子的表达呈正相关。RAGE的内源分泌型sRAGE可反映RAGE水平，对评估UC患者炎症发展程度有重要价值。Vaspin作为脂肪细胞因子，可促进脂联素表达，抑制瘦素、抵抗素以及TNF-α表达。Vaspin可对炎性介质进行负性调节，其在UC患者的血清水平与疾病严重程度密切相关[7]。由上可见Vaspin对UC的治疗效果评估有一定作用。便检测因取样便捷及相对于结肠镜检查更易被患者接受等优势临床应用广泛。UC患者肠黏膜屏障缺陷，中性粒细胞可进入肠腔由粪便排出。相关研究证实，便MMP-9、Cal及MPO等中性粒细胞衍生产物可直接反映肠道炎症程度[8]，对药物治疗效果有良好判定价值。

氧化应激也是UC发病机制之一。IL-6及IL-8等炎性因子可刺激炎性细胞一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达，促进NO生成，但大量NO的堆积将影响线粒体的功能，阻碍DNA的合成等过程，导致组织损伤[9]。LPO作为不饱和脂肪酸经自由基作用产生过氧化物，可破坏生物膜、RNA和DNA结构及功能，并可抑制免疫功能[10]。SOD可通过抑制或清除氧自由基减轻氧化应激损伤发挥抗氧化作用。近年UC的抗氧化治疗已逐渐引起人们重视。有动物实验显示，抗氧化治疗可减轻UC大鼠模型肠道炎症损伤程度，改善大鼠临床表现[11]。

美沙拉秦作为水杨酸制剂，有效成分为5-氨基水杨酸(5-ASA)，主要通过抑制花生四烯酸的代谢途径减少白三烯及前列腺素等炎性介质的合成，从而发挥非特异性抗炎作用[12]。本研究中，在常规治疗基础上仅采用美沙拉秦进行治疗的对照组治疗2个月后血清sRAGE、Vaspin、炎性因子及便MMP-9、Cal、MPO水平均较治疗前降低，表明美沙拉秦对UC患者肠道炎症改善有一定帮助，推测与其可抑制花生四烯酸的代谢途径以减少炎性介质的合成有关。吴海霞和周珂玮[13]研究显示，美沙拉秦可通过诱导NF-κB的活化抑制前列腺素E2(PGE2)等炎性介质的合成，减少TNF-α及IL-8等炎性因子的释放，与本研究结果基本一致。此外，本研究结果还显示，治疗2个月后，对照组氧化应激指标水平均较治疗前改善，推测与美沙拉嗪可增强机体清除氧自由基的能力有关。

随着微生态学的发展，部分学者在抗感染治疗的基础上予以UC患者可促进宿主机体微生态平衡的益生菌治疗并取得了一定效果[14]。本研究中，研究组在常规治疗基础上采用美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌进行治疗，对照组在常规治疗基础上仅采用美沙拉秦进行治疗，结果显示，治疗2个月后，研究组总有效率为92.16%高于对照组总有效率75.56%，提示美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌对提高UC患者治疗效果有一定帮助。双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌作为一种三联活菌复方制剂，可通过直接补充正常生理菌丛抑制致病菌，改善肠道微生态环境，促进营养物质的消化、吸收，抑制肠源性毒素的产生和吸收，利于肠道炎症反应的改善[15]。双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌在进入肠道后可与有益菌占据肠道黏膜表面，形成生物学屏障，阻止致病菌的定植和入侵。陈静等[16]研究也显示，双歧杆菌和乳酸杆菌等肠道内优势菌群，与人体生物拮抗、营养吸收及代谢、调节免疫等生理功能密切相关，在予以水杨酸制剂治疗的同时改善UC患者肠道微生态环境对提升疗效有重要意义，与本研究结果基本一致。

双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌中的益生菌可抑制NF-κB的释放，并可促进激活过氧化物酶体增殖因子激活受体γ(PPAR-γ)，从而发挥促进白细胞介素10(IL-10)及转化生长因子β等抗炎细胞因子表达，抑制TNF-α及IL-8等促炎细胞因子表达的作用[17]。此外，该药物还可通过改善肠道微生态平衡加速损伤上皮修复。本研究结果显示，治疗2个月后，研究组血清sRAGE、Vaspin、IL-6、IL-8、TNF-α、NO、LPO及便MMP-9、Cal、MPO水平均低于对照组，血清SOD高于对照组，差异有统计学意义。说明在常规治疗基础上采用美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌进行治疗的研究组血清sRAGE、Vaspin、炎性因子、氧化应激指标及便炎性标志物水平改善情况均优于在常规治疗基础上仅采用美沙拉秦治疗的对照组，推测可能与该联合疗法可在美沙拉秦治疗基础上予以益生菌促进肠道菌群平衡、加速损伤上皮修复等作用有关。另外，本研究结果还显示，治疗期间，研究组出现恶心2例，腹胀加重1例；对照组出现恶心2例。两组出现不良反应者症状均较轻微，未对治疗产生影响，后皆自行缓解。提示在常规治疗基础上采用美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌治疗UC的安全性良好。美沙拉秦为5-ASA控释剂型，服用后仅在处于pH≥6环境中时聚甲基丙酸或乙基纤维素外层才会溶解，使5-ASA于小肠末端及结肠处释放发挥抗炎作用，相对于柳氮磺胺吡啶显著减少了不良反应[18]，与本研究结果一致。而双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌仅补充肠道有益菌，亦无明显不良反应。

总之，美沙拉秦联合双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌治疗UC效果显著，可减轻患者肠道炎症反应，改善患者免疫功能和肠道黏膜损伤，且安全性良好。