灰树花工厂化瓶栽菌株筛选试验

陈诗杰 宋昀程 陈 静 钱正祥 李金鑫

（上海丰科生物科技股份有限公司，上海 奉贤 201401）

灰树花Grifola frondosa，又名舞茸，隶属担子菌亚门Basidiomycota、层菌纲Hymenomycetes、无隔担子菌亚纲Holobasidiomycetidae、非褶菌目Aphyllophorales、多孔菌科Polyporaceae、树花菌属Grifola[1]，因其口感独特，风味好，营养丰富，药用价值高等，逐渐成为当前可食的新兴食用菌种类[2-3]。灰树花持续增长的市场需求刺激其人工栽培趋于规模化，陆续形成设施化地栽、工厂化袋栽及工厂化瓶栽三大主要栽培模式，工厂化生产产量更高，品质更好，发展空间较大[4-5]。

不同生产模式因在生产环节、栽培环境和栽培工具等方面的差异[6]，使得相应生产模式专用菌株的选用要求更高。李红梅等[7]进行引进和自主分离野生的灰树花菌株林地仿野生栽培试验，从中筛选出适合冀中南地区林下栽培的3个灰树花菌株。彭学文等[8]从6 株野生灰树花菌株中筛选出适合唐山当地覆土栽培的1 个灰树花菌株。金宇昌等[12]采取工厂化袋栽模式筛选出1 个灰树花袋栽潜力菌株。为从现有菌株中筛选出适宜工厂化瓶栽的灰树花潜力菌株，笔者进行8 个灰树花菌株的瓶栽比较试验，为提升灰树花规模化瓶栽生产整体效能，搭建灰树花瓶栽专用品种选育提供数据支撑。

1 材料与方法

1.1 供试菌株及培养基

（1）供试灰树花菌株

供试8个菌株编号和来源见表1。

表1 供试灰树花菌株编号及来源

（2）供试培养基

PDA 培养基：马铃薯800 g，葡萄糖20 g，琼脂条20 g，水1.0 L，pH 自然。培养基灭菌后取直径90 mm玻璃平皿倒板，备用。

三角瓶培养基：木屑85%，麸皮15%。料含水量65%，pH自然，灭菌后冷却，备用。

栽培种培养基：木屑60%，棉籽壳20%，麸皮10%，玉米芯5%，豆渣5%。料含水量65%，pH 自然，瓶装湿料585～590 g，灭菌后冷却，备用。

1.2 试验方法

1.2.1 供试灰树花菌株菌丝生长速度

使用打孔器打孔已活化的灰树花菌株纯培养物以制备直径5 mm 菌饼，将菌饼接于PDA 培养基中央，置于25 ℃恒温培养箱中避光培养。每日观察菌丝生长状态，3 d后划线，直至菌丝长满平板，计算菌丝生长速度，每个菌株设3个重复。

1.2.2 供试灰树花菌株农艺性状

将供试灰树花菌株接种于三角瓶培养基内，每个菌株接种4 瓶，25 ℃培养15 d 培养原种。将原种接入装有培养料850 mL规格塑料瓶中，每个菌株16瓶。置于23～25 ℃，空气相对湿度65%～70%，二氧化碳质量分数小于2 000 mg/kg 的培养房中黑暗培养，菌丝长满栽培瓶后给予150～200 lx 散射光刺激以促进原基生长。待原基隆起吐水后及时揭盖，移入18～20 ℃，空气相对湿度85%～95%，二氧化碳质量分数小于1 000 mg/kg，光照强度200～400 lx 的出菇房内进行出菇管理。待子实体长至八成熟时及时采收。记录子实体的菌盖颜色、形状、数量等农艺性状，每瓶仅采收1潮。

1.2.3 供试灰树花菌株子实体生产性能

记录从接种到搔菌的天数，即为菌龄；从接种到采收的天数，即为栽培周期。采收后称量单朵灰树花，记录单产；计算出菇率和污染率。

出菇率=（每个菌株开片总朵数/每个菌株接种总瓶数）×100%

污染率=（每个菌株污染总瓶数/每个菌株接种总瓶数）×100%

1.3 数据分析

采用Microsoft Office Excel 2017 处理数据；运用SPSS2.0软件分析比较供试配方之间的差异显著性。

2 结果与分析

2.1 供试灰树花菌株菌丝生长速度及菌落形态

由表2、图1 可知，8 个灰树花菌株菌丝生长速度有显著差异（P＜0.05，下同），同时，菌丝长势、菌丝质地及菌落特点也各有差异。菌株GF-6 生长速度最快，为0.68 cm/d，其次是菌株GF-4，生长速度为0.58 cm/d，再次是菌株GF-1、GF-5，生长速度为0.48 cm/d，均与对照菌株152 差异显著；其他菌株菌丝生长速度与对照菌株152差异不显著。菌丝生长势及菌落质地，除菌株151、GF-2 较对照菌株弱外，其他菌株菌丝长势均较强，并基于自身特性形成边缘和隆起度有异的洁白菌落。

