基层疾控中心微生物检验的常见问题与对策分析

赵 丹

（盘锦市大洼区疾病预防控制中心，辽宁 盘锦 124200）

基层疾控中心属于政府职能部门们，在我国分布较为广泛。疾控中心主要工作内容是预防及控制传染性及慢性非传染性疾病，因而微生物检验结果会对传染性疾病预防工作质量造成直接影响。现阶段，在我国基层疾控中心的微生物检验中存在一定问题，因而本文以此为切入点，总结微生物检测中存在的问题，并以此稳基础制定相应解决措施。

1 微生物检验常见问题

1.1 送检标本质量低：检验人员对患者真实状况进行检验的基础为一份合格的患者标本，因而这就表明在对微生物检验进行质量管理的过程中，不能仅仅局限于检测过程中的管理，还需要加强对检验分析前的质量管理。通常情况下，造成保本送检质量低的原因为如下四点：①没有对标本采集工作进行规范化操作[1]。如临床科室在对标本进行采集的过程中没有严格规范采集时间、采集量、采血姿势、标本收集容器以及防腐剂或抗凝剂的使用等。②通常情况下对于细菌培养的血标本在采集时应该在患者使用抗生素前，但60%以上的住院患者在入院前均已经接受了门诊的相应治疗，因而对检验结果造成了不良影响。③对于血液标本的采集应该采取温和处理措施，一旦血液标本发生了溶血，则会降低血浆或血清中的测定值。④一部分标本在采集完成运送的过程中，无法在规定时间内将其送至微生物检验室，从而便会造成污染正常菌落的情况。

1.2 检验指标问题：在当前的基层疾控中心中，微生物检测指标方面也存在一定的问题。其主要为以下几点：①检测指标欠缺完整性。在现有的检测中，微生物检测种类遗漏问题较为明显，从而在疾病防控的布置措施中存在不完整等情况，导致发病概率增加，疾控时效性降低。如在检测水质卫生物中，具体存在总大肠杆菌群、菌落总数、大肠埃希菌、耐热大肠菌等，但是总大肠杆菌群中存在柠檬酸杆菌属、埃希菌属、肠杆菌属、克雷伯菌属，实际检测中却总会忽视总大肠菌群中的某些菌属，整体检测并不完善；②检测不突出重点。这一问题导致现有的大型微生物检测中准确性降低，影响了疾控防控的参数，降低了疾控的有效性。如食物微生物检测，检测重点应该侧重于能够引发人类生理系统病变之类的有害微生物，但实际工作中却经常忽视此种问题。

1.3 检验环境不合格：微生物检验过程中对于实验室环境要求较高，但对于基层疾控中心而言，因其自身条件有所限制从而使得大多数的微生物实验室环境无法达到相关要求，最终便会对微生物检验结果造成影响。

1.4 缺乏规范检验流程：在对基层疾控中心调查中，一部分检验人员在对标本进行接种、细菌培养、菌落筛选、药敏试验、涂片、染色以及鉴定等过程中没有严格执行相关操作规程。同时没有对其进行严格质量监控，也无法有效地确保检验分析中的各个环节，还有一部分的检验人员没有充分认识到病原菌类型，且部分菌落鉴定漏网会对终末质量造成影响[2]。

1.5 检验设备落后：基层疾控中心检测设备十分重要，是检测效率与标准提升的基础，但是实际工作中检测设备却存在一定的缺陷，其稳定性较差，检测结构不能满足微生物检验的需求。并且，基层疾控中心因其自身条件有限因而相关的检验设备均由国家分配，但由于政策从制定到落实需要一定时间，因此导致基层疾控中心的检验设备与技术较为落后，且缺乏一定数量。

2 质量控制措施

2.1 确定检验方法：当使用新的检验方法之前，需要通过一定样本数量进行预实验，核实验证方法的精准性与准确性，证明在实验室中可以重复试验指标。并将现有的工作有关手册、指导、标准等保证其有效性，方便工作人员开展微生物检验。

2.2 保证实验环境良好：实验室环境是微生物检测中的重要部分，对环境需求较高。应当保证实验室通风换气设备的管维工作，则可以有效控制实验室的室内环境，其环境标准如下：湿温度、照明、噪音、风量等。还需要划分微生物检测实验室的4个模块，设置相应的标志牌，以免工作过程中工作人员走错出现交叉感染等问题，影响了工作人员的身体健康。定期进行维护与监测，使用紫外线灯每月进行消毒监测，设置监测与维护的记录备查，并且应有实验室主管的复合签字。

2.3 监控质控菌株：在微生物检测中，质控菌株是其中的参考体系，是典型稳定的生物学特征，需要有认可部门或者权威机构提供。通常在菌种保存中心机构购买，或者是上级业务主管发送。微生物实验室中需要有金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌这三种，建立相应的菌株检测、保存等操作程序，从而保证生物安全性。若是实验室中不存在规定的标准菌株，也可以用同一种类的菌株替代。对于菌株购买、保存等都应该具有细致的记录，设置完善的措施，没有管理者允许则不能获得菌株。

2.4 检查培养基及使用试剂：为了提升微生物检测质量，需要检查所用试剂的外观，数量、生产厂家等各项基础参数，购买试剂与培养基的时候，应当向供货商索取“三证”，使用之前需要评估以下内容：固体试剂潮解程度；液体试剂均匀性与透明性；培养基厚度在均匀中是否表面光滑平整。并且，按照规定要求存储试剂，在有效期之间使用，不能混用不同批次之间的培养基与试剂，使用时需要有相应的配置记录。对于不同批次的商品试剂或培养基等都需要进行实验：生长实验、无菌实验、选择性实验等质量检测。同时，不同培养基需要根据不同的培养标准，使用相应菌种接种；生化培养基鉴定细菌；阳性菌株鉴定触酶、氧化酶试剂；标准菌株使用染液控制等。

2.5 诊断血清：当进行血清的签收时，工作人员需要确定血清的各项基本参数，其中包含了生产批号与生产厂家的审核，保证检测工作开展在无菌环境之中。

2.6 实验检测：当检测人员收到检测任务与样品单后，需要对任务单上的内容进行核对，看其是否与送检样品相符，其中包含了检测项目、方法、包装、数量、状态等，只有无误后才能安排检测。检测前需要根据实验室的相关标准，做好基本的质量控制，如培养基配置、无菌实验室消毒、设备调控、防护检测人员、防污染等准备。

微生物检验时，通常情况下样品并不能进行复检，若是在检测过程中出现异常，客户或者审核人员对于检测数据提出了异议等，则可以进行微生物复检，而停气、停电等对于样品检测结果准确性有所影响的意外情况，检测人员需要立即停止检测，恢复检测条件则可以继续检测，若是不能检测则重新采集样品。

检测之后，所有与检测相关的场所、器具、物品等需要消毒灭菌处理。若是必要，则可以实施目标菌生长实验，确定为无菌生长时，焚毁清洗。

3 解决措施分析

3.1 创建完整的检测指标体系：若是想要提升微生物检测质量，则需要创建完整的检测指标体系。其主要应当从两方面进行：①通过分析资料确定检测指标项目。具体而言，主要是由于微生物的分布具有一定的空间性与时间性，但是其中又存在不确定性，因此，需要相关工作人员利用以往的检测资料，总结基层疾控中心中存在的微生物种类，并将其纳入到检测体系之中，可以有效改善检测遗漏等问题；②利用区域时间，对微生物检测重点名单进行总结确定，重点检验与监控具有重大影响的微生物。通过上述两种方法，创建出较为完整的微生物检测指标体系，加强检测工作的指导。

3.2 加强专业技能培训：为了能够提高临床微生物检验质量，就需要进一步加强对检验人员能力与技能的培养，同时在判读检验结果时，需要检验人员具备较强的主观判断能力。除此之外，检验人员需要掌握免疫学、临床抗生学、临床医学、病原生物学以及医院流行病学等多方面的知识，如此才能在微生物检验中有效地解决分析前质量控制中技术问题。最终才能确保检验结果的准确性与科学合理性，确保药敏与药敏、细菌鉴定与药敏之间结果的吻合。同时还需要对基层疾控中心的各科护土进行教育培训，因而为了能够进一步提高标本质量，可以由检验科主任为临床护土长传授向知识，主要讲解终末质量与标本质量之间的关系。并对标本采集方式与注意事项进行详细介绍，严格要求标本采集的部位与采集量，坚决退回不合格的标本[3]。