表2 供试灰树花菌株菌丝生长速度及菌落形态

2.2 供试灰树花菌株子实体农艺性状

供试灰树花菌株中除菌株GF-4 未形成原基外，其他菌株出菇后子实体性状如表3、图2。对照菌株152的朵形横纵比最高，朵形最为挺拔，与其他菌株差异显著；其次是菌株151、GF-5、GF-6，菌株GF-3 的朵形最为平展。另外，菌株151、GF-1、GF-3、GF-6 长宽比较对照菌株152 高，其朵形更为圆润。供试菌株菌盖颜色以深色品系为主，除菌株GF-5 为白色外，其他6 个菌株均为褐色。所有供试菌株菌盖边缘平滑，菌柄较长呈匙形，菌株GF-1 和GF-3 菌盖面积更大，呈扇形。菌株GF-1、GF-2、GF-3、GF-6 较菌株152 的菌盖数量更多，朵形更为密集。不同菌株农艺性状各有差异，这为满足消费需求提供多样的选择性。

图2 供试部分灰树花菌株瓶栽子实体形态

表3 供试灰树花菌株子实体农艺性状

2.3 供试灰树花菌株子实体的生产性能

由表4 可知，对照菌株152 的瓶栽均产为84.76 g，菌株GF-1 均产较对照菌株高，为94.56 g，其次为菌株GF-6，均产为90.96 g。其他菌株的均产均低于对照菌株152，菌株GF-5 最低，瓶栽均产为71.56 g，与菌株GF-1 相差20 g 以上。由此可见，单就瓶单产而言，菌株GF-1、GF-6优势较为明显。

表4 供试灰树花菌株生产性能

对照菌株152 的瓶栽出菇率为100%，其次为菌株GF-6，瓶栽出菇率为96.88%；除菌株GF-3、GF-5出菇率为87.5%、50%且表现最差外，其他菌株的出菇率均在90%以上。菌株151 污染率与对照菌株152 相同，为0，其次为菌株GF-1、GF-6，污染率为3.13%，其他菌株污染率较高，菌株GF-5 污染率最高，为37.5%。由此可见，单就出菇率、污染率而言，除对照菌株152 外，菌株151、GF-1、GF-6 表现均较优。

菌株GF-1、GF-2、GF-3 的栽培周期为38 d，最短，比对照菌株152 少1 d；菌株GF-5 的栽培周期为44 d，最长。菌株GF-1、GF-2 的菌丝培养周期为24 d，最短，比对照菌株152少5 d；菌株GF-5的菌丝培养周期为30 d，最长。对照菌株152及菌株151的出菇期均为10 d，最短，其次是菌株GF-3，出菇期为12 d，其他菌株出菇期为14～15 d。由此可见，单就栽培周期而言，较对照菌株152，菌株GF-1、GF-2、GF-3优势明显。

3 小结

工厂化瓶栽灰树花的选择适配菌株至关重要，是提升工厂化生产产能和产值重要因素[9]。目前广泛使用（野生驯化或人工选育）的灰树花菌株，多为应用于地栽和袋栽模式[10]，瓶栽研究鲜有报道。试验结果表明，试验灰树花菌株瓶栽也能出菇，且具有一定的单产和出菇率，表明现有菌株进行工厂化瓶栽是可行的。

综合分析结果表明，菌株GF-1、GF-6在瓶栽条件下表现较为突出，瓶栽均产高，污染率低，栽培周期短，可作为进一步规模化示范栽培的菌株。但相较国外瓶栽专用灰树花菌株的表现来看，国内菌株在朵形、单产和出菇率等性能上仍存在较大的改良空间[11]。因此，今后有必要基于潜力菌株持续进行改良和选育，同时也需要对相应菌株的配套配方、栽培工艺等加以研究和精选，以进一步提高适配菌株工厂化生产性能。