培训之后，还要对检测人员专业技能进行统一考核，保证培训的有效性，其主要包含两方面内容：一是加标实验与样品重测的考核；二是培训期间各项技能的学习情况，由指导教师进行最终评估。

3.3 样品采集运输保存：若是想要获得更加可靠精准的检测结果，除了工作人员专业技能达到相应标准之外，最为重要的就是对微生物样本的采集。需要工作人员依据检测标准、方法、目的等确定选择采样工具、方法、时机、部位、数量以及存放容器等，样本的采集需要具有典型性、代表性与适时性。样本在采集之后则应当根据相应的需求包装送检，避免出现样本污染等情况，若是不能实现立即送检，则需要有充足的冷藏冷冻设备，将样品存储其中，封口样品容器，贴上明显标识，以免样品出现损毁、丢失、污染、变质等情况。样品的接收人员则需要根据送检单核对样本信息，只有确定送检的样本符合相应要求，才能签收登记。通常情况下，在送检样品中需要提供同一批次的平行双样，方便后续的复检工作开展。

3.4 提高检验人员专业素养：临床微生物检验工作具有较高的风险性与技术性，因而其对于临床微生物检验人员的操作能力较高。基层疾控中心为了提高检验质量需要进一步培养微生物检验人员的业务水平，提高检验经验。同时作为基层疾控中心管理者，在日常工作中应该积极地组织检验人员进行相关的学术培训与交流会，以不断地加强技术及学术交流，更好地掌握新的检验技术。

3.5 引进先进检验设备：基层疾控中心根据自身的实际情况，管理者分阶段、分批次地对新的检验仪器进行购置，及时地对技术落伍的检验仪器进行淘汰，从而保证微生物检验工作顺利开展。除此之外，管理者还应该对微生物检验仪器管理制度予以进一步完善，从而确保检验仪器的使用及维护，并安排专人建立检验仪器相关档案。

并且定期检测检验设备的性能，数据与标准数据想对比，其仪器设备的标准数据如下：①恒温恒湿培养箱的箱内温度应当在36～45 ℃，而霉菌箱其温度应当在28 ℃左右。冰箱内部最低温温度是-20 ℃，而保鲜冰箱温度则约为4 ℃。②灭菌器。需要对新购买的灭菌器进行效果检测，当合格之后才能在实验室中使用，每周进行一次监测。压力蒸汽灭菌器灭菌效果通常使用化学指法或者生物法进行灭菌效果的监测。化学指法主要是通过化学指示卡监测，生物法则是使用生物指示剂监测。③生物安全柜。通常的基层疾控中心实验室中主要使用二级生物安全柜，初次安装与使用是都需要有专业的人员检漏高效过滤器，若有问题则及时更换，检定风速、压差等因素，保证样本环境、人员的安全性，做好监控记录等工作。④紫外线灯。其在实验室中主要具有空气消毒的作用。对于紫外线灯是否合格的检测，则是根据生物学指标以及物理学指标。生物学指标是指示菌杀灭率，以枯草杆菌黑色变种芽孢以及大肠杆菌为指示菌，杀灭率在照射一段时间后＞99.99%；而物理学指标则是紫外线辐射照度，安装的新灯管初始阶段，其紫外线照射强度应当超过94%，室温为23 ℃时普通30 W直管紫外线灯辐射强度超过75 µW/cm2，高强度的紫外线灯相同条件下则超过210 µW/cm2。⑤称量设备。量筒、天平、移液器等需要每年有专业的技术检测机构，或者是国家标准物质检测中心校准检定，合格后在其上贴上绿色标识，才能继续使用。

4 总结

综上所述，对于微生物检验工作而言，检验人员专业素质、实验室环境以及检验设备均具有严格要求。因此，为了提高检验结果的可靠性与准确性，需要加强对微生物检验工作的重视，对检验操作进行严格规范，并引进先进的检验设备，提高检验质量。